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Hematologi� II Hemograma é dividido em: ● Eritrograma: volume, hemácias, hemoglobina.. ● Leucograma: leucócitos totais e diferenciação. ● Plaquetograma: contagem, volume, %.. Leucócitos: Granulares: eosinófilo, basófilo, neutrófilo. Agranulares: Linfócito, monócito. Composição, proporcionalmente por campo: 500 hemácias: 30 plaquetas: 1 leucócito. Procedência: Plasma: água e alimentos Hemácias, plaquetas, granulócitos:medula óssea Linfócitos e monócitos: baço e linfonodos Reticulócitos: normal ter até 2% no sangue periférico, muito mais do que isso é sinal de que as hemácias não estão amadurecendo corretamente (hiperproliferação da medula). É normal (e bom) aumentar somente quando o paciente está em tratamento com remédios que aumentam a atividade da medula! → Não é possível enxergar reticulócitos com colorações normais para hemograma (os fragmentos de RNA em seu interior exigem corante específico), portanto para identificar, ele se parece porém um pouco maior e mais azulado. Eritropoese: processo de formação dos eritrócitos / hemácias, auxiliado pela eritropoetina. Plaquetas: NÃO SÃO CÉLULAS, são fragmentos de célula!! →O plasma possui fatores de coagulação, enquanto o soro não possui. Element�� figurad�� Sangue: tecido conjuntivo especializado. Possui elementos figurados: eritrócitos, leucócitos e plaquetas suspensos em plasma. Funções do sangue: → Transportar O2, nutrientes, hormônios, levar produtos tóxicos para os órgãos específicos, homeostasia, coagulação, migração de leucócitos. Plasma: aminoácidos, lipídeos, carboidratos, ureia, ácido úrico, creatinina… → Amostras com hemólise, lipemia, hiperbilirrubinemia, são descartadas. → Sangue é 90% água, 9% proteínas e 1% substâncias orgânicas. EDTA: anticoagulante irreversível! Quelante de Ca+ Citrato: anticoagulante reversível! Quelante de Ca+ Hemácia�: Eritrócitos ou glóbulos vermelhos, dão a cor característica do sangue por possuírem o pigmento vermelho da proteína hemoglobina. Sua produção é chamada de Eritropoiese e ocorre na medula óssea, e sua “morte” no baço e fígado. 1mm³ de sangue→ 5,5 milhões de hemácias (45% do volume do sangue). → O tempo de vida médio de uma hemácia é de cerca de 120 dias, já que não possuem núcleo. Distúrbios dos eritrócitos Anemia: causa falta de vigor, cansaço físico e mental, causada por: → Perda acelerada de hemácias. Pode ser: ● Perda de sangue: células normais mas em baixo nº. ● Anemias hemolíticas: ruptura de um grande nº de células Hereditárias Defeitos na membrana (esferocitose hereditária) Defeitos em enzimas (G6PD) Hemoglobina anormal (falciforme) Talassemia Adquiridas Infecções parasitárias (malária) Drogas Reações autoimunes → Diminuição na produção de hemácias: ● Síntese defeituosa de hemácias ou hemoglobinas pela medula. Anemia Aplásica Pode ser causada por certas drogas ou radiação Dieta inadequada Deficiência de ferro Deficiência de ácido fólico Deficiência de B12 Ferro→ Auxilia na produção de hemoglobina A. Fólico e B12→ Auxilia na produção de DNA → Produção inadequada de eritropoetina, hormônio que regula a produção de hemácias. Leucócit��: Glóbulos brancos, realizam a defesa do organismo, possuem muitos tipos com funções específicas. Podem ser: Polimorfonucleares: ● Neutrófilos ● Eosinófilos ● Basófilos Mononucleares: ● Linfócitos ● Plasmócitos ● Monócitos Neutrófilos: 45% a 75% dos leucócitos, núcleo com 2 a 5 lóbulos e grânulos. Função fagocitária, são os 1ºs a chegar no local da infecção. Monócito: 2% a 8% dos leucócitos, núcleo com vacúolos citoplasmáticos. Ficam 4-8 horas na circulação (vida curta), se diferenciam em macrófagos quando vão para o tecido. Função fagocitária. Eosinófilos: muito associados à alergias, liberam histamina. Defesa contra parasitas metazoários helmínticos. Engloba