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Enzimologia
Professor(a): Fabio Pinheiro Gazzi (Mestrado acadêmico)
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Inibidores são agentes que diminuem a atividade enzimática, interagindo com os grupos
específicos da enzima responsáveis pela ação catalítica ou sua regulação. As inibições afetam a
cinética e os mecanismos de reação das enzimas. Os inibidores atuam de diferentes formas de
acordo com a ligação estabelecida e o local específico que interage com a enzima. Diante do
exposto, leia e associe as colunas.
Assinale a alternativa que traz a associação correta entre as duas colunas:
Alternativas:
I-C; II- B; III-A
I-B; II-A; III-C.
I-A; II-B; III-C.  INCORRETO
I-A; II-C; III-B
I-C; II-A; III-B. CORRETO
Código da questão: 71665
A purificação de enzimas é realizada por meio de técnicas subsequentes de
baixa e alta resolução, como precipitação na presença de sais e cromatografia
de troca iônica. Diante do exposto, leia e associe as colunas.
Assinale a alternativa que traz a associação correta entre as duas colunas:
Alternativas:
I-A; II- D; III-B; IV-C.
I-C; II-A; III-D; IV-B.
Resolução comentada:
3)
4)
I-B; II-A; III-D; IV-C.
I-A; II-C; III-D; IV-B.
I-C; II-A; III-B; IV-D.  CORRETO
Código da questão: 71670
A manutenção estrutural das enzimas durante as reações bioquímicas é um desafio para a
aplicação industrial dos biocatalisadores. Para superar esse desafio, uma alternativa são enzimas
imobilizadas com eficiência funcional. Os métodos de imobilização empregam diferentes princípios
para confinar ou reter as enzimas nos suportes. Analise as afirmativas a seguir e assinale-as com V
(verdadeiro) ou F (falso):
(  ) No método de imobilização por ligação covalente, a imobilização depende dos grupos
funcionais naturalmente presentes na superfície da enzima.
(  ) Na imobilização por reticulação, as enzimas são imobilizadas por meio de ligações cruzadas
com o suporte, as quais estabilizam a estrutura enzimática.
(  ) O aprisionamento ou a encapsulação geralmente requer a síntese da matriz polimérica (suporte)
na presença da enzima.
(  ) Independentemente de efeitos difusionais do substrato e do produto, os parâmetros cinéticos
de uma enzima imobilizada em um suporte de rede polimérica por encapsulação são iguais aos da
enzima livre.
(  ) A adsorção física é um método não covalente de imobilização, o qual não necessita de
reagentes de acoplamento adicionais ou modificação prévia da enzima de interesse.
Assinale a alternativa que contenha a sequência correta de V e F:
Alternativas:
V – V – F – V – F.
V – V – F – F – V.
F – V – F – V – F.
F – F – V – V – V
V – F – V – F – V.  CORRETO
Código da questão: 71674
A eletroforese é utilizada para a separação de proteínas de acordo com sua _____________ e seu
tamanho. No SDS-PAGE, um detergente ___________ é utilizado para conferir carga __________ à
enzima, e a separação ocorre apenas com base no tamanho. Na eletroforese bidimensional, as
Resolução comentada:
Resolução comentada:
A primeira, terceira e a quinta afirmativas são verdadeiras.
Veja a forma correta das afirmativas falsas:
Segunda – Na imobilização por reticulação, as enzimas são imobilizadas na ausência de
suporte, usando um reagente bifuncional para formar ligações cruzadas que estabilizam
a estrutura enzimática.
Quarta – Os efeitos difusionais do substrato e do produto modificam os parâmetros
cinéticos de uma enzima imobilizada em um suporte de rede polimérica por encapsulação
em comparação com a enzima livre.
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enzimas são separadas de acordo com o ___________ e a massa molecular.
Assinale a alternativa que completa adequadamente as lacunas:
Alternativas:
Afinidade biológica; negativo; aniônica; potencial hidrogeniônico.
Carga; aniônico; negativa; ponto isoelétrico.  CORRETO
Forma; aniônico; positiva; tamanho.
Carga; catiônico; negativa; ponto isoelétrico.
Afinidade biológica; negativo; catiônica; pH.
