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Universidade Federal de Pernambuco (UFPE) Centro de Tecnologia e Geociências (CTG) Departamento de Engenharia Química (DEQ) Química Industrial - Microbiologia Industrial 2022.1 Docente: Sara Horacio De Oliveira Maciel Discentes: Ana Paula, Fábio Gabriel, Gabriel Eliseu, Maria Eduarda Pereira e Samyra Letícia PRÁTICA: BOLORES Resumo: Este relatório tem como objetivo evidenciar a presença de colônias de bolores ou fungos em ambientes terrestres. Dessa forma, dois meios de culturas diferenciados fizeram parte da prática e estes foram expostos em vários locais ao ar livre, habitat este muito comum a presença dos fungos. A partir deste experimento, foi possível observar e estudar o crescimento e as características de bolores crescidos em diversos locais.Chegando assim, a analisar o gênero, o crescimento de esporos e também do comportamento de colônia in vivo. Palavras chave: microbiotas; meios de cultura; atmosfera; crescimento. Introdução Em um universo tão vasto de seres invisíveis a olho nu, os fungos revelam uma invejável versatilidade. Eles ocupam quase todos os nichos e ambientes, estão praticamente onipresentes e essa sua grandeza se respalda na sua organização e morfologia celular. Classificados como organismos eucarióticos de maioria multicelulares, os fungos formam um grupo filogenético distintos de outros organismos, a saber relacionados de forma mais estreita com os animais. Formam um grande exército nos auxiliando na decomposição de matéria orgânica, pois são saprófagos e outros parasitas, captando seus nutrientes a partir das células vivas de plantas e animais que infectam e invadem[1]. Quanto a sua organização corporal, apresentam uma rede de filamentos denominadas hifas, as quais são frequentemente septadas com paredes transversais dividindo-as em células separadas. Essas hifas ao crescerem ao longo de uma superfície formam um tufo chamado de micélio ou bolor, que pode ser visualizado a olho nu. Ao atingir o ar, as hifas projetam esporos assexuais lançando-os em vários habitats que com seu desenvolvimento são visualizados pigmentação diversificada de aspetos pulverulentos, algodonosos ou aveludados[1]. Muito ainda pode ser citado a respeito dos fungos, como por exemplo sua digestão extracorpórea, seus benefícios na indústria alimentícia graças aos processos fermentativos, sua associação com os seres vivos; no entanto seu talento ficou marcado pela contribuição na descoberta dos antibióticos. Procedimento Experimental Material ● Placa de Petri com meio Czapek e Sabouraud (SAB); ● Tubos de ensaio com meio CZ e SAB. Metodologia Os integrantes da bancada selecionaram uma placa de petri estéril com meio CZ fundido e resfriado a 45ºC e outra com meio SAB de mesma condição. Em seguida, os alunos saíram do laboratório portando duas placas com meios distintos e escolheram um local. Após escolher o local, os alunos posicionaram as placas em uma superfície sólida e abriram as placas, expondo os meios dentro das placas de petri ao ar atmosférico dos ambientes durante 10 min. Na segunda etapa do experimento foram observadas as colônias que cresceram e escolhidas aquelas que foram grandes, filamentosas e de cores variadas. Após escolha das colônias foram anotados tamanho, cor, forma, bordas, consistência e presença de pigmento solúvel. Depois de anotados as características das colônias escolhidas, foram transferidos com alça de platina parte da colônia para um tubo com CZ e incubado à temperatura ambiente. Na última etapa da prática foi utilizado o microscópio e preparou-se lâminas “in vivo” com azul de lactofenol para observação do crescimento das colônias e tentou-se determinar algumas características do fungo, como tipos de hifas, tipo de esporos assexuados entre outros. Resultados e Discussão Para este experimento foram escolhidos 5 locais diferentes, por cada membro do grupo, para a exposição de duas placas de petri, contendo os meios Czapek e Sabouraud, por aproximadamente 10 minutos, aos microorganismos do ar do local em questão. Ana, escolheu expor suas placas em um local aberto no estacionamento. Após os dias necessários para o crescimento, foi possível observar os bolores apresentados na imagem 1. Eles tinham como características: Pequena, 1 bordas regulares, algodonosa e com coloração esverdeada. Imagem 1: Bolor