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Prezados alunos, Este estudo orientado se refere ao conteúdo trabalhado em sala de aula e também ao conteúdo dos artigos disponibilizados na pasta “Materiais complementares”. Para a sua resolução é imprescindível a leitura dos artigos. NOME DO ALUNO: JOICE MARA LUCIA DOS SANTOS 1) Após a leitura da primeira parte da apostila de práticas e dos artigos “Conheça as 3 fases dos exames laboratoriais” e “A fase pré analítica na gestão da qualidade”, responda: 2) a) Quais são as três fases dos exames laboratoriais e quais procedimentos são realizados em cada uma delas? As três fases são: pré- analítica; Analítica; Pós- analítica. Pré- analítica: Compreender tudo que procede o ensaio labolatorial: · Orientação ou preparo do paciente · Identificação do paciente, e dos materiais · Coleta ou preparo · Transporte e conservação de material Analítica: Começa com a validação do sistema analítico e termina quando a determinação analítica gera um resultado: · Qualificação e treinamento de Mao de obra · Metodologia · Equipamento e reagentes Pós- analítica: Abrange os procedimentos executados após as realizações de exame: · Cálculos · Transcrição de resultados · Digitação e expedição ou endereçamento de laudos. b) Diante da complexidade das análises laboratoriais, Quais medidas podem reduzir os erros laboratoriais? Cite ao menos 3 medidas. · Orientação corretas ao paciente, e sistema automatizado sempre que possível. · Profissionais que tenham conhecimentos de todas as normas e tenham treinamentos. · Identificação correta do paciente e rotulagem correta das amostras e Escritas legíveis e claras. · Os laboratórios devem ter controle dos processos com implementação de indicadores da qualidade e rastreabilidade de todo o ciclo. c) Para você realizar a dosagem do colesterol total, HDL, LDL e triglicérides, qual seria o tubo de coleta utilizado, e como deverá ocorrer o preparo da amostra? Tubo para Soro com gel separador, tampa vermelha/amarela. Soro obtido livre de hemólise, plasma colhido com heparina ou EDTA. Após coleta, a amostra devera ser centrifugada em até 3 Horas. Colesterol total Soro obtido livre de hemólise ou plasma colhido com Heparina. O Colesterol é estável no plasma ou no soro por 7 dias entre 2 e 8ºC e 3 meses a -20ºC. O Colesterol HDL é estável no soro por até 7 dias entre 2 e 8ºC 6 e por 30 dias a -20ºC. Amostras armazenadas em temperatura entre 15 e 30°C tem estabilidades de no máximo 14 horas. Triglicérides Soro obtido livre de hemólise (para evitar resultados falsamente elevados) ou plasma colhido com EDTA ou Heparina. O analito é estável durante 3 dias entre 2 e 8ºC e 30 dias a -20ºC. O sangue pode ser colhido sem jejum ou após um jejum de 12 a 14 horas. As amostras lipêmicas devem ser previamente diluídas com Cloreto de Sódio a 0,85%, na proporção 1:2. d) Para você realizar a dosagem da glicose, qual seria o tubo de coleta utilizado, e como deverá ocorrer o preparo da amostra? Tubo cinza - Fluoreto de sódio/edta. Plasma (fluoretado), soro, líquido cefalorraquidiano, líquido (ascítico, pleural e sinovial). O uso do anticoagulante Fluoreto Bioclin é recomendado por ser inibidor da glicólise. Usar 1 gota para cada 3 mL de sangue. O soro só poderá ser usado se for centrifugado, separado das células e dosado imediatamente após a coleta. Em outros líquidos biológicos adicionar um inibidor da glicólise na mesma proporção descrita para o sangue, centrifugando a amostra antes de iniciar a dosagem. Plasma ou Soro: estável por 7 dias entre 2 e 8°C 5 . Líquido Cefalorraquidiano: estável por 3 dias entre 2 e 8°C e 1 mês a -20°C 5 . e) Qual a diferença entre soro e plasma? Plasma: é a parte liquida do sangue, com presença de anticoagulante, obtida após centrifugação. Soro: é a parte liquida de um sangue, sem anticoagulante, obtido após a centrifugação do sangue coletado. . f) O que é o sangue total e em quais análises ele é utilizado? Sangue total é o sangue obtido de uma amostra coletada, sem a centrifugação; É utilizado para análises laboratoriais de distúrbios metabólicos e fisiológicos; Realizar diagnósticos de patologia e a obtenção de inúmeras outras informações remetentes ao estado de saúde de um paciente. g) O que é o buffy coat e como separa-lo? É a camada leucocitária. Fração de uma amostra de sangue anticoagulada que contem a maioria dos leucócitos e plaquetas, após a centrifugação. Para separa-lo deve ser centrifugada sem anticoagulante. 