Avaliação I - Individual BIOLOGIA MOLECULAR.

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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:823741)
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Prova 67095938
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
A clonagem de DNA se refere à produção, dentro de uma célula, de diversas cópias de uma 
sequência específica de um fragmento de DNA. Sobre o exposto, avalie as asserções a seguir e a 
relação proposta entre elas:
I- A clonagem de DNA depende da utilização de um vetor, do fragmento de DNA e, posteriormente, 
de um organismo hospedeiro.
PORQUE
II- O fragmento de DNA de interesse, será inserido em uma molécula de DNA genômico com 
capacidade de autorreplicação (DNA do vetor), originando o DNA recombinante. Essa inserção se dá 
através de enzimas de restrição e enzimas de ligação. 
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
D As asserções I e II são proposições falsas.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Conforme o sumário da prática, os 
ácidos nucleicos apresentam características estruturais específicas, que permitem que sejam isolados 
e manipulados para diversos tipos de aplicações. A técnica de hibridização in situ, por exemplo, 
baseia-se na complementaridade das fitas de DNA ou RNA, utilizando sondas fluorescentes para a 
detecção da fita complementar em uma determinada amostra. Essa técnica permite o estudo da 
expressão gênica. Outra técnica, que também tem o mesmo princípio e finalidade, é a reação em 
cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR), muito utilizada no diagnóstico de algumas 
infecções e doenças. Considerando esses aspectos, o primeiro passo para a maioria das técnicas 
citadas é o isolamento e a purificação das moléculas de DNA e RNA. O processo de extração do 
DNA pode ser dividido em etapas. 
Com relação às etapas visualizadas na aula prática, assinale a alternativa CORRETA:
A A primeira etapa é a Etapa de Ligação, em que adicionamos 250 µl de Proteinase K, 20 µl da
amostra e 20 µl do tampão de lise S.
B Na Etapa de Lavagem, são adicionados 210 µl de álcool 96%.
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C A segunda etapa é denominada como Etapa de Ligação, em que é adicionado álcool 96% no
eppendorf, homogeneizado, e 640 µl são transferidos para o tubo spin. 
D O principal composto adicionado na Etapa de Ligação é a Proteinase K.
O PCR produz uma série de cópias de um determinado fragmento de DNA ou cDNA de uma 
maneira bastante rápida e eficiente. No entanto, de acordo com o seu objetivo de pesquisa, a PCR 
qualitativa ou quantitativa se torna mais eficaz para fornecer os resultados esperados. De acordo com 
essas duas técnicas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) A PCR qualitativa indica a presença de um fragmento específico de DNA ou cDNA em uma 
amostra, mas não indica quanto do gene está expresso na amostra. 
( ) A qPCR é conhecida como PCR em tempo real (quantitativa) e fornece informações precisas 
relativas à quantidade de expressão de um gene. 
( ) A PCR qualitativa necessita de um termociclador específico capaz de quantificar a amplificação 
dos fragmentos de DNA ao final de cada ciclo em tempo real. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - V - F.
B F - F - V.
C F - V - F.
D V - F - F.
O mais recente avanço no campo de sequenciamento de DNA foi o desenvolvimento de 
plataformas portáteis capazes de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos. 
Um exemplo dessas plataformas é a MinION. Sobre a plataforma MinION, avalie as asserções a 
seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para que seja realizado o sequenciamento por meio da plataforma MinION, as amostras a serem 
sequenciadas são ligadas a enzimas de processamento. Essas enzimas induzem o fragmento de DNA 
a passar pelo nano poro, onde as variações da corrente elétrica são detectadas.
PORQUE
II- Sendo conhecidas as variações características de cada nucleotídeo, a sequência de nucleotídeos é 
formada rapidamente.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições falsas.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
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D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as 
sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificar a 
molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA:
A
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas sólidas, nas
quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, formando uma
biblioteca de DNA.
B
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA de forma
portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos,
semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada.
C
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em fragmentos
de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada novo nucleotídeo
adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção ocorre em tempo real.
D
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o DNA a ser
sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a uma placa de vidro
por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, que será submetida ao PCR.
