Métodos Alternativos de Avaliação Toxicológica

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Universidade Federal de Pernambuco
Centro de Ciências da Saúde
Departamento de Ciências Farmacêuticas
Toxicologia Geral
Estudo Dirigido
Métodos Alternativos de Avaliação Toxicológica
 
Coordenador: J
Discentes: Laerte José de Souza Silva, Henrique Souza Araujo e Silva, Hugo Vitor Queiroz Gomes e Mariana Candeias dos Santos
Março/2023
Recife-PE
O principal objetivo da toxicologia é estudar os efeitos danosos à saúde de algum produto ou até mesmo do meio inserido, principalmente destinado a humanos, animais e plantas. Sendo assim, os métodos utilizados para esses estudos por muito tempo foi a avaliação toxicológica em animais, utilizando do prefácio que são organismos que se assemelham de maneira mais próxima aos seres humanos sob vigilância da taxonomia.
Os principais animais utilizados são camundongos, cães, macacos, seja o organismo como um todo ou parte dele, o que leva um sério dano e risco a vida desses animais. Portanto, os critérios atuais, para um melhor funcionamento dos estudos toxicológicos, são a diminuição e substituição do uso de animais nas avaliações toxicológicas. Esta ação, quando consumada, consegue beneficiar tanto o animal quanto a sociedade como um todo, visto que, os resultados obtidos dos estudos são fielmente preservados. A Resolução Normativa 17 de 2014 traz embasamento legal para estas ações de redução, refinamento e/ou substituição.
A avaliação toxicológica por muito tempo foi realizado em animais, porém devido a política dos 3R’s (Reduzir, Reutilizar e Reciclar) e o incentivo ao desuso de animais em estudos toxicológicos, houve a necessidade de implementação de novas práticas eficazes, seguras e equivalentes para esses testes de toxicidade. Sendo assim, instaurou-se os métodos alternativos para avaliação toxicológica que tem como objetivo principal a redução, substituição ou refinamento do uso de animais em atividades de pesquisa, como definido na Resolução Normativa 17 de 2014.
Uma das alternativas é a utilização de ensaios de toxicidade in vitro, a cultura de células vem sendo amplamente utilizada para esse fim. O ensaio colorimétrico do MTT é um exemplo de teste de citotoxicidade, Esse teste é um dos mais utilizados para a avaliação da citotoxicidade de novos candidatos à fármacos antitumorais, tal experimento se baseia no princípio de que o MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil tetrazólio) é um sal de cor amarela que consegue permear a membrana da célula e ser reduzido a cristais de formazan, pelas desidrogenases mitocondriais que clivam o anel tetrazólico, sendo um sal insolúvel de coloração púrpura. 
Desse modo, as células de determinada linhagem específica podem ser semeadas em placas e expostas a algum fármaco, extrato vegetal, substância por um período de 24, 48 ou 72 horas e depois do tempo de exposição às concentrações, é adicionado o MTT e as células que permaneceram viáveis irão transformar em cristais púrpura insolúveis, que após ser solubilizado com DMSO será lido no espectrofotômetro no comprimento de onda 570nm. Assim, a alta intensidade da cor púrpura indica maior viabilidade celular, enquanto a diminuição da intensidade da cor púrpura significa o número reduzido de células viáveis e, portanto, a citotoxicidade da amostra teste.
Referências:
· Métodos Alternativos em Toxicologia. Disponível em: <https://www.aenda.org.br/artigo/metodos-alternativos-emtoxicologia/>. Acesso em: 2 mar. 2023.
· Cultivo de células: da teoria à bancada / Juan Carlos Ramos Gonçalves, Marianna Vieira Sobral (organizadores). - João Pessoa : Editora UFPB, 2020.