3) Após a leitura do artigo “Qual a importância da ordem correta dos tubos na coleta de exames laboratoriais”, responda: a) Por que deve haver uma ordem correta de tubos no momento da coleta de sangue? Devido as possíveis contaminações cruzadas dos materiais do interior de um tubo para os seguintes, é imprescindível que a ordem de coleta dos tubos seja observada, respeitada. b) Qual a ordem correta de tubos na coleta nos diferentes cenários possíveis? Frasco para hemocultura ou tubo sem aditivo /descarte* Tubo para coagulação, com citrato de sódio, 3,2% tampa azul clara ** Tubo para VHS, com citrato de sódio 3,2% tampa preta. Tubo para soro, com ou sem gel separador tampa vermelho-amarela. Tubo de heparina com ou sem gel separador tampa verde Tubo para hematologia com edta tampa roxa Tubo para glicemia e lactato, com fluoreto tampa cinza. 4) Após leitura do artigo “Análise dos valores de referência do líquido cefalorraquidiano” e de acordo com nossas aulas sobre proteínas, responda: a) Qual a principal proteína utilizada como marcador inflamatório? A proteína C reativa, produzida no fígado, é o principal marcador de fase aguda de processos inflamatórios. b) Qual a diferença entre as dosagens e significados clínico de PCR e PCR Ultrassensível? PCR- NOS DIZ QUE EXISTEM UMA INFLAMACAO, MAS NÃO DIZ QUEM É O AGENTE CAUSADOR. PCR ULTRASENSIVEL FAZ UMA DOSAGEM MAIS PRECISA DE PROTEINA CREATIVA. O líquido cefalorraquidiano (LCR) é um líquido incolor que circula o cérebro e a medula espinhal através do espaço subaracnoideo, ventrículos cerebrais e o canal central da medula. O exame do LCR fornece informações importantes em relação ao diagnóstico etiológico e acompanhamento de processos inflamatórios, infecciosos ou neoplásicos dos órgãos que são envolvidos por esse líquido. Esse exame compreende a análise dos aspectos físicos, bioquímicos e citológicos do LCR. c) É possível dosar proteínas no LCR? Quais são as principais proteínas presentes? Sim, A análise da quantidade total de proteínas no LCR é utilizada principalmente para detectar doenças do Sistema Nervoso Central (SNC),. As proteínas do LCR são constituídas em grande parte de albumina e em muito menor quantidade de globulinas . d) Quais doenças neurológicas apresentam níveis aumentados de proteínas no líquor? O AUMENTO DE PROTEINAS NO LCR É OBSERVADO EM INFEC OES COMO ESCLORESE MULTIPLA, O aumento de proteínas no LCR é observado em infecções, hemorragias intracranianas, esclerose múltipla, Guillain-Barré, malignidades. e) Em que outras condições clínicas observamos hiperproteinemia e hipoproteinemia? A hipoproteinemia ocorre devido a uma grave limitação de ingestão de proteína em uma dieta nutricional regular. 5) Após a leitura dos artigos “A influência dos marcadores de lesão cardíaca no diagnóstico do infarto agudo do miocárdio” e “Correlações entre lipoproteínas e apolipoproteínas na doença arterial coronariana”, responda: O IAM é cecorrente de um rompimento súbito do fluxo sanguíneo nas vias coronárias, que pode ser ocasionada por diversos fatores, ocorre por uma isquemia nas células do músculo cardíaco, o que ocasiona a necrose irreversível. A causa mais comum dos casos de infartos do miocárdio, resulta da doença aterosclerótica coronariana, entretanto há outros fatores como: doença arterial coronária não-aterogênica, anormalidades congênitas, trombocitose. Outros meios de riscos ambientais ou orgânicos, como: tabagismo, obesidade, hipertensão arterial, dislipidemias, diabetes mellitus, também podem induzir ao IAM devido ao acúmulode gordura e formação de placas na parede dos vasos. A relação entre hipercolesterolemia e aterosclerose está bem definida na literatura e as dosagens de colesterol, triglicérides e lipoproteínas têm sido utilizadas como ferramentas para identificar indivíduos que apresentam elevado risco de desenvolver futuros eventos coronarianos. a) Qual é a composição da seguinte molécula: Quilomícron: