Questionário sobre análises microbiológicas da água

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UNIVERSIDADE CATÓLICA DO SALVADOR
Curso: Biomedicina Turno: Matutino
Disciplina: Análise ambiental aplicada à Biomedicina Data:
Professor: Sânzio Santana
Discente: Brenda Rodrigues Brito Cunha
Instruções:
● A atividade deve ser realizada individualmente
● Redigir o texto com formatação apropriada (Times New Roman ou Arial), texto justificado, espaçamento entre linhas de 1,5
● Não será permitido cópia (plágio) – a constatação de plágio implicará na anulação da atividade dos alunos envolvidos
Atividade 7 – Análise Microbiológica da Água
QUESTÃO 1. Em relação ao método de determinação pelo Número Mais Provável (NMP) utilizando múltiplos tubos,
responda:
a) Como o método funciona? (0,1 ponto)
A tabela do NMP é um método de análise quantitativo que nos permite calcular, para uma determinada amostra,
os números microbianos que estatisticamente são os mais prováveis de terem levado aos resultados obtidos,
estimando a colônia de bactérias presentes baseando-se em probabilidades estatísticas.
b) Considere que se obteve os seguintes resultados para uma dada análise de água: CL = 5-3-3 / VB = 4-3-1 / EC =
3-0-0. O que isso quer dizer? Estabeleça a relação desses valores com NMP/100 mL e explique o que o limite de
confiança de 95% indica considerando os limites superior e inferior. (0,1 ponto)
Para o meio CL, conclui-se que o índice do NMP para 100mL é 170. Estatisticamente, isso significa que 95% das
amostras de água que apresentaram esse resultado contêm 80 a 440 bactérias, com 170 sendo o número mais
provável. Para o meio VB, conclui-se que o índice do NMP para 100mL é 33. Estatisticamente, isso significa que
95% das amostras de água que apresentaram esse resultado contêm 15 a 77 bactérias, com 33 sendo o número
mais provável. E para o meio EC, conclui-se que o índice do NMP para 100mL é 8. Estatisticamente, isso significa
que 95% das amostras de água que apresentaram esse resultado contêm de 3 a 24 bactérias, com 8 sendo o
número mais provável. O intervalo de confiança de 95% oferece a informação de que, em pelo menos 95% dos
testes utilizando uma determinada amostra, há a chance da concentração real de microrganismos alvos estarem
incluídos nesse intervalo calculado para cada combinação de tubos positivos.
QUESTÃO 2. Considere a seguinte diluição, e responda:
a) A suspensão de bactérias apresentou quais diluições nos tubos 2, 3, 4 e 5, respectivamente? (0,1 ponto)
1:100, 1:1000, 1:10000 e 1:100.000
b) Qual valor de UFC/mL do tubo 4, considerando que 1 mL deste foi inoculado em uma placa de petri contendo meio
de crescimento onde foram contabilizadas 55 e 48, respectivamente? (0,2 ponto)
1mL (alíquota) x 1/10000 (fator de diluição) = 0,0001
51,5 (média das colônias)/0.0001 (fator de diluição) = 515.000 ≈ (aproximadamente) 5,1*10^5
QUESTÃO 3. Uma amostra de água foi diluída seriamente até diluição 10-4. Para isso, uma alíquota de 0,2 mL dessa
água foi utilizada para inoculação em uma placa de ágar por 48 h. Após este período, foram contabilizadas 23 (replicata
1) e 26 (replicata 2) colônias de bactérias nas placas de petri. Pergunta-se:
a) Por que o profissional optou por diluir a amostra? Justifique. (0,1 ponto)
É importante realizar as diluições de forma a diminuir a concentração de microrganismos, de forma a ser possível
quantificar o valor encontrado pelos métodos que forem empregados para a análise em específico, nesse caso, a
contagem das colônias de microrganismos presentes na amostra.
b) Quantas UFC de bactérias por mililitro (UFC/mL) de água foram encontradas? Demonstrar o cálculo realizado. (0,2
ponto)
0,2mL (alíquota) x 1/10000 (fator de diluição) = 0,00002
24,5 (média das colônias)/0,00002 (fator de diluição) = 1.225.000 ≈ (aproximadamente) 1,2*10^6
QUESTÃO 4. Como funciona o método da membrana filtrante para determinação de bactérias na água? Qual a sua
principal vantagem? (0,2 ponto)
É um método de concentração de bactérias em que se utiliza um filtro estéril, colocado num suporte de filtração,
onde a amostra de água concentrada será filtrada por vácuo. O filtro contendo as bactérias posteriormente será
incubado em condições adequadas que permitam o crescimento de colônias em um meio sólido. A sua principal
vantagem é conseguir reter organismos de tamanhos variados que sejam maiores do que os poros contidos no
filtro, permitindo uma maior concentração de microrganismos a serem analisados.