PrÃtica Remota Fotocolorimetria

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO 
DEPARTAMENTO DE BIOFÍSICA E RADIOBIOLOGIA 
PROF. THIAGO SALAZAR FERNANDES 
AULA: FOTOCOLORIMETRIA 
 
Roteiro da aula prática de Fotocolorimetria: 
 
1- o que acontece com a transmitância, na medida que você vai aumentando a espessura da coluna até ela ficar o mais larga possível? 
2- 
À medida vai aumentando o tamanho do recipiente, a transmitância vai diminuindo 
3- e o que acontece com a absorbância quando você faz o mesmo procedimento? 
À medida que vai aumentando o tamanho do recipiente, a absorbância o valor vai aumentando. 
Espectro de Absorção: 
1- Mantenha a concentração em 80 mM, não altere. 
2- Anote as absorbâncias nos comprimentos de onda de 410, 480, 520, 580 e 660 nm. 
	 (nm)
	 A
	410 nm 
	0,06
	480 nm 
	0,16
	520 nm 
	0,20
	580 nm
	0,02
	660nm
	0,01
3- Crie o gráfico do Espectro de Absorção, e responda qual foi o fotopico. 
· O fotopico foi 520 nm 
Curva de Calibração: 
1- Mantenha o comprimento de onda no valor do fotopico, não altere. 
2- Anote as absorvâncias das concentrações de 20, 40, 80, 160 e 320 mM. 
	 C 
	 A
	20 mM
	0,05
	40 mM
	0,10
	80 mM
	0,20
	160 mM
	0,39
	320 mM
	0,79
3- Construa agora o gráfico de Curva de Calibração. 
Questão: Chega ao laboratório uma amostra "desconhecida". A absorbância medida foi igual a 0,5. Qual a concentração desta amostra. Mostre o cálculo usando o FC (Fator de Calibração). P.S.: Para responder, leia a Apostila em anexo. 
Cx = F .Ax
Cx = F . 0,5
Cx = 520 nm . 0,5
| Cx= 260 nm | 
20	40	80	160	320	
0.05	0.1	0.2	0.39	0.79