Código da questão: 71668
A purificação de enzimas é realizada a partir de diversas etapas subsequentes. A purificação de
baixa resolução proporciona a separação e a concentração da enzima de interesse. Os métodos
cromatográficos, por sua vez, são de alta resolução e proporcionam o aumento do grau de pureza
da amostra. Sobre as metodologias de purificação aplicadas para enzimas de interesse industrial,
analise as afirmativas a seguir e assinale-as com V (verdadeiro) ou F (falso):
(  ) A técnica de salting in aplica uma solução com baixa concentração de sais para promover a
agregação de proteínas na matriz (fase estacionária) devido a interações iônicas. Após a aplicação
de um gradiente de sal, a enzima adsorvida na matriz é liberada.
(  ) A filtração em membrana é uma metodologia de concentração de biomoléculas na qual a
solução é bombeada tangencialmente ao longo da superfície da membrana. Na microfiltração, na
ultrafiltração e na nanofiltração, as enzimas de interesse são separadas com base no tamanho,
aplicando um gradiente de pressão.
(  ) A cromatografia de exclusão molecular é aplicada para separar moléculas de acordo com o seu
tamanho. Enzimas com maior massa molecular percorrem a coluna de forma mais lenta, enquanto
enzimas de menor tamanho são eluídas rapidamente.
(   ) A cromatografia por afinidade permite a separação de biomoléculas de acordo com a afinidade
biológica pelo ligante presente na matriz. Enzimas podem ser separadas nesse tipo de
cromatografia aplicando um composto não reativo análogo ao substrato.
(  ) As cromatografias de exclusão molecular e de interação hidrofóbica são dependentes da
hidrofobicidade da molécula de interesse. Ambas utilizam um gradiente de solvente orgânico ou
uma solução de alta força iônica como eluente.
Assinale a alternativa que contenha a sequência correta de V e F:
Alternativas:
V – F – F – V – V.
V – V – V – F – F.
F – V – F – V – V.
F – V – F – V – F.  CORRETO
F – F – F – V – F.
Resolução comentada:
A eletroforese é utilizada para a separação de proteínas de acordo com sua carga e seu
tamanho. No SDS-PAGE, o detergente aniônico é utilizado para conferir carga negativa à
enzima, e a separação ocorre apenas com base no tamanho. Na eletroforese bidimensional,
as enzimas são separadas de acordo com o ponto isoelétrico e o tamanho.
Resolução comentada:
A segunda e a quarta afirmativas são verdadeiras.
Veja a forma correta das afirmativas falsas:
Primeira – A técnica de salting in aplica uma solução com baixa concentração de sais para
promover interações iônicas e agregação entre moléculas de proteínas.
Terceira – A cromatografia de exclusão molecular é aplicada para separar moléculas de
acordo com o seu tamanho. Enzimas com maior massa molecular percorrem a coluna
rapidamente, enquanto enzimas menores penetram os poros e são eluidas lentamente.
6)
7)
Código da questão: 71669
Os inibidores de peptidases podem ser encontrados em peptídeos presentes no veneno de
espécies peçonhentas. Juliana, engenheira de biotecnologia, está trabalhando com inibição
enzimática de peptidases e verificou que o peptídeo X, isolado de uma espécie de escorpião, é
caracterizado por se ligar ao sítio ativo da enzima, enquanto o Y, isolado de uma serpente, atua
especificamente no complexo ES. Durante os experimentos da cinética enzimática, observou
mudanças nos parâmetros cinéticos de acordo com o tipo de inibidor.
Sobre os experimentos de inibição enzimática realizados por Juliana, analise as assertivas a seguir e
identifique as corretas:
I. Na presença do inibidor X, mais substrato será necessário para atingir V /2.
II. No inibidor X, o K será menor do que o K da enzima sem a presença do inibidor.
III. Na cinética com o inibidor X, a velocidadede reação atingirá a V similar ao observado na
ausência do inibidor.
IV. Aumentado a [S], acarretará menor influência dos efeitos inibitórios de Y.
V.  O gráfico dos duplos recíprocos para um inibidor X apresenta intersecção em um mesmo valor
de 1/V .
São verdadeiras:
Alternativas:
I, III e V, apenas. CORRETO
II, IV e V, apenas.
I, IV e V, apenas.
I, II e III, apenas.
