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DISCIPLINA: CLONAGEM GÊNICA: FUNDAMENTOS E APLICAÇÕES NA BIOTECNOLOGIA (PCF 00041) No. de Créditos: 5 Carga Horária: 75 DISTRIBUIÇÃO DIDÁTICA: Teórica: 45 Prática: Outras Ativid: 30 RESPONSÁVEL: Sandro Roberto Valentini Conteúdo Programático • CONCEITOS BÁSICOS o estrutura e propriedades dos ácidos nucléicos o replicação, transcrição e tradução o regulação da expressão gênica • CLONAGEM MOLECULAR: CONCEITOS E FERRAMENTAS o endonucleases de restrição o enzimas modificadoras: DNA polimerases, DNA ligases, fosfatase, quinase, transferase terminal, metilase,etc. o principais tipos de vetores: plasmídeo, bacteriófago, cosmídeo, etc. o vetores de clonagem e expressão • CLONAGEM GÊNICA UTILIZANDO A REAÇÃO DE POLIMERIZAÇÃO EM CADEIA - PCR o desenho de oligonucleotídeos iniciadores (primers) o diagnóstico de restrição • CLONAGEM GÊNICA UTILIZANDO BIBLIOTECAS GENÔMICA E DE cDNA o construção de bibliotecas: genômica e cDNA o rastreamento de bibliotecas: sondas moleculares e anticorpos o subclonagem de DNA o sequenciamento de DNA • CLONAGEM GÊNICA POR EXPRESSÃO GÊNICA DIFERENCIAL o hibridização diferencial o hibridização subtrativa e técnicas de subtração o differential display o microarranjos de DNA: macroarray e microarray (DNA chip) • APLICAÇÕES DA CLONAGEM GÊNICA NA BIOTECNOLOGIA o indústria: produção de biofármos, enzimas de interesse comercial, etc. o agricultura: plantas transgénicas o veterinária: animais transgénicos o medicina: terapia gênica Ementa: • Conceitos Básicos • Clonagem Gênica: conceitos e ferramentas • Clonagem Gênica: estratégias de clonagem • Aplicações da Clonagem Gênica na biotecnologia Objetivos O objetivo principal do curso é apresentar as diversas alternativas para a Clonagem Gênica. O curso começa com uma breve revisão de bioquímica de ácidos nucléicos e fluxo da informação genética. A seguir, conceitos básicos e as ferramentas do processo de clonagem molecular serão abordados. No final desta breve introdução, os alunos serão considerados competentes para compreender as diversas técnicas de clonagem, abordadas nas próximas etapas do curso. No final, o curso abordará as aplicações da clonagem gênica na biotecnologia. Critérios de Avaliação A avaliação será feita através de uma prova escrita e seminários Bibliografia: 1. ALBERTS, B. et al. Molecular biology of the cell. 4.ed. New York: Garland Science, 2002. 1463 p. 2. LEWIN, B. Genes IX. 9th ed. Jones and Bartlett Publ., 2007. 912 p. 3. LODISH, H. et al. Molecular Cell Biology. 5th ed. New York: W. H. Freeman, 2003. 973 p. 4. ZAHA, A. (Coord.) Biologia molecular básica. 3.ed. Porto Alegre: Mercado Aberto, 2001. 331p. 5. WATSON, J.D. et al. Recombinant DNA. 2.ed. New York: Scientific American Books, 1992. 626p. 6. BROWN, T.A. Clonagem gênica e análise de DNA. 4.ed. São Paulo: ArtMed, 2003. 376p. 7. NELSON, D.L.; COX, M.M. Lehninger Principles of Biochemistry. 4th ed. New York: W. H. Freeman., 2004. 1100 p. 8. MEYERS, R.A. Molecular Biology and Biotechnology. New York: VCH Publ., 1995. 1072 p. 9. WATSON, J.D. et al. Molecular Biology of the Gene. 4th ed. California: The Benjamin/Cummings, 1987. 1163p. 10. BERG, J.M.; TYMOCZKO, J.L.; STRYER, L. Biochemistry. 6th ed. W.H. Freeman and Company, New York, 2006. 1120p.