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1 Dielison Rodrigues | P2 BIOMEDICINA | ASCES-UNITA SEGUNDA UNIDADE LETIVA ESTUDO DIRIGIDO DE VIROLOGIA O QUE SÃO MEIOS DE CULTURA? Para se estudar bactérias e leveduras precisamos previamente isolar para assim identificar, e para tanto, são utilizados diversos meios de cultura diferentes. O cultivo de microrganismo, em condições laboratoriais, se dá pela utilização de meios de cultura. Esses podem ser definidos como o conjunto de nutrientes necessários para haver multiplicação ou manutenção dos microrganismos. Existe uma grande variedade de procedimentos e preparações nutricionais utilizadas para induzir tal crescimento, de acordo com as exigências nutritivas e das condições físicas requeridas pelos diversos tipos de fungos e bactérias. Devido as grandes variações das necessidades nutritivas dos microrganismos, os meios de cultura são bastantes diferentes em sua composição. QUAIS SUAS COMPOSIÇÕES? Basicamente existem dois grandes grupos de meios de cultura: • SINTÉTICOS OU DEFINIDOS: Aqueles cuja composição química é qualitativa e quantitativamente conhecida; • COMPLEXOS OU INDEFINIDOS: Aqueles cuja composição química não consegue ser qualitativa e quantitativamente conhecida, pode ser preparado de maneira orgânica ou se adicionando alguma substância em um meio sintético que não saberá como ocorrera a modificação das substâncias ali presentes; Essas são as grandes duas classes de meios de cultura que podemos agrupar. QUAIS OS POSSÍVEIS ESTADOS FÍSICOS DOS MEIOS DE CULTURA E SUAS FINALIDADES? Existe uma imensa variedade de propriedades entre os possíveis meios que podemos usar e com isso várias composições são feitas e se apresentam em diferentes estados físicos: • LÍQUIDOS: São soluções aquosas de nutrientes, geralmente proporcionam as bactérias terem maior facilidade de iniciar seu crescimento nesse tipo de meio, principalmente quando o seu número de início é pequeno, são desprovidos de ágar; • SEMI-SÓLIDOS: Possuem sua forma física intermediaria e permite que sejam observadas características bacterianas como motilidade e produção de substâncias derivadas de seu metabolismo, onde apresentam em sua composição até 1% de ágar; • SÓLIDOS: São usados para identificação e obtenção de culturas pura dos microrganismos a serem estudos, onde cada bactéria durante o semeio é separada da sua vizinha e possa formar colônias de organismos iguais a elas, a partir de seu crescimento, possuem entorno de 1,5 a 2,5 de ágar em sua composição; 2 Dielison Rodrigues | P2 BIOMEDICINA | ASCES-UNITA DIFERENCIE MEIOS SELETIVOS E DIFERENCIAIS. Meios seletivos são aqueles cuja características impedem o crescimento de certos microrganismos, permitindo apenas o crescimento de outros. Muitas vezes, a seletividade do meio depende da adição de algum composto inibidor dos indesejáveis. Assim, por exemplo, corantes básicos inibem o crescimento de bactérias Gram-positivas, enquanto a azida sódica inibe as Gram-negativas. Meios diferenciais são aqueles que conferem características especiais às colônias que, em condições normais, seriam idênticas. Assim, bactérias fermentadoras de lactose, semeadas em meio contendo lactose e um indicador, dão colônias de cor diferente das não-fermentadoras, pois, crescendo, fermentam a lactose, originando ácido lático, que faz “virar” o indicador. COMO PODEMOS CLASSIFICAR OS MEIOS DE CULTURA? TIPO OBJETIVO EXEMPLO Enriquecimento É suplementado com nutrientes específicos para o microrganismo que se deseja pesquisar. Além disso, pode apresentar agentes inibidores de determinados microrganismos, mas não permite o seu isolamento, pois é um meio líquido. Caldo Brain Heart Infusion (BHI) Caldo Tetrationato Agar Chocolate Transporte Consiste em um meio isento de nutriente, contendo um agente redutor (Tioglicolato ou cisteína). Geralmente mantém o pH favorável, previne a desidratação de secreções durante o transporte e evita a oxidação e autodestruição enzimática dos patógenos presentes. Meio de Stuart Meio de Cary-Blair Caldo Tioglicolato Seletivo Possui agente inibidores de determinado microrganismo, permite assim a identificação e isolamento, pois é um meio sólido (permite a visualização de UFCs). Agar Manitol Salgado Agar SS Diferencial Permite a diferenciação de uma espécie e outra pelo aspecto macroscópico de seu crescimento, como cor, textura, halo de hemólise, etc. Agar Eosin Methilene Blue (EMB) Agar McConkey Agar Hektoen Indicador É utilizado no estudo das propriedades bioquímicas das bactérias, auxiliando, assim sua identificação. O mais simples é aquele usado no estudo das reações de fermentação. Agar Triple Sugar Iron (TSI) Agar Citrato de Simmons COMO FUNCIONA O CULTIVO LABORATORIAL NOS MEIOS DE CULTURA? 3 Dielison Rodrigues | P2 BIOMEDICINA | ASCES-UNITA COMO QUE DEVE SER REALIZADA A COLORAÇÃO DE GRAM? 4 Dielison Rodrigues | P2 BIOMEDICINA | ASCES-UNITA REFERÊNCIAS: TRABULSI. Luiz Rachid.; ARTERTHUM. Flavio. Microbiologia. 6 ed. São Paulo, 2015. CARVALO, Irineide Teixeira de. Microbiologia básica. 1 ed. Recife, 2010. MADIGAN. MARTINKO. BENDER. BUCKLEY. STAHL. Microbiologia de Brock. 14 ed. Porto Alegre, 2016. VIEIRA, Darlene Ana de Paula. FERNANDES, Nayara Cláudia de Assunção Queiroz. Microbiologia Aplicada. 1 ed. Santa Maria, 2012.
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