III, IV e V, apenas.  INCORRETO
Código da questão: 71666
As enzimas guiam e regulam o metabolismo das células e, por esse motivo, são efetivamente
controladas. Vários fatores e moléculas, como cofatores e inibidores, podem aumentar ou controlar
as atividades enzimáticas por regularem as taxas de velocidade de uma reação de acordo com as
condições requeridas. Conforme o enunciado, analise as afirmativas a seguir e assinale-as com V
(verdadeiro) ou F (falso):
( ) Cofatores denominados de grupos prostéticos permanecem ligados à enzima no sítio ativo por
vários ciclos de reações enzimáticas e são capazes de se autorregenerar.
( ) Os inibidores enzimáticos irreversíveis são aqueles cujo efeito desaparece quando são removidos
da solução por diferentes procedimentos, como diálise.
Quinta – A cromatografia de interação hidrofóbica é dependente da hidrofobicidade da
molécula de interesse e utiliza como eluentes solventes orgânicos ou uma solução de baixa
força iônica.
máx
m m
máx
máx
Resolução comentada:
A afirmativa I é verdadeira, pois o inibidor X, de acordo com as características descritas na
questão, é um inibidor competitivo, e, portanto, durante a cinética uma maior concentração
de substrato será necessária para formar o complexo ES e atingir a V /2.
A afirmativa II é falsa, pois, como precisará de maior [S] para a formação do complexo ES, o
valor de K será maior quando comparado ao valor de K da enzima sem a presença de
inibidor.
A afirmativa III é verdadeira, pois, apesar de afetar o K , o inibidor competitivo não altera a
V , e a enzima com inibidor X atingirá valor similar à cinética da enzima sem inibidor.
A afirmativa IV é falsa, pois o inibidor Y, de acordo com as características apresentadas, é um
inibidor incompetitivo e atua especificamente no complexo ES. A adição de maior [S] não
acarretará mudanças nos parâmetros cinéticos, uma vez que a enzima consegue se ligar ao
substrato.
A afirmativa V é verdadeira, pois a V na inibição competitiva não é alterada.
máx
m m
m
máx
máx
8)
( ) Os inibidores reversíveis do tipo competitivo impossibilitam a ligação do substrato ao sítio ativo
da enzima, sem afetar de forma permanente a atividade catalítica.
( ) Inibidores reversíveis são aqueles que modificam covalentemente a enzima, de tal forma que,
quando eliminados, a enzima continua inativa.
(  ) Uma reação catalisada por uma apoenzima não ocorre de forma efetiva, uma vez que a enzima
está inativa pela ausência do seu cofator.
Assinale a alternativa que contenha a sequência correta de V e F:
Alternativas:
F – V – F – V – V.
V – V – F – V – F.
V – F – F – F – V.
V – F – V – F – V.  CORRETO
F – F – V– F – F.
Código da questão: 71664
Uma das principais características das enzimas é seu alto grau de especificidade, o que as
distingue dos catalisadores químicos. Alguns modelos surgiram ao longo dos avanços da ciência
para explicar a complementariedade entre a enzima e o substrato durante a catálise. Diante do
exposto, leia e associe as duas colunas conforme os modelos relacionados à formação do
complexo enzima-substrato (ES) e os conceitos associados à reação enzimática.
Assinale a alternativa que traz a associação correta entre as duas colunas:
Alternativas:
I-D; II-A; III-C; IV-B
I-B; II-C; III-A; IV-D.
I-A; II-D; III-C; IV-B.
I-A; II-D; III-B; IV-C.  CORRETO
I-D; II-A; III-B.; IV-C
Resolução comentada:
A primeira, a terceira e a quinta afirmativas são verdadeiras.
Veja a forma correta das afirmativas falsas:
Segunda – Os inibidores enzimáticos reversíveis são aqueles cujo efeito desaparece quando
são removidos da solução por diferentes procedimentos, como diálise.
Quarta – Inibidores irreversíveis são aqueles que modificam covalentemente a enzima, de
tal forma que, quando eliminados, a enzima continua inativa.
Resolução comentada:
9)
Código da questão: 71660
Uma empresa do ramo de biotecnologia, voltada para a produção de enzimas de interesse
industrial, analisou a imobilização da enzima pectinase, aplicada na clarificação de sucos, por
adsorção física, aprisionamento e ligação covalente nos suportes resíduo de girassol, quitosana e
casca de ovo ativada com glutaraldeído, respectivamente. Um dos experimentos principais foi
investigar a reutilização do biocatalisador por diferentes ciclos operacionais, como apresentado no
Gráfico.
