Hematologia: Hemograma e Análise de Células Sanguíneas

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Hematologia 
 
Hemograma 
 
Por que o exame foi solicitado? 
 
No nosso sangue circulam três tipos 
básicos de células produzidas na 
medula óssea. 
 
São estas células que estudamos 
através do hemograma: 
 
• Hemácias 
(glóbulos vermelhos ou eritrócitos) 
 
• Leucócitos 
(glóbulos brancos) 
 
• Plaquetas 
 
 
 
 
 
 
 
Eritrograma 
 
• É a parte do hemograma que 
avalia a massa, forma e a 
variabilidade de tamanho dos 
eritrócitos circulantes. 
 
• Indicação = diagnóstico e 
tratamento: anemia, Policitemia. 
 
 
 
 
 
Impedância elétrica 
 
Formação de corrente elétrica entre 
dois eletrodos. 
 
Quando uma célula atravessa a 
corrente elétrica é gerado um 
impulso elétrico que é quantificado, 
conforme o diâmetro 
(eritrócitos, leucócitos, plaquetas). 
 
 
Determinação do tamanho de 
eritrócito grande (macrócito) em 
analisador hematológico que utiliza a 
impedância elétrica como método de 
contagem. O tamanho aumentado da 
célula é percebido pela altura do 
pulso elétrico. 
 
 
 
Determinação do tamanho do 
eritrócito pequeno (micrócito) em 
analisador hematológico que utiliza a 
impedância elétrica como método de 
contagem. O tamanho diminuído da 
célula é percebido pela altura do 
pulso elétrico. 
 
 
 
 
 
 
 
Dispersão a laser 
 
É uma técnica de medição das 
propriedades de células em 
suspensão, orientadas em um fluxo 
laminar e interceptadas uma a uma 
por um feixe de luz (LASER). 
 
• Amplificador e processador dos 
sinais luminosos (SENSORES). 
 
• Sistema computacional 
integrado para processar as 
informações oriundas dos 
sensores. 
 
• O feixe de laser incidirá sobre 
cada célula (de forma 
individual). 
 
• A radiação incidente sofrerá 
desvios que serão reconhecidos 
pelos fotossensores. 
 
A luz espalhada pelas células é 
medida por dois detectores ópticos: 
dispersão direta (FSC – Forward 
scatter) que detecta a dispersão ao 
longo do caminho do laser e 
dispersão lateral (SSC – Side 
scatter) que mede a dispersão em 
um ângulo de noventa graus em 
relação ao laser. 
 
 
 
 
 
Citometria de fluxo fluorescente 
 
O eritrócito é medido em dois 
ângulos (baixo e alto). 
 
• Um para a determinação da 
concentração de hemoglobina 
(ALTO) 
 
• Outro relacionado ao tamanho 
do eritrócito (BAIXO) 
 
 
 
 
 
 
 
Histogramas de volume e 
concentração de hemoglobina. 
 
• No gráfico de volume com os 
limites de 60 a 120 fL. Células 
microcíticas são plotadas à 
esquerda enquanto eritrócitos 
macrocíticos, à direita. 
 
• No gráfico de concentração de 
hemoglobina, células 
hipocrômicas localizam-se à 
esquerda e as hipercrômicas à 
direita. 
 
 
 
 
 
 
 
Hemoglobina 
 
A hemoglobina é um hetero-
tetrâmero formada: 
 
Heme – estrutura porfirínica (anel 
tetrapirrólico) que contêm o íon 
ferro (Fe 2+ “ferroso”), que se 
combina reversivelmente com uma 
molécula de oxigênio. 
 
Globina – cadeia polipeptídica 
(estrutura globular 4 nária) 
 
Atualmente considera-se por anemia 
a constatação clínica e laboratorial 
uma pessoa com valor de 
hemoglobina abaixo do esperado 
para sua faixa etária. 
 
 
 
 
 
 
 
Hematócrito 
 
• Razão entre a massa de 
eritrócitos e o volume de 
sangue total 
 
• O resultado em % exprime a 
concentração de eritrócitos 
obtidos por centrifugação do 
sangue não coagulado. 
 