Sua composição consiste cerca de 85 a 95% de triglicerídeos de origem da dieta (exógeno), pequena quantidade de colesterol livre e fosfolipídios e uma pequena fração proteica 1 a 2% de proteínas. LDL: Aproximadamente 25% desta lipoproteína são compostas por proteínas, em particular a Apo B-100 e pequena quantidade de Apo C, o resto é composto por fosfolipídeos e triglicerídeos. VLDL: composição é de cerca de 50% a 65% de triglicerídeos e de 15% a 25% de colesterol. HDL: As lipoproteínas HDL são partículas pequenas, compostas de 50% por proteínas (especialmente a Apo A I e II, e uma pequena parcela de Apo C e Apo E), 20% de colesterol, 30% de triglicerídeos e vestígios de fosfolipídeos Triglicérides: Os triglicerídeos, ou gorduras, são formados a partir da combinação de glicerol e três moléculas de ácidos graxos. b) Qual é o perfil lipídico (caracterização dos níveis dos lipídeos) está relacionado a eventos coronarianos? A relação entre hipercolesterolemia e aterosclerose está bem definida na literatura e as dosagens de colesterol, triglicérides e lipoproteínas têm sido utilizadas como ferramentas para identificar indivíduos que apresentam elevado risco de desenvolver futuros eventos coronarianos. Colesterol total , Colesterol HDL , Colesterol LDL E Triglicerídeos. c) Por que os níveis das apolipoproteínas têm sido descritas como melhores preditores de doenças ateroscleróticas? Pelo fato de que as dosagens das apolipoproteínas apresentam algumas vantagens metodológicas quando comparadas à quantificação de lípides e lipoproteínas no plasma. 6) Sobre os marcadores cardíacos, responda: a) Quem são os marcadores cardíacos e onde são produzidos? Eles são a sentença dos filamentos cardíacos, que podem ser detectados pelas enzimas: Creatina Fosfoquinase (CK), Lactato Desidrogenase e Aspartato aminotransferase (LDH) e (AST), e as proteínas: Mioglobina e Troponinas. As enzimas e proteínas empregadas como marcadores na investigação do IAM são: creatinoquinase fração MB (CK-MB), Troponina T (cTnT) e Troponina I (cTnI), a mioglobina e o lactato desidrogenase (LDH) Os marcadores mais frequentemente são as troponinas, a CK-MB e a mioglobina. Atualmente na prática clínica, são inclusos outros marcadores de ativação neurohumoral: peptídeo natriurético cerebral (BNP), fração terminal N do proBNP (NTproBNP) e de inflamação: Proteína C reativa (PCR). b) A partir da leitura do artigo e da análise do gráfico a seguir, qual é o marcador cardíaco mais precoce? Ele tem sensibilidade e especificidade que permita definir o diagnóstico de IAM? Mioglobina É o biomarcador mais precoce de necrose miocárdica e antecedendo a liberação da CK-MB em torno de 2 a 5 horas. Por ser uma molécula pequena, é liberta rapidamente na circulação sanguínea, entre 1 hora após a morte do tecido miocárdico, os valores de pico atingem em 5 a 12 horas. Porém não apresenta tem sensibilidade e especificidade, pois a mioglobina também é encontrada no músculo esquelético, o que diminui a sua especificidade, ela pode ser liberada em condições de injúria da musculatura esquelética, distrofia muscular, uremia grave, entre outras (NICOLAU et al., 2014). c) Se você pudesse eleger dois marcadores para o IAM, quais vocês elegeriam e por quê? Mioglobina, por ser um biomarcador mais precoce, e clinicamente sensíveis, são essenciais para se obter uma intervenção terapêutica precoce. E as Troponinas I, por possuírem alto valor avaliativo e apresentarem alta especificidade e maior sensibilidade ao tecido miocárdico. 7) Quais são as principais causas de erros ou interferentes nas dosagens enzimáticas? Erros na coleta da amostra: Uso de Anticoagulantes, Hemólise, Estase Venosa, Coagulação, Lipemia. Erros na conservação da amostra: As dosagens enzimáticas devem ser realizadas o mais breve possível para evitar perdas da atividade. Quando for necessária uma conservação, ela deve ser feita por um período de tempo curto, e geralmente, a 4C. Erros nas determinações da atividade enzimática: Tempo de reação estipulado pela metodologia; pH ótimo dareação; Temperatura da reação; Concentração do substrato; Concentração da enzima; Estabilidade dos reagentes; Pipetagem; Limpeza da vidraria; 8) Quais são os principais marcadores utilizados para avaliação do metabolismo dos carboidratos? 