relatorio gram negativas

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CENTRO UNIVERSITÁRIO NATALENSE – UNICEUNA
DISCIPLINA: ESTÁGIO EM ANÁLISES LABORATORIAIS BÁSICAS
PROFESSORA: ELIZABETH SANTOS
CURSO DE FARMÁCIA
ESTÁGIO EM ANÁLISE LABORATORIAL BÁSICA
COLORAÇÃO DE GRAM
ALUNO: MAURA DA COSTA TORRES
NATAL/2023
IDENTIFICAÇÃO
Subtítulo do relatório: Coloração de Gram
Discente: Maura da Costa Torres 
Docente: Drª. Elizabeth Santos
Unidade curricular: Estagio em Análises Laboratoriais Básicas.
Curso: Farmácia 
Período: 3ª período
Objetivo: Realizar a coloração de Gram evidenciando o seu fundamento, além de aprender o preparo de um esfregaço de bactéria e observar suas características morfotintoriais.
INTRODUÇÃO
 	Os meios de cultivo, são mistura de substâncias, (polímeros sintéticas, carboidratos, proteínas e etc.) que se destinam ao cultivo artificial de micro-organismos.
As técnicas de semeadura permitem que o cultivo destes micro-organismos nos meios de cultura seja eficiente e que as seguintes finalidades sejam atingidas: crescimento bacteriano, isolamento bacteriano, estudo da morfologia colonial, pesquisa de patogenicidade e pesquisa das características bioquímicas. 
A partir deste meios de cultivo, foi feita a coloração de gram, que é uma técnica de coloração na qual a diferença no envoltório celular divide a classificação de bactérias em dois grupos: Gram-positiva e Gram-negativa. 
Essa técnica recebeu este nome em homenagem ao médico Dinamarquês Hans Cristian Joaquim gram. Por volta de 1884, Hans gram observou, que após bactérias serem tratadas com diferentes corantes elas adquiriram cores diferenciadas. Desta forma, as que ficavam roxas foram classificadas como Gram-positiva e as que ficam avermelhadas/rosadas, foram classificadas como gram negativas. 
OBJETIVOS
· Realizar a coloração de Gram evidenciando o seu fundamento, além de aprender o preparo de um esfregaço de bactéria e observar suas características morfotintoriais.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
• Aprender a realizar meio de cultura;
· Comprovar a importância da coloração de Gram;
• Realizar o procedimento de preparação de um esfregaço bacteriano;
• Investigarr as propriedades morfotintoriais das bactérias.
MATERIAIS E MÉTODOS
PRODUTOS UTILIZADOS
	 MATERIAIS
	UTILIZADOS
	Meio de cultura com bactéria
	Alça bacteriológica
	Cristal violeta
	Pinça
	Lugol (Mordentes)
	Bico de Bunsen ou lamparina
	Álcool etílico 95% (Descorante)
	Recipiente de vidro
	Fucsina ou Safranina (Contracorante)
	Fósforo
	Água destilada
	Microscópio
	Salina estéril
	Óleo de imersão
	Lâmina
	
PROCEDIMENTO 
ESFREGAÇO 
O esfregaço bacteriano é uma técnica fundamental na área da saúde, permitindo a visualização e identificação de bactérias em amostras clínicas, auxiliando no diagnóstico e tratamento de infecções. Além disso, é uma importante ferramenta de pesquisa científica para entender melhor os patógenos e monitorar surtos.
Para iniciar a prática, nós utilizamos lâminas limpas, secas e sem gordura. Antes de usar, as lâminas passaram por um processo de desinfecção, com a utilização de uma lamparina e inserida a numeração. Com o auxílio de alça bacteriológica, onde a mesma foi flambada, resfriada próxima à chama da lamparina. 
Foi adicionado duas gotas de salina na lâmina. Utilizando a alça bacteriológica, já flambada, a placa de Petri com amostra de bactérias, foi aberta e tocada na colônia. Para realizar o esfregaço é preciso fazer movimentos giratórios até obter o esfregaço homogêneo e fino. Posteriormente, o esfregaço foi colocado próximo a chama para secar. Com o esfregaço seco, o mesmo foi fixado através do calor, passando rapidamente pela chama lamparina por três vezes.
Figura 1:lamina com salina, esperando secagem. 
COLORAÇÃO
O esfregaço foi colocado o cristal violeta por 1 minuto. Em seguida, foi retirado com água destilada. Posteriormente, a solução de lugol foi colocada na lamina por 1 minuto e novamente retirada com água destilada. 
Figura 02: lavagem das lamina.
Foi realizada a lavagem das lâminas com solução descolorante por 15 segundos, até obter uma lâmina integra, com o material fixo. Após isso, foi lavada com água destilada. 
A solução de fucsina foi adicionada na lâmina por um período de 30 segundos. Posteriormente, foi lavado com água destilada e deixado secar em temperatura ambiente. Após a secagem das lâminas. Foi observado as lâminas com a utilização do microscópio, objetiva de 100X, utilizando o óleo de imersão.
 
Foto 03: secagem das lâminas para fixação do material. 
Foto 04: analise com o microscópio, objetiva de 100X, utilizando o óleo de imersão.
Foto 05: imagem microscópio. Bactéria Gram negativa, presença da coloração rosa. 
RESULTADO E DISCUSSÃO
A coloração de Gram é um método de coloração diferencial utilizado para distinguir bactérias gram-negativas e gram-positivas. 
Durante o experimento, foram preparados esfregaços de bactérias e submetidos à coloração de Gram. As bactérias gram-negativas apresentaram coloração rosa ou vermelha, indicando a presença de uma fina camada de peptidoglicano em sua parede celular. Já as bactérias gram-positivas apresentaram coloração roxa ou violeta, indicando a presença de uma espessa camada de peptidoglicano em sua parede celular. 
Através deste experimento, foi possível observar as características morfotintoriais das bactérias e compreender o fundamento da coloração de Gram.
CONCLUSÃO
Através deste experimento, foi possível observar as características morfotintoriais das bactérias e compreender o fundamento da coloração de Gram.
REFERENCIAS 
HENRIQUE, Indianara Dias Marcone,Universidade Comunitária Da Região De Chapecó – Unochapecó Área De Ciências Exatas E Ambientais Técnicas Gerais De Semeadura, Coloração De Gram E Coloração De Esporos Indianara Dias Marcone Henrique Chapecó – Sc 2013 Técnicas De Semeadura, Coloração De Gram E Coloração De Esporos Relatório Apresentado À Disciplina De Microbiologia De Alimentos I, Que Faz Parte Da Grade Curricular Do Curso De Engenharia De Alimentos. Professora: Raquel Zeni Ternus. Chapecó – Sc, Abr. 2013