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UNIVERSIDADE PAULISTA-UNIP RELATÓRIO DAS AULAS PRÁTICAS CURSO: BIOMEDICINA DISCIPLINA: BIOQUIMICA ESTRUTURAL NOME DA ALUNA: JULIANA GARCIA DA SILVA RA: 2143937 POLO: ÁGUAS DE LINDÓIA SP DATA:16/04/2022 INTRODUCÃO A bioquímica estrutural estuda os processos químicos que ocorrem nos organismos vivos, portanto e de suma importância para o profissional biomédico visto que a mesma trás conhecimento sobre a função de componentes celulares como proteínas, carboidratos, lipídeos, ácidos nucleicos e outras biomoléculas. No presente relatório iremos apresentar os conhecimentos obtidos durante as aulas práticas. Na aula 1 roteiro 1 estudamos e aprendemos sobre os indicadores de Ph, e no roteiro 2 estudamos sobre pH e solução tampão. Na aula 2 roteiro 1 estudamos sobre a titulação dos aminoácidos, e no roteiro 2 sobre a detecção de aminoácidos e proteínas em solução por meio de reações de coloração. Na aula 3 roteiro 1 nosso aprendizado foi sobre a desnaturação proteica, no roteiro 2 sobre as atividades enzimáticas. Na aula 4 roteiro estudamos sobre a determinação de açúcares em solução, e no roteiro 2 sobre lipídeos. No decorrer do relatório iremos trazer o que foi aprendido durante a aula pratica. Lembrando que as aulas práticas são de suma importância para que possamos fixar os conteúdos. ROTEIRO 1 AULA 1 Nessa aula foi possível aprender sobre os fundamentos teóricos do pH e os indicadores de pH. Os indicadores são substancias que mudam de cor indicando se a solução é acida ou básica. Existem vários tipos de indicadores sendo os principais: Solução de fenolftaleina: é um indicador sintético que quando dissolvemos em água se ioniza originando íons que estabelecem um equilíbrio e se transforma em uma solução incolor que ao entrar em contato com uma base ou acido muda de cor. Se colocarmos em um ácido ela se torna incolor. Solução com azul de bromotimol: é um indicador ácido-base orgânico sintético. Indicadores ácido-base: suco do repolho, nesse experimento ~e possível observar se determinados produtos são ácidos ou básicos. Nesse roteiro, enumeramos 11 (onze) tubos de ensaio e colocamos extrato de repolho roxo em todos, logo em seguida acrescentamos substancias de acordo com a seguinte ordem conforme a tabela a seguir. Em seguida foi utilizado também soluções de fenolftaleina, onde foi possível o mesmo procedimento, porem com as seguintes colorações, conforme a tabela a seguir. Repolho roxo Cor Ácido clorídrico 0,5 M Rosa Hidróxido de sódio 0,1 M verde Cloreto de sódio 10% Sem reação vinagre Rosa claro Detergente incolor lilás Água sem gás Sem reação Sabão em pó Verde água leite Leitosa Bicarbonato de sódio azul albumina Sem reação Soluções com fenolftaleína cor Ácido clorídrico 0,5 M Incolor Hidróxido de sódio 0,1 M Pink Cloreto de sódio 10% leitoso vinagre incolor Detergente incolor incolor Água sem gás incolor Sabão em pó rosa leite incolor Bicarbonato de sódio rosa albumina incolor Realizamos também com azul de bromotimol. Azul de bromotimol cor Ácido clorídrico 0,5 M laranja Hidróxido de sódio 0,1 M Azul marinho Cloreto de sódio 10% Azul marinho vinagre laranja Detergente incolor Laranja Água sem gás verde Sabão em pó azul leite Verde abacate Bicarbonato de sódio Azul marinho albumina mostarda Abaixo alguns dos procedimentos feito em sala de aula. (Repolho roxo) ( soluções com fenolftaleina) Abaixo uma imagem do indicador de Ph, para que possamos observar. https://www.saberatualizado.com.br/2019/11/como-funciona-o-indicador-de-ph-base-de.html https://www.todamateria.com.br/indicadores-acido-base/ aula 1 roteiro 