• Valor normal: 40 a 50% 
(Adulto). Expresso em 
percentual (%) 
 
• Métodos não automatizados e 
automatizados: 
 
- Centrifugação: 
(microhematócrito) 
 
- Calculado 
(contagem de hemácias x VCM /10) 
 
- Medido pela soma de pulsos 
elétricos (impedância). 
 
 
 
• O hematócrito diminui até 
menos que o normal, indicando 
anemia, quando ocorre redução 
da produção. 
 
• O hematócrito se eleva quando 
o número de hemácias 
aumenta ou quando o volume 
de plasma diminui, como na 
desidratação. 
 
 
 
 
 
 
 
 
Contagem de Hemácias 
 
Determina o número de células 
eritrócitos (mm3 ou uL) 
 
• Expresso em milímetros 
cúbicos (mm3) de sangue. 
 
Valores normais: 
 
Homem de 4.600.000 – 6.200.000 
(4,5 – 6,2) Milhões 
 
Mulheres de 4.200.000 – 5.400.000 
(4,2 – 5,4) Milhões 
 
Diminuição da contagem – 
Eritrocitopenia 
 
Quando acompanhado de diminuição 
da Hb – anemia. 
 
Aumento da contagem – 
Eritrocitose – Policitemias 
 
Quando acompanhado do aumento 
do Ht e Hb – poliglobulia. 
 
• Métodos automatizados e não 
automatizados: 
 
- Contadores/ Analisadores 
hematológicos: impedância 
 
- Contagem em câmera de 
Neubauer. 
 
Concentração DIMINUIDA da massa 
eritrocitária 
 
• Deficiências na síntese de Hb 
 
- (anemia ferropriva, talassemia, 
sideroblástica). 
 
• Síntese deficiente de 
nucleoproteínas 
 
- (def.de vit. B12 e ácido fólico). 
 
• Hematopoese deficiente 
 
- (anemia aplásica, ...). 
 
• Alcoolismo, hepatopatias, 
neoplasias, HIV. 
 
Concentração AUMENTADA da 
massa eritrocitária 
 
• Relativa = na 
hemoconcentração secundária 
 
- Desidratação. 
 
• Absoluta = na hipóxia 
 
- Intoxicação por CO, altas 
altitudes, doença pulmonar, 
distúrbios neurológicos. 
 
 
 
• Doença renal 
 
- Cistos, hidronefrose, estenose 
de artéria renal 
 
• Tumores 
 
- Hipernefroma, hepatoma, 
tumor de adrenal, 
feocromocitoma. 
 
Índices Hematimétricos 
 
VCM = Volume corpuscular médio 
 
HCM = Hemoglobina corpuscular 
média. 
 
Relaciona a quantidade de Hb ao n° 
das hemácias. 
 
CHCM = Concentração de 
hemoglobina corpuscular média 
 
Relaciona a quantidade de Hb ao 
tamanho (Ht%) das hemácias. 
 
RDW = Amplitude de distribuição 
dos eritrócitos 
 
 
 
 
 
 
VCM 
Volume Corpuscular Médio 
 
• Indica o volume médio dos 
eritrócitos. 
 
O volume médio gira em torno de 
80 a 100 fL (L x 10-15) 
 
- Expressão em fentolitros (fL). 
 
• Determina a morfologia da 
hemácia e leva ao diagnóstico 
do tipo de anemia, 
classificando-as em: 
 
- Anemia microcítica 
VCM menor que 80 fL 
 
- Anemia normocítica 
VCM entre 80 e 100 fL 
 
- Anemia macrocítica 
VCM maior que 100 fL 
 
• Métodos de determinação: 
 
Cálculo: Hct x 10 
 ______ 
 C. E 
 
• Automação: citômetro de fluxo 
ou impedância 
 
 
 
HCM 
Hemoglobina Corpuscular 
Média 
 
• Indica a quantidade média de 
hemoglobina (Hb) presente em 
cada eritrócito. 
 
