Avaliação I BINA- Individual

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14/06/2023, 21:50 Avaliação I - Individual
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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:823741)
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Prova 65698015
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
O advento das técnicas de biologia molecular possibilitou o estudo genético de diversos 
organismos, incluindo os seres humanos. Esses estudos têm trazido ganhos significativos no 
entendimento de doenças, síndromes e mecanismos de ação de substâncias. De acordo com a 
importância das técnicas de clonagem do DNA e construção de bibliotecas genômicas, classifique V 
para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas na construção de bibliotecas de DNA, com o objetivo de 
fragmentar o DNA genômico, já que podem ser conhecidas como tesouras moleculares. 
( ) Os vetores são essenciais na técnica de clonagem e são utilizados tanto na construção de 
bibliotecas de DNA, quanto de cDNA, uma vez que carregam os fragmentos de DNA ou o cDNA 
extraído.
( ) As bibliotecas de cDNA são construídas a partir da extração do DNA de células ou tecidos, que 
posteriormente é submetido à clonagem do DNA.
( ) O mRNA é convertido em cDNA pela transcrição reversa, para então serem introduzidos em 
vetores e submetidos ao processo de clonagem para originar as bibliotecas de cDNA.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - F - V - V.
B F - F - V - F.
C V - V - F - V.
D V - F - F - V.
O gráfico a seguir ilustra uma curva de amplificação da PCR em tempo real. De acordo com a 
interpretação do gráfico, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) A amostra A possui maior quantidade do gene avaliado, uma vez que possui menor Ct. 
( ) A amostra C possui maior quantidade de amostra, pois quanto maior o Ct, maior a quantidade de 
material disponível para iniciar a amplificação do gene de interesse. 
( ) A amostra B ultrapassou o Threshold após o ciclo 20, apresentando uma quantidade 
intermediária de amostra, quando comparadas às amostras A e C. 
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Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - F - F.
B F - F - V.
C V - F - V.
D V - V - F.
O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de 
expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida por PCR. 
Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir:
I- O RT-PCR avalia a expressão diferencial do mRNA, o qual será convertido em DNA 
complementar (cDNA).
II- A enzima transcriptase reversa (RT) é responsável pela síntese de uma fita de DNA, utilizando 
como molde uma fita simples de RNA. 
III- A técnica de RT-PCR é realizada em 40 ciclos, para formação de uma quantidade adequada de 
cDNA.
Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a sentença III está correta.
B Somente a sentença II está correta.
C As sentenças I e III estão corretas.
D As sentenças I e II estão corretas.
O processo de replicação do DNA é relativamente simples, envolvendo diversas enzimas para 
que a síntese de uma nova fita de DNA seja realizada. Com base nas enzimas envolvidas no processo 
de replicação in vivo, analise as sentenças a seguir:
I- A enzima DNA polimerase realiza a adição de novos nucleotídeos à nova fita do DNA que está 
sendo sintetizada, podendo atuar de modo independente do sentido da fita (3'-5' ou 5'-3'), já que não 
necessitam de iniciadores.
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II- As primases são enzimas responsáveis por adicionar primers (iniciadores) à fita de DNA que está 
sendo sintetizada, pois a DNA polimerase necessita de uma extremidade 3' disponível para a inserção 
do novo nucleotídeo. 
III- As enzimas, DNA girase e helicase, são as responsáveis por abrir a dupla fita de DNA, e cortar as 
pontes de hidrogênio entre os nucleotídeos, permitindo, assim, a separação da fita e síntese de uma 
nova fita.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças I e II estão corretas.
B Somente a sentença II está correta.
C As sentenças II e III estão corretas.
D Somente a sentença III está correta.
O mais recente avanço no campo de sequenciamento de DNA foi o desenvolvimento de 
plataformas portáteis capazes de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos. 
Um exemplo dessas plataformas é a MinION. Sobre a plataforma MinION, avalie as asserções a 
seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para que seja realizado o sequenciamento por meio da plataforma MinION, as amostras a serem 
sequenciadas são ligadas a enzimas de processamento. Essas enzimas induzem o fragmento de DNA 
a passar pelo nano poro, onde as variações da corrente elétrica são detectadas.
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II- Sendo conhecidas as variações características de cada nucleotídeo, a sequência de nucleotídeos é 
formada rapidamente.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
D As asserções I e II são proposições falsas.
O qPCR (PCR em tempo real) utiliza corantes fluorescentes ou sondas específicas, que emitem 
fluorescência quando se encontram ligados ou intercalados à fita de DNA no meio de reação da PCR. 
Considerando esse fator, a fluorescência, é proporcional à quantidade de material disponível para 
iniciar a amplificação. Sobre os parâmetros para quantificação do qPCR, avalie as asserções a seguir 
e a relação proposta entre elas:
I- O threshold, também conhecido como linha de corte, demonstra o momento em que a fluorescência 
apresentada está livre de ruídos, sendo essencialmente a representação da amplificação da amostra 
teste.