A técnica de eletroforese consiste na separação de moléculas de DNA, RNA ou proteínas em gel 
de agarose ou poliacrilamida. Essa separação se dá de acordo com o tamanho da molécula. Com base 
no processo de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:
I- Uma corrente elétrica é transmitida através do gel do polo negativo ao polo positivo. 
II- As moléculas de DNA são carregadas negativamente e são carregas por afinidade para o polo 
positivo. 
III- Moléculas menores tendem a migrar com maior dificuldade no gel. Já as moléculas maiores, 
tendem a migrar mais facilmente.
 
Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a sentença III está correta.
B As sentenças I e III estão corretas.
C As sentenças I e II estão corretas.
D Somente a sentença II está correta.
Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da técnica. Em 
torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se obter milhares de cópias de 
DNA. Sobre os ciclos do PCR associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
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( ) Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar.
( ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de cada uma das 
fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º C.
( ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, denominada 
como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - III - II.
B III - II - I.
C II - I - III.
D I - II - III.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as 
amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e 
armazenadas em tubos, ambos “livres” de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse 
– nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou - 80 ºC). Todosos procedimentos 
devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de 
nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA 
identificado na prática, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Etapa de Lise.
II- Etapa de Ligação.
III- Etapa de Lavagem.
IV- Etapa de Eluição.
( ) Pipete 25 µl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 µl da amostra de 
sangue no mesmo tubo e, por último, pipete 200 µl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e 
homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min.
( ) Pipete 210 µl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, 
pipete 640 µl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto. 
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 µl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue 
novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem utilizará 600 µl do 
tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo 
de coleta e centrifugue novamente.
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 µl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e 
centrifugue a amostra.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - II - III - IV.
B IV - III - II - I.
C II - III - IV - I.
D I - II - IV - III.
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"A clonagem de genes possui variadas aplicações na área de pesquisa, por meio do conhecimento da 
organização de genomas, da sequência de genes e suas proteínas codificadas, da criação de 
bibliotecas de DNA e cDNA, além de produtos que beneficiam a sociedade, como a produção de 
enzimas industriais, produção de insulina humana, vacinas, hormônios de crescimento e 
melhoramento genético". Sobre as principais diferenças entre essas técnicas, destacando os objetivos 
de cada uma delas, analise as sentenças a seguir:
I- As Bibliotecas de DNA ou cDNA são grandes coleções de material genético mantidas em colônias 
de bactérias, nas quais um fragmento específico de DNA ou um gene podem ser procurados.
II- Uma biblioteca de DNA é formada por fragmentos originados a partir de um DNA genômico. Já 
uma biblioteca de cDNA é formada por sequências codificantes dos genes que estavam expressos na 
forma de mRNA em uma determinada amostra.
III- A formação das bibliotecas de DNA e cDNA permite que fragmentos clonados sejam mantidos e 
replicados por tempo indeterminado.
Assinale a alternativa CORRETA:
Fonte: CALEFFE, R. T. T.; OLIVEIRA, S. R.; FREITAS, A. C. O.; KIDO, K. K.; GARCIA, A.; 
PAMPHILE, J. A. Clonagem de genes: métodos e aplicações. Revista UNINGÁ, v. 47, p. 73-77, 
jan./mar. 2016. Disponível em: http://revista.uninga.br/index.php/uninga/article/view/1252/874. 
Acesso em: 5 fev. 2021.
A Somente a sentença II está correta.
B Somente a sentença I está correta.
C As sentenças I, II e III estão corretas.
D Somente a sentença III está correta.
Uma das técnicas essenciais em biologia molecular é a capacidade de sequenciar o gene de um 
organismo. Esse sequenciamento é importante, pois identifica possíveis mutações, cadeias de 
transmissão e origem da chegada do vírus a uma região específica. De acordo com as técnicas 
empregadas para o sequenciamento de DNA, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as 
falsas:
( ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são utilizados para o sequenciamento com o método de 
Sanger, em que, posteriormente, faz-se a identificação da sequência com eletroforese. 
( ) O pirosequenciamento tem como base a formação de pirofosfato a cada novo nucleotídeo 
adicionado à nova fita. 
( ) O método empregado na plataforma Illumina foi a base para o desenvolvimento dos testes de 
sequenciamento que conhecemos atualmente, sendo a primeira geração de sequenciamento de DNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - F - V.
B F - F - V.
C V - V - F.
D V - F - F.
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