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Diagnóstico laboratorial: Toxoplasma gondii Profº Esp. Matheus Pires do Nascimento Biomédico Analista Clínico (UNIFAMAZ) Especialista em Microbiologia e Imunologia (ESAMAZ) Introdução ● Toxoplasmose: ○ Doença causada por T. gondii ● Transmissão: ○ Consumo de carne mal cozida de animais com cistos teciduais ○ Consumo de alimentos ou água contaminados com oocistos presentes nas fezes de gato ○ Amostras ambientais contaminadas com fezes: ■ Solo e caixa de areia ○ Transplacentária da mãe para o feto ○ Transfusão de sangue ou transplante de órgãos Morfologia parasitária ● Oocisto: ○ Presente nas fezes do felino Morfologia parasitária ● Taquizoíto: ○ Presentes nas secreções e líquidos biológicos (ex: amniótico) Morfologia parasitária ● Bradizoíto: ○ Presente nos tecidos Ciclo biológico Ciclo biológico Patogênese ● Estabelecimento do T. gondii: ○ Ingestão de Oocistos maduros ou cistos de bradizoítos ○ Desencistamento e transformação em taquizoítos ○ Taquizoítos invadem a mucosa intestinal ○ Disseminação para órgãos e tecidos do corpo, como: ■ Músculos esqueléticos, cérebro, linfonodos ○ Intracelular se transformam em bradizoítos em cistos teciduais ○ Diminuição da imunidade: reativação da doença ○ Rompimento do cisto e liberação de formas extracelulares (taquizoítos). Diagnóstico clínico Toxoplasmose: ● Assintomática: geralmente em imunocompetentes ● Aguda: ○ Fadiga ○ Linfadenite ○ Calafrio ○ Febre ○ Cefaleia ○ Mialgia ● Crônica: (Além dos sintomas mencionados) ○ Exantema maculopapular ○ Encefalomielite, miocardite e/ou hepatite. ○ Coriorretinite com subsequente deficiência visual Diagnóstico clínico Toxoplasmose congênita: ● Frequentemente assintomáticas ● Hidrocefalia ● Microcefalia ● Calcificação intracerebral ● Coriorretinite ● Cegueira ● Surdez ● Convulsões e distúrbios psicomotores ● Raramente retardo mental ● 5 a 15% das crianças infectadas: óbito Diagnóstico clínico Toxoplasmose congênita: ● Risco de transmissão aumenta com o tempo de gravidez: ○ Primeiro trimestre – 25%; ○ Segundo trimestre – 40%; ○ Terceiro trimestre – 65%. ● Gravidade da doença no feto: inversamente proporcional ao tempo de gestação: ○ 1º trimestre da gestação: complicações graves, óbito fetal ou neonatal; ○ 2º trimestre da gestação: manifestações clínicas ou ○ subclínicas; ○ 3º trimestre da gestação: manifestações fetais variam de subclínicas a assintomáticas. Toxoplasmose congênita Coriorretinite Calcificação intracraniana Hidrocefalia Microcefalia Diagnóstico clínico Pacientes Imunocomprometidos: ● Transplante de órgãos; ● Doença neoplásica, como o linfoma de Hodgkin; ● Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS): ○ Toxoplasmose Cerebral (encefalite toxoplásmica) ○ Cefaleia ○ Febre ○ Alteração do estado mental (incluindo confusão) ○ Letargia ○ Déficits neurológicos focais subsequentes ○ Lesão cerebral e convulsões Diagnóstico laboratorial ● Microscópico: ○ Pesquisa direta de T. gondii ○ Histopatológico ● Sorológico (IgM e IgG): ○ Ensaio imunoenzimático (ELISA) ○ Imunofluorescência indireta ○ Quimioluminescência ○ Hemaglutinação indireta ○ Aglutinação em látex ○ OBS: IgM/IgA: Recém-nascido ● Molecular: ○ Reação em Cadeia da Polimerase (PCR): Líquido amniótico (infecção fetal) Pesquisa direta de T. gondii ● Amostras: sangue, líquor, medula óssea, saliva, secreções, etc. ● Identificação de taquizoítos de T. gondii: ○ Núcleo geralmente centralizado; ○ Forma de meia lua. Histopatológico ● Amostras: biópsia de músculo, linfonodo, fígado, baço; ● Identificação de cistos teciduais contendo bradizoítos. Diagnóstico sorológico ● Interpretação: IgM IgG Significado clínico Conduta - - Sem evidência de contato ou infecção por T. gondii (suscetibilidade) Realizar ações preventivas + - Possível infecção aguda ou resultado de IgM falso-positivo. Repetir a sorologia em três semanas, se o IgG positivar, a infecção na gestante será confirmada. - + Contato com T. gondii por seis meses ou mais (infecção crônica ou Imunidade) - + + Infecção recente, IgM persistente, reativação da doença ou reação IgM falso-positiva. Solicitar Teste de Avidez de IgG para T. gondii Teste de avidez de IgG Realizar avidez de IgG na mesma amostra: ● Avidez fraca/baixa: Infecção adquirida em menos de 4 meses; ● Avidez forte/alta: Infecção adquirida em mais de 4 meses. Questões norteadoras 1. Qual(is) a(s) forma(s) evolutivas de T. gondii? 2. Qual é a principal via de transmissão da toxoplasmose? 3. Quais os sintomas da toxoplasmose comum e gestacional? 4. Quais as amostras biológicas podem ser coletadas para o diagnóstico da toxoplasmose comum e gestacional? 5. Quais os principais métodos laboratoriais empregados no diagnóstico da toxoplasmose?
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