2 pH e solução tampão nessa aula foi possível manusear e compreender o funcionamento de um pHmetro (medidor de pH), discutindo as reações que ocorrem em uma solução tampão (acida, neutra ou básica). Solução tampão é formado por um acido fraco misturado a um sal que possua o mesmo ânion ou por uma base fraca que com um sal de mesmo cátion. Ao receber um acido uma base forte, a solução-tampão ácida tem a tendencia de manter seu Ph inalterado. Ao receber um ácido uma base forte, a solução- tampão básica tem a tendencia de manter seu Ph inalterado. Uma solução- tampão acido é aquele que apresenta pH inferior a 7, enquanto uma solução- tampão básica é aquele que apresenta um pH superior a 7. Foi possível aprender que o sangue é uma solução tampão formada principalmente por substancias como ácido carbônico e ânion de bicarbonato. A solução tampão com a mistura de tris-acetado, é usada para separar o DNA do RNA. Abaixo iremos trazer um gráfico de titulação de valores aferidos de pH x volume/gota de cada experimento. https://www.saberatualizado.com.br/2019/11/como-funciona-o-indicador-de-ph-base-de.html https://www.todamateria.com.br/indicadores-acido-base/ Aula 2 roteiro 1 titulação de aminoácidos. Nessa aula foi possível relembrar o caráter dos aminoácidos, determinar os valores de pH das soluções de aminoácidos (glicina e acido glutâmico) utilizando a curva de titulação. Abaixo o gráfico de como ficou o experimento realizado em sala de aula. Aula 2 roteiro 2 detecção de aminoácidos e proteínas em solução por meio de reações de coloração. Nessa aula foi possível relembrar a formula geral dos aminoácidos, relembrando também a estrutura das proteínas enfatizando a estrutura primaria (ligação peptídica), verificando as propriedades das proteínas e dos aminoácidos por reação colorimétrica diferencial. As proteínas são polímeros de aminoácidos unidos por ligações que são chamadas de ligações peptídica, que a união do grupo amino (-NH2) de um aminoácido com o grupo carboxila (-COOH) de outro aminoácido através da formação de uma amida. Para a detecção de proteína e aminoácido existem diversos métodos sendo que os métodos de coloração podem ser o biureto e também com Ninhidrina. Biureto Reação com biureto 2 ml de reativo de biureto + 1ml de água Branco 1 ml de reativo de biureto + 1 ml de solução de albumina 10% Roxo 1 ml de reativo de biureto +1ml de aminoácido de glicina 1% azul 1 ml de reativo de biureto + 1ml de leite sem ferver Roxo 1 ml de reativo de biureto + 1 ml de leite fervido azul 1 ml de reativo de biureto + 1 ml de amido 1% Azul 1 ml de reativo de biureto + 1 ml de óleo de cozinha Azul 1 ml de reativo de biureto + 1ml de suco de fruta azul Foi possível observar que nos tubos 2,4 e 5 houve detecção da presença de proteínas. A reação com biureto é utilizada para verificar a presença de peptídeos. As proteínas ou peptídeos, quando tratados por uma solução diluída de sulfato de cobre em meio alcalino, apresentam uma reação purpura característica. Aula 3 roteiro 1 desnaturação proteica A desnaturalização proteica acontece quando uma proteína perde a sua estrutura tridimensional sendo que esta alteração estrutural é resultado da perda da função da proteína. São vários os fatores capazes de promover a desnaturação proteica sendo eles: temperatura, pH e agentes desnaturantes com solventes e detergentes. Abaixo vamos trazer alguns procedimentos realizados em sala e seus resultados. Ação do pH nas proteínas Resultado 2 ml de ovoalbumina a 10% + 2 ml de HCI 5M Desnaturou e gelificou 2 ml de ovoalbumina a 10% + 2 ml de HCI 0,5M Não desnaturou Ação de solventes orgânicos