elementos estranhos. Granulação grossa e mais alaranjada. Basófilos: iniciam o processo inflamatório. Contém grânulos de heparina e histamina, possuem receptores de IgE na sua M.P. Linfócitos: 20% a 30% dos leucócitos, núcleo arredondado e pouca ou nenhuma granulação, muito grande, quase do tamanho do citoplasma. Responsáveis pela resposta imune adquirida. Podem ser B ou T. → Linfócitos T: imunidade citotóxica e rejeição de tecidos estranhos. → Linfócitos B: imunidade humoral, se diferenciam em plasmócitos. → Plasmócitos: secretam anticorpos (imunoglobulinas). → Linfócitos atípicos: “células de downey”, não maligno, pode ser encontrado no sangue periférico em resposta a alguns estímulos antigênicos. Como diferenciar os tipos de linfócitos? • Tamanho - comparando com as hemácias. • Forma. • Forma e tamanho do núcleo. • Aspecto do citoplasma. • Estruturas citoplasmáticas. • Relação núcleo/citoplasma. Macrófagos: defesa contra invasores (fagocitose), remove células velhas ou danificadas da circulação, estimula o processo inflamatório, apresentação de antígenos. Ficam nos tecidos. Podem possuir diferentes nomes dependendo de onde se encontram: ● histiócito (tecido conjuntivo); ● célula de Kupffer (fígado); ● célula da microglia (cérebro); ● macrófagos alveolares (alvéolos); ● osteoclastos (ossos). Pus Regiões do nosso corpo que macrófagos e neutrófilos estão fagocitando partículas estranhas: “campos de batalha”. Local de ligação entre leucócitos e os invasores vivos. O pus são os restos dos invasores destruídos e fragmentos de glóbulos brancos, que formam um líquido viscoso e branco-amarelado. Trombócit�� Fragmentos de células anucleados granulosos, provenientes dos Megacariócitos. Atuam limitando a hemorragia (coagulação). Produção regulada pelo hormônio trombopoetina e leva cerca de 10 dias entre a célula-tronco e a plaqueta final. 1 megacariócito = 1000 a 5000 plaquetas. Funções hemostáticas: ● Aderem ao colágeno ● Receptoras do fator Von Willebrand ● Agregação plaquetária ● Liberação de ADP ● Síntese de prostaglandinas, tromboxano e serotonina. Funções não-hemostáticas: ● Inflamação ● Cicatrização Vasoconstrição→ agregação plaquetária→ coagulação. Hem�stasi� Primári�: 1. Ação vascular e plaquetária 2. Tampão plaquetário 3. Vasoconstrição → Essa fase estanca o sangramento. É dividida em: adesão, ativação e agregação. Lesão: libera a matriz celular para o meio, colágeno exposto, libera fator de von willebrand. Adesão: Engatilhada pela lesão vascular. O colágeno liga-se nas plaquetas através do Fator de Von Willebrand, por meio de GPIa/IIa e GPVI. Adesão direta entre plaqueta e colágeno. → Fator de von willebrand: glicoproteína muito grande. Ativação: vasoconstrição pela serotonina, com redução da perda de sangue e resposta do músculo liso, que se contrai. Agregação plaquetária no sítio da lesão (tromboxano). Agregação: plaquetas se ligam, formando a teia plaquetária com ajuda do fibrinogênio. A ligação de uma plaqueta à outra é o resultado da ligação do fibrinogênio à glicoproteína IIb – IIIa. Hem�stasi� Secundári�: 1. Fatores de coagulação 2. Rede de fibrina → A rede de fibrina é o produto final, estabilizado pelo fator XIII. Cascata de proteínas: Via extrínseca + via intrínseca = via comum. Via extrínseca: → É a 1ª a ser ativada, ativa a via intrínseca. Fator tecidual (TF) está liberado na corrente sanguínea e interage com o fator VII, que é ativado e se torna fator VIIa/TF. O fator VII converte X e IX em suas versões ativadas. X ativado sem seu cofator, converte a protrombina em trombina. Via intrínseca: Fator IX, XI e VIII. Fibrinólise: processo de quebra das redes de fibrina após a cicatrização, efetivada pela plasmina. Hemofilia: doença que afeta a coagulação sanguínea, o indivíduo é geneticamente incapaz de fabricar o fator VIII ou IX. Pode ter