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II- O equipamento é capaz de determinar em que momento a fluorescência detectada é proveniente 
apenas das amostras que estão sendo amplificadas e, assim, determinar a linha de corte.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições falsas.
C As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
D A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.
As endonucleases de restrição são produzidas naturalmente por diversas bactérias. De acordo 
com essas enzimas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) As enzimas de restrição são utilizadas para fragmentar o DNA em regiões específicas, 
permitindo a manipulação do DNA.
( ) Cada bactéria produz uma enzima de restrição específica, que pode ser isolada e purificada a 
partir de colônias dessas bactérias.
( ) As enzimas de restrição não reconhecem sequências específicas, apresentando regiões de 
clivagem aleatórias de 4 a 8 nucleotídeos.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A F - V - F.
B V - F - F.
C F - F - V.
D V - V - F.
A técnica de eletroforese consiste na separação de moléculas de DNA, RNA ou proteínas em gel 
de agarose ou poliacrilamida. Essa separação se dá de acordo com o tamanho da molécula. Com base 
no processo de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:
I- Uma corrente elétrica é transmitida através do gel do polo negativo ao polo positivo. 
II- As moléculas de DNA são carregadas negativamente e são carregas por afinidade para o polo 
positivo. 
III- Moléculas menores tendem a migrar com maior dificuldade no gel. Já as moléculas maiores, 
tendem a migrar mais facilmente.
 
Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças I e III estão corretas.
B Somente a sentença II está correta.
C Somente a sentença III está correta.
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D As sentenças I e IIestão corretas.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Segundo o sumário da aula prática, as 
amostras contendo o DNA ou RNA purificados devem ser: 1) ressuspensas em um tampão e 
armazenadas em tubos, ambos “livres” de enzimas que possam degradá-las (como DNAse ou RNAse 
– nucleases); e 2) mantidas em baixas temperaturas (-20 ºC ou - 80 ºC). Todos os procedimentos 
devem ser realizados com luvas para evitar a degradação das amostras, devido à presença de 
nucleases nos fluidos corporais das mãos. De acordo com o processo de extração de DNA e RNA 
identificado na prática, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Etapa de Lise.
II- Etapa de Ligação.
III- Etapa de Lavagem.
IV- Etapa de Eluição.
( ) Pipete 25 µl da Proteinase K no tubo Eppendorf. Em seguida, pipete 200 µl da amostra de 
sangue no mesmo tubo e, por último, pipete 200 µl do tampão lise S no tubo. Tampe o Eppendorf e 
homogeneíze no Vórtex por 20 segundos. Após esse tempo, incube o Eppendorf por 15 min.
( ) Pipete 210 µl de álcool 96% no Eppendorf e homogeneíze de novo no Vórtex. Em seguida, 
pipete 640 µl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11.000 rpm por 1 minuto. 
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 500 µl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue 
novamente. Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta, porém a lavagem utilizará 600 µl do 
tampão de lavagem SII, e centrifugue novamente. Por fim, repita o mesmo processo da troca do tubo 
de coleta e centrifugue novamente.
( ) Retire o Eppendorf da centrífuga, descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo 
tubo de coleta. Em seguida, pipete 200 µl do tampão de eluição S no tubo spin, espere 1 minuto e 
centrifugue a amostra.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - II - III - IV.
B IV - III - II - I.
C II - III - IV - I.
D I - II - IV - III.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Conforme o sumário da prática, os 
ácidos nucleicos apresentam características estruturais específicas, que permitem que sejam isolados 
e manipulados para diversos tipos de aplicações. A técnica de hibridização in situ, por exemplo, 
baseia-se na complementaridade das fitas de DNA ou RNA, utilizando sondas fluorescentes para a 
detecção da fita complementar em uma determinada amostra. Essa técnica permite o estudo da 
expressão gênica. Outra técnica, que também tem o mesmo princípio e finalidade, é a reação em 
cadeia da polimerase transcriptase reversa (RT-PCR), muito utilizada no diagnóstico de algumas 
infecções e doenças. Considerando esses aspectos, o primeiro passo para a maioria das técnicas 
citadas é o isolamento e a purificação das moléculas de DNA e RNA. O processo de extração do 
DNA pode ser dividido em etapas. 
Com relação às etapas visualizadas na aula prática, assinale a alternativa CORRETA:
A Na Etapa de Lavagem, são adicionados 210 µl de álcool 96%.
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B A segunda etapa é denominada como Etapa de Ligação, em que é adicionado álcool 96% no
eppendorf, homogeneizado, e 640 µl são transferidos para o tubo spin. 
C A primeira etapa é a Etapa de Ligação, em que adicionamos 250 µl de Proteinase K, 20 µl da
amostra e 20 µl do tampão de lise S.
D O principal composto adicionado na Etapa de Ligação é a Proteinase K.
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