Utilizado para identificar o tipo e 
causa da anemia. 
 
Valor normal: 27 a 32 pg 
(picogramas). 
 
Expresso em picogramas (pg) = 
g x 10-12 
 
• Métodos de determinação: 
 
Cálculo: Hb x 10 
 ______ 
 C. E 
 
• Automação: Citômetro de fluxo 
ou impedância 
 
• Não automatizado 
 
- Câmara de Neubauer + 
espectrofotômetro. 
 
• Dependendo do valor 
encontrado a anemia pode ser 
classificada em: 
 
 
• Anemia Hipercrômica 
 
HCM maior que 32 picogramas: 
 
- Deficiência de vitamina B12 ou de 
ácido fólico 
 
- Também pode ser causado por 
doenças hepática e após 
quimioterapia. 
 
• Anemia Normocrômica 
 
HCM entre 27 e 32 picogramas: 
 
- Indica que a causa da anemia é 
perda de sangue. 
 
- Hemorragia, sangue nas fezes, 
hematêmese, linfomas, sepse e 
síndrome nefrítica. 
 
• Anemia Hipocrômica 
 
HCM menor a 27 picogramas 
 
- Pode ser causada por 
deficiência de ferro. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
CHCM 
Concentração de 
Hemoglobina Corpuscular 
Média 
 
Indica a concentração média de 
hemoglobina (Hb) baseado em um 
volume (100 mL) de eritrócitos 
(Ht%). 
 
• Utilizado para identificar o tipo 
e causa da anemia. 
 
• Valor normal: 32 a 37 g/dL 
(grama por decilitro) 
 
• Métodos de determinação: 
 
Cálculo: Hb x 100 
 _____ 
 Ht 
 
• Automação: citômetro de fluxo 
ou impedância. 
 
• Não automatizado 
 
- Microhematócrito + 
espectrofotômetro. 
 
CHCM = Relaciona a quantidade de 
Hb ao tamanho (Ht%) das hemácias. 
 
HCM = Relaciona a quantidade Hb 
ao n° das hemácias. 
Índices Hematimétricos 
 
VCM = Hct (%) x 10 
 _________________ 
 C.E x 10 6 mm3 
 
Fentolitros (fL) 
 
 
HCM = Hb (g/dL) x 10 
 _________________ 
 C.E x 10 6 mm3 
 
Pg (picogramas) 
 
CHCM = Hb (g/dL)x 100 
 _______________________ 
 Hct (%) 
 
g/dL (Grama por decilitro) 
 
RDW 
Red blood cells 
Distribution Width 
Amplitude de Distribuição 
dos Eritrócitos 
 
• Mede a variação no tamanho 
das hemácias 
 
• Quando muito diferentes, 
indica uma heterogenicidade 
no tamanho celular que é 
denominada anisocitose. 
 
• Valor de Referência = 10,0 – 
14,0% 
 
 
 
Avaliação Microscópica 
 
• Nesta etapa, é possível 
classificar a hemácia quanto ao 
tamanho, forma, coloração 
celular e, presença ou ausência 
de inclusões. 
 
• Qualquer alteração relevante 
deve ser descrita de forma 
criteriosa no laudo. 
 
 
 
 
Anormalidades dos Eritrócitos 
 
• Anisocitose 
Variação em tamanho da célula 
 
- Microcitose: menor que o tamanho 
normal 
 
- Macrocitose: maior que o tamanho 
normal 
 
• Poiquilocitose 
Variação na forma da célula 
 
• Policromasia 
Alteração na coloração da 
célula 
 
- Hipocromia: diminuição da 
concentração de hemoglobina. 
 
Classificação laboratorial 
das anemias 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Alterações Patológicas – 
Série Vermelha 
 
 
 
Eliptócito/ Ovalócito (seta) – 
Hemácias que perdem elasticidade 
normal quando passam por um vaso 
sanguíneo de pequeno calibre devido 
à um defeito na proteína espectrina 
do citoesqueleto, não retornando ao 
seu formato normal. 
 