crescido na cultura de Ana Fábio, escolheu expor suas placas na sede da Elementus, Empresa Júnior situada nas dependências do DEQ. Após os dias necessários para o crescimento, foi possível observar que não houve o crescimento de bolores nos meios de cultura em que foram expostos. Gabriel, escolheu expor suas placas no Diretório Acadêmico do DEQ. Após os dias necessários para o crescimento, foi possível observar que também não houve o crescimento de bolores nos meios de cultura em que foram expostos. Maria Eduarda, escolheu expor suas placas no banheiro feminino. Após os dias necessários para o crescimento, foi possível observar os bolores apresentados na imagem 2. Imagem 2: Bolores crescidos na cultura de Maria Eduarda Para a placa da imagem 2, foram escolhidas duas colônias para estudos. A escolhida por Fábio Gabriel como objeto de estudo tem como características: tamanho médio, bordas regulares, textura algodonosa e pigmento preto. Também na mesma placa, a escolhida por Maria Eduarda foi a colônia na parte superior da imagem, que possui como característica: tamanho pequeno, textura algodonosa, bordas irregulares, coloração verde e bordas esbranquiçadas. Samyra, escolheu expor suas placas na sala de estudos do prédio de engenharia de alimentos. Após os dias necessários para o crescimento, foi possível observar os bolores apresentados na imagem 3. 2 Onde constata-se que houve um crescimento mínimo mas satisfatório. Com isso a colônia escolhida para inoculação apresentou como características: colônia grande em relação às outras presentes na placa, com coloração esverdeada, textura algodonosa, forma arredondada e bordas irregulares. Imagem 3: Bolores crescidos na cultura de Samyra Após a seleção das colônias observou-se também que não houve presença de pigmento solúvel. Com a conclusão das características de cada uma das colônias escolhidas, as mesmas foram transferidas para um tubo com meio de cultura Czapek para incubação e observação de crescimento. Depois de aproximadamente 1 semana, foi observado um crescimento satisfatório das colônias preservando suas características macroscópicas no tubo de ensaio. Posteriormente, foi escolhida pela professora uma colônia para que pudesse ser colocada em uma câmara úmida, como mostra o sistema da imagem 4, onde coloca-se um tubo de vidro em “v” com uma pequena quantidade de água destilada sobre a placa de petri, com a lâmina contendo a colônia sobre o tubo de vidro. Imagem 4: Câmara úmida com crescimento de bolor Pode-se observar um crescimento robusto em função da umidade do sistema supracitado pois a presença de umidade favorece o crescimento de bolores. Posteriormente foi realizada uma observação “in vivo”, como mostra na imagem 5 onde foi possível concluir a 3 presença da classe Eurotiomycetes, do gênero Aspergillus e conídios, os esporos assexuados. Também foi possível observar mas hifas mas não foi possível determinar de que tipo eram. Imagem 5: Observação “in vivo” do bolor crescido na câmara úmida Conclusão Tendo sido realizado todo o procedimento experimental, pode-se chegar às seguintes conclusões. Na análise de lugares conhecidos, pode-se analisar as questões de crescimento microbiotas. Verificou-se também que o crescimento de bolores nem sempre ocorreu em lugares eficazes tanto devido a captura não ser tido equivalente, quanto a erros técnicos elaborados pelo praticante. A incubação é um ponto importante para o crescimento microbiota, pois nesse sentido acelerou a velocidade de formação, com as utilizações corretas. Outrofator positivo ao crescimento de culturas, é a presença de umidade, por isto a presença de água auxilia na exponencialidade do aparecimento das culturas. Conclui-se que ao analisar em caráter microscópico, pode-se perceber características físicas como a presença de hifa e a identificação do gênero. No qual, a câmara úmida tem grande potencial de verificar outras características de esporos, etc. Chegando ao fator conclusivo de que as análises microscópicas de fungicidas e microbiotas são de grande importância tanto para a análise de ecossistemas, aplicados a aspectos rotineiros ou industriais. Referências [1] Guanabara Koogan, 2012.T., MADIGAN, Michael, MARTINKO, John M., DUNPLAP, Paul V., and CLARK, David P.Microbiologia de Brock, 12ª edição. ArtMed, 2011. 4
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