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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS CURSO: BIOMEDICINA DISCIPLINA:BIOQUÍMICA METABÓLICA NOME DO ALUNO: SILVIA HELENA SOARES DOS SANTOS RA: 0603525 POLO DE MATRÍCULA: BAURU- POLO PRÓPIO POLO DE PRÁTICA BAURU- POLO PRÓPIO PROFESSORA: TALITA VENTURA DATA DAS AULAS PRÁTICAS: 23/09/2023 30/09/2023 BAURU,06 DE OUTUBRO DE 2023 ATIVIDADE OBRIGATÓRIA Figura 1: ATIVIDADE 1 Fonte: Autor, 2023. 1 Figura 2: ATIVIDADE 2. Fonte: Autor, 2023. 2 Fonte: Autor, 2023. 3 Figura 3: ATIVIDADE 3. Figura 4: ATIVIDADE 4. Fonte: Autor, 2023. 4 DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 1 AULA: 1 DATA DA AULA: 23/09/2023 DETERMINAÇÃO DA GLICEMIA Objetivo: Relembrar a fórmula de Haworth da D – α-glicose e diferenciar da D – β-glicose. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realizada leitura do manual do kit de enzimas em seguida a coleta de sangue venoso de três alunas voluntárias em tubo seco, devidamente identificados em seguida realizada a centrifugação para obtenção do soro. Seguida do preparo do kit de determinação enzimática com auxílio de micropipetas e feito a calibração do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: Tabela 1: ABSORBÂNCIAS. ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1 W AMOSTRA 2 D AMOSTRA 3 SH BRANCO 0 0 0 PADRÃO 1,102 1,102 1,102 AMOSTRA 1,167 1,244 0,121 Fonte: Autor, 2023. 5 Em seguida foi realizado os cálculos de acordo com o manual do fabricante do kit enzimático utilizado: ABSORBÂNCIA DO TESTE X 100 ABSORBÂNCIA DO PADRÃO E obtivemos os seguintes resultados: AMOSTRA 1 W: 105mg/dL AMOSTRA 2 D: 112mg/dL AMOSTRA 3 SH: 10,98mg/dL Realizado novo teste ao qual manteve os mesmos parâmetros de confirmação. ESULTADOS E DISCUSSÃO Após discussão sobre os resultados obtidos e o processo de análise, concluiu-se a importância do preparo Pré exame como no caso o jejum e possíveis interferências que podem alterar o resultado, atrapalhando o diagnostico medico como por exemplo a interferência de luminosidade durante o uso do espectrofotômetro, o uso incorreto das micropipetas, o armazenamento e preparo do kit de determinação enzimática ao qual deve sempre ser de acordo com o manual de instruções e até mesmo considerar possíveis alterações fisiológicas já existentes do próprio paciente, pois a análise da determinação quantitativa da glicose é de extrema importância na prevenção, diagnostico e acompanhamento do diabetes Mellitus, hipoglicemia e hiperglicemia. Figura 8:AMOSTRA CENTRIFUGADA. Fonte: Autor, 2023. 9 Fonte: Autor, 2023. 8 Figura 7:CENTRIFUGAÇÃO. Figura 6: PIPETAGEM E PREPARO DO KIT ENZIMATICO. Fonte: Autor, 2023. 7 Fonte: Autor, 2023. 6 Figura 5: CALIBRAÇÃO E ANALISE. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 2 AULA:1 DATA DA AULA: 23/09/2023 DETERMINAÇÃO DA GLICOSURIA Objetivo: Relembrar a função renal e o limiar de reabsorção renal para glicose (quando ultrapassado, entre 160 mg/dL e 180 mg/dL, o excesso de glicose será encontrado na urina, chamado de glicosúria). Como a urina fica acumulada na bexiga, dependendo se a pessoa ingeriu muito ou pouco líquido, não reflete a glicose sanguínea no momento do teste. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza coleta de amostra de urina em frasco simples por alunas voluntarias, em seguida cada urina foi transferida para um tubo diferente identificado e após 45 segundos das fitas na urina procedeu-se a leitura para determinação da glicosuria obtendo os seguintes resultados: AMOSTRA 1 S: NEGATIVO PARA GLICOSURIA. AMOSTRA 2 W: NEGATIVO PARA GLICOSURIA. RESULTADOS E DISCUSSÃO A determinação da glicosuria através da fita teste resulta em uma analise qualitativa da glicose na urina pois, quando o linear de reabsorção renal ultrapassa a faixa de 160 e 180mg/dL o escedente estará presente na urina, determinando a provavel diabettes Melitus ou uma provavél lesão renal. Fonte: Autor, 2023. 10 Figura 10: TESTE. Figura 9: RESULTADO. Fonte: Autor, 2023. 11 DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 3 AULA: 1 DATA DA AULA: 23/09/2023 DETERMINAÇÃO DE COLESTEROL TOTAL NO SANGUE Objetivo: Relembrar a fórmula geral do colesterol, sua origem e destinos. Estudar as funções do colesterol e discutir as dislipidemias. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza coleta de sangue venoso de três alunas voluntárias em tubo seco, devidamente identificados em seguida realizada a centrifugação para obtenção do soro. Seguida do preparo do kit de determinação enzimática de colesterol com auxílio de micropipetas e feito a calibração do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: Tabela 2: ABSORBÂNCIAS. ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1 SH AMOSTRA 2 W AMOSTRA 3 D BRANCO 0 0 0 PADRÃO 0,266 0,266 0,266 AMOSTRA 0,261 0,186 0,215 Fonte: Autor, 2023. 