sangramentos prolongados e hemorragia interna. O tratamento é feito com transfusões de sangue, plasma ou injeções concentradas com fatores de coagulação. Seu hemograma, contagem de plaquetas e o TAP estarão normais, o exame de TTPA “tempo de tromboplastina parcial ativada” estará alterado (prolongado demais). Tipos: A - deficiência do fator VIII. B - deficiência do fator IX. Colet�� Conservaçã� d� sangu� Coleta: Usar luvas e trajes apropriados. Jamais reencapar agulhas. Transferir o sangue para o tubo pela seringa e nunca pela agulha. Tipos de exposições Percutâneas: provocadas por instrumentos perfurantes e cortantes. Mucosas: quando há respingos na face envolvendo olho, nariz, boca ou genitália. Cutâneas: contato com pele com dermatite ou feridas abertas. Mordeduras humanas: consideradas como exposição de risco quando envolverem a presença de sangue. Conservantes: desenvolvidos para manter o metabolismo energético eritrocitário através da glicólise e assegurar a viabilidade celular durante a estocagem do sangue. → O sangue e seus componentes podem ser utilizados logo após a coleta ou armazenados entre 1 e 6°C, já as plaquetas e sangue total não permanecem viáveis por mais de 6 horas. → Torniquetes ficam por no máximo 1 minuto!! 8 cm ou 1 palmo acima do local da punção. Hemocultura: coletar antes de começar uso de antibióticos, fazer antissepsia com álcool 70% e clorexidina, não tocar mais na área após antissepsia, coletar 2 amostras de 10ml em locais diferentes. Cateter: fazer antissepsia com álcool 70%, remover o cateter e cortar 5 cm da parte mais distal (introduzida na pele), colocar o pedaço do cateter em frasco estéril. Feridas: limpar com solução fisiológica, coletar o material localizado na parte mais profunda da ferida, aspirando com seringa de insulina ou, em último caso, swabs. Erros mais comuns: garrotear muito tempo, agulhas muito finas, aspiração violenta, transferir o sangue pela agulha, agitação violenta do tubo, demorar para transferir ao tubo, puncionar veias em áreas ligadas ao soro. Complicações: sangramento, hematoma, infecção, tonturas, desmaios. Jejum: apenas para exames de glicose (8 a 12 horas adultos e 3 horas crianças), TSH e PSA (4 horas). Esfregaç� � Coloraçã�: → Teste realizado para a contagem e a identificação de anormalidades nas células do sangue. Serve para analisar: ● Morfologia das células ● Quantificar leucócitos e plaquetas ● Pesquisa de hemoparasitas → Não pode ser muito espesso e nem ocupar a lâmina como um todo. Procedimento: Pingar 1 gota de sangue na extremidade da lâmina, com a extensora fazer um ligeiro movimento para trás até encostar na gota, deixando que ela se difunda pela borda, depois arrastar de uma só vez para frente espalhando pela lâmina. “Gota espessa”: é corada pela técnica de Walker (azul de metileno e Giemsa), enquanto o esfregaço delgado é corado pelo Giemsa. Vantagens: ● Maior concentração de sangue ● Coloração mais rápida ● Distribuição de parasitas e leucócitos se dá ao acaso em toda amostra Desvantagens: ● Requer experiência de hemoparasitas, já que altera sua morfologia ● Requer processamento rápido Coloração: Corante básico→ cora estruturas ácidas, chamadas basófilas. Corante ácido→ cora estruturas básicas, chamadas acidófilas/eosinófilas. → A mistura de corantes inclui um corante básico e um ácido, consistindo em azul de metileno (básico) e eosina (ácida - avermelhada). Panótipo: tipo de coloração com 3 corantes, mergulhando e esperando cada um secar. Coloração Diferencial Rápida: 1 solução cora várias estruturas, mistura de corantes (Giemsa). Alteraçõe� Eritrocitária�: Normocitose: pode estar com anemia de doença crônica, ou deficiência de B12, ácido fólico ou ferro. Macrocitose: Nota-se apenas com um VCM muito alto. Aumento de HCM sem aumento de CHCM. Causas: