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Tecnologia de Bioprocessos Profa. Cristiane • Biotecnologia • Conjunto de técnicas e processos industriais que envolvem a utilização de organismos vivos (bactérias, fungos, leveduras, algas, células vegetais ou animais) na produção de bens e serviços. Introdução • Compostos de interesse industrial pela ação microbiana: – Biomassa microbiana – cogumelos comestíveis – Inoculantes agrícolas – Bacillus e Rhizobium – Alimentos e bebidas – Enzimas – Metabólitos - antibióticos – Vacinas – Energia – através de biorreatores – Outras aplicações Introdução Introdução • Bioprocessos “processos conduzidos por agentes biológicos” Matéria – Prima Meio de cultivo Esterilização Transformação Produto Introdução Agentes Biológicos Profa. Cristiane • Microrganismos que possam ter interesse industrial podem ser obtidos basicamente das seguintes formas: – Isolamento a partir de recursos naturais; – Compra em coleções de culturas; – Obtenção de mutantes naturais; – Obtenção de mutantes induzidos por métodos convencionais; – Obtenção de microrganismos recombinantes por técnicas de engenharia genética. Agentes Biológicos Agentes Biológicos Agentes Biológicos Agentes Biológicos • Características desejáveis nos microrganismos: – Apresentar elevada eficiência na conversão do substrato – Permitir o acúmulo do produto no meio – Não produzir substâncias incompatíveis com o produto – Estabilidade – resistência e tolerância – Não exigir meios de cultura caros – Atender as necessidades nutricionais dos microorganismos – Não ser patogênico • Tipos de microrganismos utilizados na indústria – Bactérias – Fungos • Bolores • Leveduras Agentes Biológicos • Liofilização • Técinas de congelamento – Freezer (temperatura -4°C a -20°C) – Ultra freezer (temperatura – 60°C a 80°C) – Nitrogênio líquido (-196°C) Agentes Biológicos • Nutrição Microbiana – Fonte de Carbono • Energia • Macromoléculas • Moléculas menores Agentes Biológicos • Nutrição Microbiana – Fonte de Nitrogênio • Orgânico • Inorgânico Agentes Biológicos • Formação de aa e ácido nucléico; • Utilizam nitrato, amônio e às vezes nitrogênio gasoso como única fonte de nitrogênio; • Nitrogênio de outras fontes; • Alguns requerem aa (específicos) Agentes Biológicos • Nutrição Microbiana – Fonte de Minerais • P – ATP e ácidos nucléicos • S – aa e proteínas • K – ativador enzimático e regulador da pressão osmótica • Mg – cofator enzimático • Ca - cofator enzimático – Micronutrientes – Cu, Co, Zn, Mn, Na Agentes Biológicos • Nutrição Microbiana – Fatores de crescimento • Vitaminas • Aminoácidos • Nucleotídeos • Ácidos graxo Agentes Biológicos • Água – Ação enzimática – Dissolução de materiais orgânicos e inorgânicos – Participa em muitos processos metabólicos – Regulador térmico – Regulador da pressão osmótica Agentes Biológicos • Oxigênio – Aeróbios – Microaerófilos – Anaeróbios – Aeróbios facultativo Agentes Biológicos • Reprodução Microrganismos – Bactérias Agentes Biológicos • Reprodução Microrganismos – Leveduras e Fungos Agentes Biológicos Agentes Biológicos • Medida da concentração de componente do meio de fermentação – Concentração celular • Concentração expressa em massa seca • Centrifugação para determinação do volume celular • Densidade óptica • Contagem microscópica • Contagem em placas • Medida de componentes celulares Agentes Biológicos Agentes Biológicos Concentração expressa em massa seca • Centrifugação para determinação do volume celular Agentes Biológicos • Densidade óptica Agentes Biológicos Agentes Biológicos • Contagem microscópica • Contagem em placas Agentes Biológicos • Medida de componentes celulares – Proteínas – DNA/RNA Agentes Biológicos Meios de Cultivo Meios de Cultivo • Conter nutrientes – máxima atividade do microrganismo; • Condições ótimas para o crescimento celular que nem sempre são as mesmas para o processo produtivo; Meios de Cultivo • Importância do conhecimento das exigências nutricionais do Mo: – Fortificar componentes que faltam – Retirar aqueles que inibem – Escala de laboratório – Escala Industrial Meios de Cultivo • Tipos de meios Complexos Quimicamente definidos Meios de Cultivo • Complexos – Subprodutos industriais – Composição variável – Requerem suplementação Meios de Cultivo Meios de Cultivo • Quimicamente definidos – Produtos puros – Composição química conhecida e reproduzível – Contendo fontes e nutrientes essenciais – Pesquisa e desenvolvimento de Bioprocessos – Exemplo: meio mínimo Meios de Cultivo Meios de Cultivo Meios Complexos Meios Quimicamente definidos •Mais adequado a nível industrial •São mais baratos •Melhores rendimentos e Produtividade •Permite melhor controle das condições ambientais •Mais fácil excluir substâncias e inibidores e incluir precursores e indutores nos níveis adequados • Formulação dos meios de cultivo Meios de Cultivo
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