Mapa_Mental_da_Biologia_Molecular_-_Conhecimentos

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Mapa Mental da Biologia Molecular -
Conhecimentos
PCR
Tecnologia do DNA
recombinante
 Eletroforese
Sequenciamento :
Tecnica utilizada para identificação de fragmentos de DNA
Maxam-Gilbert
Técnica de separação de moléculas
DNA template
Sofre influência de um campo elétrico
Utiliza uma cuba com eletrodos
Tampão da amostra 
Pelo tamanho
Enzimas de restrição
Southern
Blotting
Para visualizar e monitorar a corrida eletroforética
Northern
Blotting
Utiliza-se um controle
Corantes para detecção
Western
Blotting
AMBIENTE X GENÉTICA
Brometo de etídeo
Nitrato de prata
Comassie Blue
Autorradiografia
dNTP
separação de fitas por eletroforese
separação do DNA em nucleotídeos
Marcação e dissoclação de fitas
Variantes
taq DNA polimerase
Conjunto de técnicas que permite combinar
um DNA de um organismo com um DNA de
uma fonte diferente
Eletroforese em campo pulsado
eletroforese capilar 
gel para RNA
native-page
SDS-page
Endonucleases
Exonucleases
Termociclador
Quebram ligações de fosfodiéster no
interior da molécula
Removem um nucleotídeo de cada vez,
começando na extremidade
eletroforese de fragmentos
Primer
Sanger
método enzimatico
método de terminação de cadeia
Solução tampão
EcoRI
HindIII
Tecnica utilizada para identificação de
fragmentos de RNA
Enzima Hae III
Iniciadores
Técnica usada para separação de moléculas
proteicas
Reconhece a sequência GG-CC
Reconhece a sequência G-AATTC
dímero de primer
Reconhece a sequência A-AGCTT
amplificação
Fragmentação da molécula de DNA por
meio de digestão por enzimas de restrição
 Desenho de primer
Não há necessidade de utilizar enzimas de
restrição, pois as moléculas de RNA são
naturalmente menores
Íons MgCl2
FWD
aquele que se liga na região 3OH' - primer 1
Cofator da DNA polimerase
REV
Etapas de clonagem gênica
segundo primer
O ideal são nucleotideos de 18 a 30
2. A DNA ligase liga os fragmentos de DNA
no plasmídeo
3. Transformação: Processo em que
introduz o plasmídeo na bactéria
1. As enzimas de restrição cortam uma
parte do DNA que será clonado (inserto)
4. Seleção das bactérias que receberam o
plasmídeo; seleção feita através de um
marcador adicionado ao plasmídeo
Temperatura de melting
Fragmentos de diferentes tamanhos são
separados por eletroforese
não pode ser muito diferente entre si
Fragmentos de diferentes tamanhos são
separados por eletroforese
Temperatura de anelamento
Fragmentos de diferentes tamanhos são
separados por eletroforese
O resultado da eletroforese é transferido para
uma membrana de nitrocelulose.
Regra de alguém que não lembro o nome
Tm = 4(G+C) + 2 (A+T)
Essa membrana é submetida a um processo
de identificação das moléculas impregnadas
nele. Pode ser por identificação química ou
física (radiação).
Desnaturação da fita
Aplicações
análise de efeitos de hormônios e drogas
Anelamento Extensão
Aplicação:Hormônio do crescimento
dinucletídeo trifosfato
Produção do hormônio hGH
DNA molde
Nutrigenomica
1. É adicionado em um plasmídeo o gene
que codifica a produção de hGH
2. O plasmídeo é inserido em uma bactéria,
e essa bactéria passará a produzir o
hormônio HG, através de um indutor
químico no meio de cultura
Estuda a influencia das moléculas e nutrientes
ingeridos pela alimentação sobre a expressão
genica
3. Depois, as bactérias são quebradas para
extração do hormônio.
4. É feito um tratamento nesse hormônio
para atingir o grau de pureza exifgido
para o uso terapêutico
Essa interação ocorre atraves da
modulação da ativação ou silenciamento
dos genes (epigenético). Não ocorre
mudanças diretas na molécula de DNA
Nutrigenética
Modo como nosso organismo reage aos
nutriente e moléculas bioativas presente
na alimentação
quando adiciona algum nucleotídeo (n lembro o nome) e
depois não tem como adicionar outro na cadeia
Manual
Varia de acordo com as características genéticas de
cada individuo. Um exemplo é a diferença presente
entre cada população ao redor do mundo. Povos
asiáticos possuem uma maior expressão de genes
responsáveis pela codificação de enzimas que
digerem amido, quando comparados com povos
ocidentais.
automatizado
capilar
Ácido nucléico
DNA RNA
AUGC
Fita simples
Fita dupla
ATGC
Síntese de RNA
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