fármacos, hepatopatias, esplenectomia, hiper-regeneração eritróide, anemias megaloblásticas e aplásticas, síndrome de Down, fumantes. Microcitose: anemia ferropriva, talassemias, hemoglobinopatias. Anisocitose: RDW alterado! Drepanócitos: hemácias em foice, presença de hemoglobina S. Anemia falciforme. Dacriócitos: forma de gota. Mielofibrose, talassemias, anemias. Esferócitos:menores e hipercorados. Ovalócitos/eliptócitos: forma oval, anemias micro e megaloblásticas, síndromes mieloproliferativas. Estomatócitos: fenda pálida central. Doenças hepáticas, uso de asparaginase, estomatocitose. Equinócitos: espículas. Uremia, hipotireoidismo, hepatopatias, heparina intravenosa. Acantócitos: menos espículas, mais irregulares. Hepatopatias, pós-esplenectomia. Leptócitos: ”target cells”, células em alvo. Beta talassemias, asplenia, hemoglobinopatias C e S. Queratócitos: hemácias fragmentadas, ”helmet cells”. Invaginação da membrana, parecem capacetes. Trauma por colisão, trauma ao passar por depósitos de fibrina e agregados plaquetários, traumas mecânicos. Esquizócitos: fragmentação mas intensa, pedaços de eritrócitos emmeia-lua, triângulo ou outras formas. → Avaliar se há distribuição homogênea ou aglutinações como crioaglutinação e rouleaux!! Alterações de coloração: ● Hipocromia (CHCM baixo) ● Normocromia (CHCM normal) ● Hipercromia (CHCM alto) Alteração de formato: poiquilocitose. Inclusõe� Eritrocitária�: Corpos de Howell-Jolly: restos nucleares remanescentes. Hipofunção esplênica, anemias megalo e mielodisplasias. Pontilhado basófilo: coloração pela precipitação dos ribossomos, quando muito ricos em RNA. Polocromatocitoses, micrócitos de beta talassemia, saturnismo. Corpos de Heinz: corpúsculos maiores de hemoglobina desnaturada. Variantes estáveis da hemoglobina, deficiência de G6PD. São removidos pelo baço, de modo que são numerosos em pacientes esplenectomizadas. Siderócitos: grânulos de ferro dispersos de modo irregular na periferia do eritrócito. Síndromes sideroblásticas. Anéis de Cabot: restos de membrana nuclear em forma de filamento. Anemias megalo, maturação incorreta. Inclusões parasitárias: hematozoários da malária ou da babesiose. → Eritroblastos são eritrócitos imaturos, nucleados e não existem normalmente no sangue periférico. Aparecem em: ● Hiper-regenerações eritróides extremas ● Metaplasia mielóide ● Mielofibrose ● Disseminação tumoral ou necrose “Policromatocitose”: eritrócito jovem. Pode ser encontrada em anemias hemolíticas e trauma. Hematopoies�: → Formação e renovação das células sanguíneas. → Tecido mielóide; ● Eritrócitos; ● Leucócitos granulócitos; ● Plaquetas. → Tecido linfático ● Linfócitos T e B. ● Células NK Órgãos hematopoiéticos na vida uterina: 0-2 meses Ilhotas sanguíneas do saco vitelino 2-7 meses Fígado e baço 5-9 meses Medula Óssea Adultos:Medula Óssea. Metaplasia mielóide: Em uma anemia hemolítica, a medula óssea gordurosa é substituída pela vermelha e o fígado e baço reassumem função hematopoiética!! Compensatório. Estroma: ambiente. Fibroblastos, adipócitos, macrófagos, linfócitos, endotélio dos sinusóides medulares secretam substâncias que formam matriz extracelular e fatores de crescimento para sobrevivência da célula tronco. Células tronco→ Células progenitoras (mitose)→ Células precursoras (crescimento)→Maduras. Células formadoras de colônias (CFC): precursoras imediatas das células maduras do sangue periférico. Hematopoiese inclui: ● Eritropoiese ● Granulocitopoiese ● Granulocitopoiese ● Plaquetopoese (trombopoiese) 1 célula tronco = 106 células maduras Eritrócitos: transportam O2 e CO2 através da hemoglobina. Eritropoietina: hormônio regulador da eritropoiese. Controlada pelo teor de O2 sanguíneo. Reticulócitos: hemácias jovens e anucleadas, com restos de RNA. Em grande quantidade indica atividade proliferativa compensatória da medula