sobre as proteínas Resultado 2 ml de ovoalbumina a 10% + 2 ml de etanol gelado Desnaturou Ação de sais sobre as proteínas Resultado 2 ml de ovoalbumina a 10% + 2 ml de solução saturada de sulfato de amônio Desnatura Imagens dos procedimentos realizados em sala. (ação do pH nas proteínas) ( ação dos solventesorgânicos) ( ação dos sais ) https://www.ceciliacarnerofitness.com/2021/03/23/proteina-whey-y-postres-fit-peligro-para-la- salud/ aula 3 roteiro 2 atividade enzimática as enzimas são catalizadores biológicos responsáveis por aumentar a velocidade de determinada reação química, que ocorre nos seres vivos sem que sejam consumidas durante essas reações. A atividade enzimática é influenciada por fatores, sendo que os principais são a temperatura e o pH. A temperatura geralmente age positivamente nas reações químicas aumentando a taxa de uma ação enzimática. https://www.ceciliacarnerofitness.com/2021/03/23/proteina-whey-y-postres-fit-peligro-para-la-salud/ https://www.ceciliacarnerofitness.com/2021/03/23/proteina-whey-y-postres-fit-peligro-para-la-salud/ As enzimas digestivas são proteínas que ajudam na quebra de moléculas de macronutrientes em pedaços menores, como as do carboidrato, gorduras e proteínas. Sendo assim elas agem facilitando o processo de absorção dos nutrientes. As enzimas digestivas são produzidas naturalmente pelos órgãos do sistema digestivo principalmente pelo pâncreas e também são encontradas em alguns alimentos crus como: mel, banana, mamão, abacate, abacaxi, chucrute, kefir, kiwi. Durante foi realizado o procedimento da atividade enzimática da saliva (importância da amilase salivar). Umas das enzimas presentes em nossa saliva é a ptialina, que inicia a digestão do amido e do glicogênio, quebrando os mesmos em maltose. Os sais presentes na saliva neutralizam as substancias acidas e mantem, na boca um pH levemente ácido, ideal para a ação da ptialina. No instante que a tintura do iodo entra em contato com o alimento que contem amido, há a formação de um complexo amido-lugol que possui uma cor característica (azul escuro ou roxo). Abaixo algumas imagens dos procedimentos realizados durante a aula. (Atividade enzimática da saliva) ( atividade enzimática de extratos vegetais) Na atividade enzimática de extratos de vegetais observamos que quando a enzima, não solidifica e quando não há presença de enzima a solidificação. Aula 4 roteiro 1 determinação de açúcares em solução. Nessa aula foi possível relembrar a estrutura de diferentes carboidratos monossacarídeos, dissacarídeos e polissacarídeos (ligação hemiacetal, hidroxila anomérica, ligação glicosídica). Durante a aula realizamos três tipos de procedimentos sendo esses: ensaio de barfoed, ensaio de fehling e ensaio de tollens (espelho de prata) buscando caracterizar uma solução que possua açúcar redutores. Açúcar redutores são carboidratos que podem atuar como agentes redutores devido a presença de grupos aldeído ou cetona livre. Açúcares não redutores são carboidratos que não podem atuar como agentes redutores devido à ausência de grupos aldeídos livres ou cetonas livres. A maltose e a lactose são exemplos de açúcares redutores e a sacarose ~e um exemplo de um açúcar não redutor. Teste de barfoed Com este experimento é possível identificar a presença de açúcares redutores lactose e glicose. Com o resultado positivo, há uma turvação avermelhado para monossacarídeos redutores, isso acontece porque existe nas extremidades do composto um grupo funcional livre. Teste do espelho de prata Neste foi observado a formação de um espelho de prata no tubo de ensaio. Ao gotejar amônia, fica inicialmente