Gráfico – Ciclo de reutilização da enzima pectinase imobilizada nos suportes resíduo de girassol,
quitosana e casca de ovo.
Sobre a estabilidade operacional, analise as assertivas a seguir e identifique as corretas:
I. A pectinase reduziu sua atividade em resíduo de girassol após ser reutilizada por 8 ciclos devido a
problemas difusionais relacionados à liberação do produto.
II. No suporte casca de ovo com glutaraldeído, a enzima reteve sua atividade enzimática após 8
ciclos possivelmente porque a imobilização por ligação covalente promove uma rigidez que
dificulta a mudança na conformação nativa, mantendo-se, então, estável ao longo dos ciclos de
reutilização.
III. No método de aprisionamento, pode ter ocorrido perda da atividade ao longo da reutilização
devido ao vazamento da pectinase pelos poros da matriz. 
IV. As ligações cruzadas entre as moléculas de pectinase imobilizada em quitosana foram desfeitas
ao longo dos ciclos de reutilização, o que provocou a redução da atividade após 8 ciclos.
V. Na imobilização por adsorção, a perda progressiva da atividade enzimática pode ter sido
causada devido à redução das forças das interações que promoviam a imobilização da enzima no
suporte.
São verdadeiras:
Alternativas:
II, III, IV e V, apenas.
I, IV e V, apenas.
II, III e V, apenas.  CORRETO
I, II e IV, apenas.
I, III, IV e V, apenas.
10)
Código da questão: 71676
O potencial catalítico e a especificidade durante a catálise enzimática dependem das interações
entre enzima, substrato e _________, quando necessário. Os grupos orgânicos de cofatores são
geralmente derivados das ___________ e realizam vários tipos de reações importantes para a célula.
Algumas coenzimas estão associadas por ligações permanentes com a enzima e são denominadas
de _______________. Por sua vez, alguns cofatores estão ligados reversivelmente, funcionando como
_______________.
Assinale a alternativa que completa adequadamente as lacunas:
Alternativas:
Mg ; coenzimas; cossubstratos; grupos prostéticos
Cofator; vitaminas; grupos prostéticos; cossubstratos.  CORRETO
Vitamina; coenzimas; inibidores irreversíveis; inibidores incompetitivos.
Íon orgânico; apoenzimas; holoenzimas; inibidores competitivos.
Cofator; holoenzimas; vitaminas; apoenzimas.
Código da questão: 71663
Resolução comentada:
A afirmativa I é falsa, pois problemas difusionais geralmente são relatados na imobilização
por aprisionamento devido ao confinamento da enzima.
A afirmativa II é verdadeira, pois a imobilização covalente promove uma rigidez na estrutura
enzimática que dificulta a mudança para uma conformação menos ativa; além disso, oferece
uma forte ligação química que evita a lixiviação da enzima ao longo da reutilização.
A afirmativa III é verdadeira, pois o uso repetido de enzimas retidas em matrizes porosas por
aprisionamento pode provocar vazamento da enzima através desses poros.
A afirmativa IV é falsa,
pois as ligações cruzadas entre as enzimas são características da imobilização
por reticulação; adicionalmente, a enzima imobilizada em quitosana está
confinada em uma matriz polimérica, e, logo, a perda da atividade ao longo dos ciclos pode
ter sido provocada pelo vazamento de pectinase pelos poros dessa matriz.
A afirmativa V é verdadeira, pois na imobilização por adsorção físicaas ligações de
hidrogênio ou hidrofóbicas, características desse modo, são ligações fracas que podem ter
sido desfeitas e provocado a dessorção da enzima no suporte.
2+
Resolução comentada:
O potencial catalítico e a especificidade durante a catálise enzimática dependem das
interações entre enzima, substrato e cofator, quando necessário. Os grupos orgânicos de
cofatores são, geralmente, derivados das vitaminas e realizam vários tipos de reações
importantes para a célula. Algumas coenzimas estão associadas por ligações permanentes
com a enzima e são denominadas de grupos prostéticos. Por sua vez, alguns cofatores
estão ligados reversivelmente, funcionando como cossubstratos.
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