óssea. Eritropoiese: 1. Proeritroblasto (progenitora) 2. Eritroblasto basófilo (precursora) 3. Eritroblasto policromático 4. Eritroblasto ortocromático 5. Reticulócito 6. Hemácia Granulopoiese: ● Mieloblasto ● Promielócito ● Mielócito ● Metamielócito ● Bastonete ● Segmentados Monopoiese: ● Monoblasto ● Promonócito ● Monócito Linfopoiese: ● Linfoblasto ● Prolinfócito ● Linfócito Plaquetopoese/ Trombopoiese: ● Megacarioblasto ● Promegacarioblasto ● Megacariócito basófilo ● Megacariócito acidófilo ● Plaquetas Trombopoietina: hormônio regulador da trombopoiese, encontrado nos fígados e rins. Plaquetas: fragmentos do citoplasma. Responsáveis pela adesão e agregação plaquetária. Retração do coágulo(actina e miosina) Remoção do coágulo (plasmina e enz. lisossomais) Condições especiais: • Hemodiluição (Falsa anemia) – Gravidez – Anasarca (Insuf. Renal) – Hiper-hidratação • Hemoconcentração (Falsa poliglobulia) – Diuréticos – Queimaduras – Gastroenterite – Hiperleucocitose (elevação falsa de hemácias) Índice� eritrocitári��: VCM: média do tamanho (volume) das hemácias. Anemias: ● Normocíticas (VCM=80-100 fl) ● Microcíticas (VCM<80 fl) ● Macrocíticas (VCM> 100 fl) HCM: conteúdo médio de hemoglobina por hemácia (massa). Anemias: ● Hipocrômica (HCM<27 pg) ● Normocrômica (HCM 27 - 32 pg). CHCM: hemoglobina encontrada em 100 mL de hemácias. Hemácias: ● Normocrômicas (CHCM = 31-36 g/dL) ● Hipocrômicas (CHCM < 31,0 g/dL) RDW: heterogeneidade dos tamanhos (anisocitose). Normal entre 11,5% e 15%. Hemogram�: ● Eritrograma ● Leucograma ● Plaquetograma Eritrograma: avalia as hemácias, quantitativo e qualitativo. Avaliaçã� Quantitativ�: Contagem de eritrócitos: eletronicamente, variação de 2%. Erros: crioaglutinação e rouleaux. Diminuição: eritrocitopenia Aumento: eritrocitose Dosagem de hemoglobina: espectrofotometria, variação de 2%. Erros: lipemia, muitos leucócitos, sujeira na leitura. Hematócrito: eletronicamente, é o volume globular. Histograma: curva de frequência da distribuição e tamanho dos eritrócitos. Curva mais à esquerda é microcitose, mais a direita é macrocitose. Leucograma: contagem manual (Câmara de Neubauer) ou eletronicamente. Em ordem dos mais encontrados: 1. Neutrófilo 2. Linfócitos 3. Eosinófilos 4. Monócitos 5. Basófilos OBS: Na infância (até 6-7 anos) há um predomínio de linfócitos sobre neutrófilos! → Citopenias e citoses relativas (%) nada significam se não acompanhadas de citopenias ou citoses absolutas! A única exceção em que o valor percentual tem significado interpretativo é no número de neutrófilos bastonados. Bastonete >5% = desvio à esquerda!! Plaquetograma: EDTA, atraso de coleta, conservação in vitro e não homogeneizar podem causar agregações plaquetárias (1)! Satelitismo plaquetário: as plaquetas aderem in vitro aos neutrófilos, envolvendo-os como uma coroa, induzido pelo EDTA (2). VPM: volume plaquetário médio, normal entre 7-10 fl. PDW: uniformidade das plaquetas. Plaquetas: 140.000- 400.000/µl Avaliaçã� Qualitativ�: → Presença de macroplaquetas ou microplaquetas, plaquetas dismórficas. Aumento: trombocitose (anemia ferropriva, pós operatório/esplenectomia) Diminuição: trombocitopenia (viroses, esplenomegalia, anemias hemolíticas, heparina). Síndrome Bernard Soulier: trombocitopenia com plaquetas gigantes (VPM >15) e agregação plaquetária defeituosa. Síndrome Wiskott-Aldrich: insuficiência imunológica, trombocitopenia commicroplaquetas. TA: trombocitopenia com ausência de rádio. Doença autossômica recessiva. Reticulocitose: Não é normal o aparecimento de eritroblastos no sangue periférico, salvo em hemogramas de recém-nascidos! ● Anemia aguda pós-hemorrágica, ● Anemia hemolítica autoimune adquirida, ● Esferocitose, Drepanocitose e Talassemia. ● Hemoglobinúria paroxística noturna.
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