marrom e posteriormente transparente. Adicionando glicose, agitando e aquecendo em banho maria, temos o resultado positivo com a formação do espelho de prata para açúcares redutores. https://www.fciencias.com/2014/10/02/teste-de-tollens-laboratorio-online/ teste de fehling Quando o reagente de fehling entra em contato com aldeído, ocorre a oxidação desse aldeído em acido carboxílico, reduzindo seu complexo azul, que em solução básica é um precipitado marrom avermelhado, laranja ou vermelho de Cu2O ( oxido de cobre) nesse caso ele ficou marrom, mostrando que havia um açúcar redutor presente na solução, sendo ele a glicose. Aula 4 roteiro 2 lipídeos Lipídeos são moléculas orgânicas formadas por álcool e ácidos graxos, e apresentam estruturas variadas e diversas funções orgânicas sendo elas: reserva energética, isolante térmico, além de colaborar na composição da membrana plasmática. https://www.fciencias.com/2014/10/02/teste-de-tollens-laboratorio-online/ A característica principal dos lipídeos são a insolubilidade em solventes polares e a solubilidade em solventes orgânicos (apolares). Os ácidos graxos podem sofrer reações de hidrogenação, halogenação, saponificação e etc. Hidrogenação: é a reação do acido graxo + H2, formando acido graxo saturado. Halogenação: é a reação do acido graxo insaturado com um halogênio, formando ácido graxo saturado halogenado. Saponificação: é a reação de um acido graxo + base, formando sal (sabão).] Procedimentos realizados em sala de aula. (procedimento1) (procedimento 2) ( procedimento 3) Os procedimentos acima foram realizados para observarmos como acontece a saponificação, hidrogenação e halogenação. No procedimento um houve a formação do sabão. No procedimento 3 observamos a diferença da gordura animal para a vegetal. Conclusão Com a aula pratica foi possível aprimorar os conhecimentos obtidos nas aulas teóricas, aplicando na pratica com ajuda da professora, o que ~e muito importante para a fixação do conteúdo. Referências bibliográficas https://www.todamateria.com.br/indicadores-acido-base/ acesso dia 10 de abril de 2022. https://www.saberatualizado.com.br/2019/11/como-funciona-o-indicador-de-ph- base-de.html acesso dia 10 de abril de 2022. https://www.manualdaquimica.com/fisico-quimica/solucao-tampao.htm acesso em 11 de abril de 2022. https://brasilescola.uol.com.br/quimica/desnaturacao-das-proteinas.htm acesso em 12 de abril de 2022. https://www.ceciliacarnerofitness.com/2021/03/23/proteina-whey-y-postres-fit- peligro-para-la-salud/ acesso em 13 de abril de 2022. https://essentia.com.br/conteudos/enzimas-digestivas/ acesso em 11 de abril de 2022. https://brasilescola.uol.com.br/biologia/enzimas.htm acesso em 12 de abril de 2022. https://www.fciencias.com/2014/10/02/teste-de-tollens-laboratorio-online/ acesso em 14 de abril de 2022. https://www.todamateria.com.br/indicadores-acido-base/ https://www.saberatualizado.com.br/2019/11/como-funciona-o-indicador-de-ph-base-de.html https://www.saberatualizado.com.br/2019/11/como-funciona-o-indicador-de-ph-base-de.html https://www.manualdaquimica.com/fisico-quimica/solucao-tampao.htm https://brasilescola.uol.com.br/quimica/desnaturacao-das-proteinas.htm https://www.ceciliacarnerofitness.com/2021/03/23/proteina-whey-y-postres-fit-peligro-para-la-salud/ https://www.ceciliacarnerofitness.com/2021/03/23/proteina-whey-y-postres-fit-peligro-para-la-salud/ https://essentia.com.br/conteudos/enzimas-digestivas/ https://brasilescola.uol.com.br/biologia/enzimas.htm https://www.fciencias.com/2014/10/02/teste-de-tollens-laboratorio-online/
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