Acantócito (seta tracejada) – 
Hemácia que apresenta espículos, 
que são projeções citoplasmáticas 
distribuídas irregularmente ao redor 
da célula. Acantócitos tem espículos 
de variados tamanhos e em menor 
quantidade que hemácias crenadas. 
 
 
 
Codócito (Seta): hemácia 
apresentando um círculo no centro. 
 
 
 
Anisocitose (diferenc ̧a de tamanho 
entre hemácias) 
 
Pecilocitose (eritrócitos com formas 
anormais) e 
Policromasia (hemácias 
policromáticas - seta tracejada); 
 
Codócitos (seta) - Hemácias em alvo; 
 
Dacriócito (seta dupla) - hemácias 
que adquirem formato de "gota" ao 
passarem, principalmente, pelo bac ̧o 
sofrendo estiramento; 
Fragmentos de Hemácias (seta 
tracejada dupla); 
 
 
 
Anisocitose evidente: diferenc ̧a no 
tamanho das hemácias. 
 
Macrócito (seta) - Hemácia maior 
que o tamanho normal; 
 
Micrócito (seta tracejada) - Hemácia 
menor que o tamanho normal; 
 
Eritrócito de tamanho normal (seta 
dupla). 
 
 
 
Eritroblasto basófilo. 
 
 
 
Eritroblasto basófilo (seta), segunda 
fase de maturac ̧ão eritrocitária 
(após o proeritroblasto), citoplasma 
azulado (basofílico), a cromatina 
comec ̧a a se condensar. 
 
Eritroblasto policromático (seta 
dupla) - Terceira fase de maturac ̧ão 
eritrocitária, núcleo com cromatina 
condensada e citoplasma levemente 
acinzentado devido a 
hemoglobinizac ̧ão (confere 
acidofilia). 
 
Eritroblasto ortocromático (seta 
tracejada) - Quarta fase de 
maturac ̧ão eritrocitária, 
demonstrando núcleo picnótico e 
geralmente exce ̂ntrico ou sendo 
expulso da célula, citoplasma mais 
acidófilo (intensa hemoglobinizac ̧ão). 
 
 
Eritroblasto policromático (seta). 
Eritroblastos ortocromáticos (setas 
tracejadas). 
Outros elementos: 
Monócito (seta dupla). 
 
 
Eritroblasto policromático. 
 
 
Eritroblasto policromático binucleado. 
 
 
 
 
 
 
 
Reticulócitos 
(colorac ̧ão com azul de cresil 
brilhante). 
Quinta e última fase de maturac ̧ão 
eritrocitária, apresentando vestígios 
de RNA que conferem a 
característica de policromasia. 
Só podem ser identificados pela 
colorac ̧ão com azul de cresil 
brilhante. 
Reticulocitose evidente. 
 
 
 
 
Rouleaux eritrocitário 
Normalmente a carga ao redor das 
hemácias é negativa, o que causa 
repulsão entre elas. 
Esse efeito é conhecido como "Fator 
Zeta" e, quando este é anulado, as 
hemácias empilham-se formando o 
Rouleaux. 
Ocorre em situac ̧ões como o 
mieloma 
múltiplo devido ao aumento de 
gamaglobulinas no sangue. 
 
 
 
 
 
 
 
Anotações em aula 
Citometria de fluxo – por dispersão 
a laser 
Sistema optico e hídrico 
A hemoglobina define se a pessoa 
tem anemia ou não. Ela é 
fundamental. 
Se estiver baixa, possuí anemia. 
Quantidade de Hemoglobina que 
possuímos por d/L. 
12g ------- 1000 mL 
X --------- 5000 mL 
 
1000 X = 5000 * 12 
X = 5000 * 12 
 ______________ 
 1000 
 
X = 600 g 
 
Hematócrito medido em 
porcentagem (%). 
 
VCM = 55 (%) 
 __________ x 10 
 6,2 (106) 
 
VCM = 88 fL 
 
 
 
HCM = 14 (g/dL) 
 ____________ x 10 
 5,8 (106) 
 
HCM = 24 pg