9) O que é o teste de tolerância oral a glicose? Como ele é realizado e qual o seu significado? O teste de tolerância oral a glicose ou curva glicêmica, ele pode ser solicitado pelo médico tanto para o diagnóstico da doença, como para detectar pré-diabetes, e resistência à insulina. Consiste na análise da concentração de glicose no sangue, em jejum de oito horas e após a ingestão de 75 gramas de um líquido açucarado, (glicose), podendo ter de duas a cinco dosagens, de acordo com o pedido do médico. 10) Quais resultados de insulina, glucagon, glicemia, Hemoglobina glicada e frutosamina são esperados em um paciente com Diabetes mellitus não compensado? Glicemia em jejum ≥ 126mg/dL, em dois exames alterados, ou • Teste oral de tolerância à glicose ≥ 200mg/dL, em dois exames alterados, ou • Hemoglobina glicada ≥ 6,5%, em dois exames alterados, ou • Glicemia ao acaso ≥ 200mg/dL associada ao quadro clínico clássico. 11) Qual o significado clínico dos níveis de Hemoglobina glicada e frutosamina? Qual a diferença entre eles? hemoglobina glicada (HbA1c) for maior ou igual a 6,5%, há suspeita de diabetes. hemoglobina glicada (HbA1c) menor ou igual a 5,6%, os exames estão normais. os valores normais de referência de frutosamina devem estar entre 205 a 285 micromoléculas por litro de sangue. O teste de frutosamina mede o nível médio de glicose no sangue ao longo das últimas duas ou três semanas, enquanto que o teste de A1C mostra como estes têm estado nos últimos dois a três meses. 12) O que é índice HOMA e como é calculado? Um cálculo simples fundamentado na dosagem de insulina e glicose, ambas em jejum. HOMA IR que avalia a resistência insulínica – HOMA BETA que avalia a capacidade de secreção de insulina pelas células betas pancreáticas HOMA BETA: (20 x insulina jejum (MICRO UI/mL)) / (glicose jejum (mmol/L*) - 3,5) . HOMA IR: insulina jejum (MICRO UI/mL) x glicose jejum (mmol/L*) / 22,5 * Para conversão da glicose de mg/dL para mmol/L, multiplica-se o valor em mg/dL por 0,0555. 13) Após a leitura dos artigos “Fórmulas de Martin, Friedewald e Cordova comparadas” e “Determinação do LDL”, responda: a) Qual o resultado de LDL, calculando pela fórmula de Friedewald, se os valores de colesterol total, HDL e triglicérides são os seguintes? Paciente 1: Colesterol total: 295 mg/dL HDL: 34 mg/dL Triglicérides: 482 mg/dL Colesterol LDL (cálculo)= Colesterol Total - Colesterol HDL - Triglicérides / 5 295 mg/dL - 34 mg/dL - 482 mg/dL / 5 291 – 96,4 = 194,6 mg/dL - Determinações envolvidas para a estimativa do colesterol LDL através da fórmula de Friedewald. Paciente 2: Colesterol total: 185 mg/dL HDL: 58 mg/dL Triglicérides: 120 mg/dL Colesterol total: 185 mg/dL HDL: 58 mg/dL Triglicérides: 120 mg/dL Colesterol LDL (cálculo)= Colesterol Total - Colesterol HDL - Triglicérides / 5 185 mg/dL - 58 mg/dL - 120 mg/dL / 5 127 – 24 = 103 mg/dL - Determinações envolvidas para a estimativa do colesterol LDL através da fórmula de Friedewald. b) Qual a limitação na realização deste cálculo? A limitações em sua utilização, por não cumprir o atual requerimento nas determinações de LDL em não exceder o erro total de 12 %, o baixo custo e a simplicidade do cálculo popularizaram o uso clínico dessa fórmula. 14) Sobre a dosagem da glicose, responda, baseando-sena bula do kit de glicose disponibilizado dentro da pasta de aulas práticas: a. Qual a amostra ideal para a realização da dosagem? Plasma (fluoretado) b. Qual o valor de referência e o tempo de jejum recomendado para a dosagem da glicose em jejum? Os valores de referência em mg/dL, para o presente método, Plasma: Prematuro 20 - 60 mg/dL 0 a 1 dia 40 - 60 mg/dL > 1 dia 50 - 80 mg/dL Crianças e adultos 65 - 99 mg/dL O tempo de jejum recomendado é de 8 a 12 horas. c. Caso sejam observadas as seguintes absorbâncias, realize o cálculo para se obter o resultado da quantidade de glicose do paciente em questão utilizando dois diferentes tipos de cálculos possíveis Padrão: 0.345 Amostra: 0.650 Glicose (mg/dL) = Absorbância da Amostra x 100 Absorbância do Padrão 0.650 / 0.350 x 100 = 186 mg/dL
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