12 Em seguida foi realizado os cálculos de acordo com o manual do fabricante do kit enzimático utilizado: ABSORBÂNCIA DO TESTE X 200 ABSORBÂNCIA DO PADRÃO E obtivemos os seguintes resultados: AMOSTRA 1 SH: 196,24 mg/dL AMOSTRA 2 W: 139,84 mg/dL AMOSTRA 3 D: 161,65 mg/dL RESULTADOS E DISCUSSÃO Apesar do colesterol ser idispensavel para o bom funcionamento do organismo pois umas de suas funçoes é a produção de hormonios, vitaminas e acidos biliares além de compor as membranas celulares, o seu aumento pode acarretar serios problemas para a saude do individuo. A LDL sendo responsavel pelo transporte do colesterol do figado para celulas, quando esta alta podera criar depositos em arterias (arterosclerose) e oxidar podendo ainda resultar no emtupimento dos vasos formando trombos possibilitando uma doença cardiovascular e ate mesmo um AVC. Já a HDL tem função contraria trabalha removendo o colesterol em excesso das arterias encaminhando as para o figado impedindo assim seu acumulo nos vasos, por esse motivo é chamdo de “bom colesterol”. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 1 AULA: 2 DATA DA AULA: 23/09/2023 DETERMINAÇÃO DE TG NO SANGUE Objetivo: Relembrar a fórmula estrutural dos triglicerídeos, de onde provêm e sua função no corpo humano. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza a leitura do manual do kit de enzimas em seguida a coleta de sangue venoso de uma aluna voluntaria em tubo seco, devidamente identificados em seguida realizada a centrifugação para obtenção do soro. Fonte: Autor, 2023. 14 Figura 11: TESTE. Figura 12: CALIBRAÇÃO. Fonte: Autor, 2023. 13 Seguida do preparo do kit de determinação enzimática com auxílio de micropipetas e feito a calibração do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: Tabela 3: RESULTADO EM ABSORBÂNCIA. ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1 BRANCO 0 PADRÃO 0,240 ABS. AMOSTRA 1 433,33 Fonte: Autor, 2023. 17 Em seguida foi realizado os cálculos de acordo com o manual do fabricante do kit enzimático utilizado: ABSORBÂNCIA DO TESTE X 200 ABSORBÂNCIA DO PADRÃO E obtivemos os seguintes resultados: AMOSTRA 1: 433,33 mg/dL. RESULTADOS E DISCUSSÃO Utilizados como reserva de energia os triglicerídeos os triglicérides quando em excesso poderá acarretar diversos problemas cardiovasculares e até pancreatite por bloquear ductos pancreaticos. Figura 13: PRERARO. Fonte: Autor, 2023. 16 Fonte: Autor, 2023. 15 Figura 14: CALIBRAÇÃO. Com a analise do resultado obtido tem se um nivel elevado 433,33mg/dL em relação aos indices de referência de normalidade 150 a 200 mg/dL e alguns fatores como erro de preparo, armazenameto inadequado, contaminação de amostra, jejum e até mesmo a existenciade alterações fisiologicas do paciente podem auterar esses parametros. Por relato da voluntaria (no caso a propria autora deste) refere esteatose hepatica. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 2 AULA: 2 DATA DA AULA: 23/09/2023 DETERMINAÇÃO DE PROTEINAS TOTAIS E ALBUMINA NO SANGUE Objetivo: Relembrar a fórmula geral dos aminoácidos e proteínas. Explicar a importância da determinação das proteínas totais e o papel fisiológico da albumina para os seres humanos, bem como na função do fígado. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza a leitura do manual do kit de enzimas em seguida a coleta de sangue venoso de uma aluna voluntaria em tubo seco, devidamente identificados em seguida realizada a centrifugação para obtenção do soro. Seguida do preparo do kit de determinação enzimática com auxílio de micropipetas e feito a calibração do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: Figura 16: AMOSTRAS. Fonte: Autor, 2023. 19 Fonte: Autor, 2023. 18 Figura 15: ESPECTROFOTÔMETRO Tabela 4: ABSORBÂNCIA PROTEINAS TOTAIS. PROTEINAS TOTAIS ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1 BRANCO 0 PADRÃO 0,227 ABS. AMOSTRA 1 0,427 Fonte: Autor, 2023. 20 APOS CALCULO: RESULTADO: 7,524 g/dL Tabela 5: ABSORBÂNCIA ALBUMINA. ALBUMINA ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1 BRANCO 0 PADRÃO 0,385 ABS. AMOSTRA 1 0,614 Fonte: Autor, 2023. 21 RESULTADO APOS CALCULO: 4,94 g/dL RESULTADOS E DISCUSSÃO A relação da diminuição de proteinas totais e albumina no sangue com doenças hepatica, renais e hematologicas, já que doenças hepaticas prejudicam a produção de albumina. No exame realizado não apresentou alterações. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 3 AULA: 2 DATA DA AULA: 23/09/2023 DETERMINAÇÃO DE PROTEINAS TOTAIS E ALBUMINA NO SANGUE Objetivo: Relembrar a função renal e as substâncias que são reabsorvidas e excretadas pelos rins. Explicar por que a proteinúria (“urina espumosa”) é um marcador da doença renal, especificando a microalbuminúria e macroalbuminúria (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza coleta de amostra de urina em frasco simples por alunas voluntarias, em seguida cada urina foi transferida para um tubo diferente identificado e após 40 segundos da tira reagente na urina foi feita a comparação com os padões estabelecidos pelo fabricante: RESULTADO: NEGATIVO RESULTADOS E DISCUSSÃO O exame de urina tipo I é utilizado na identificação de alteraçoes no sistema urinario e renal. É realizado com base na primeira urina do dia por ser mais concentrada, possibilita a analise de pH, sedimentos. A tira reagente possibilita um resultado qualitativo possibilitando uma confirmação, estabelecimento de um diagnostico medico. *NÃO FOI POSSIVEL REALIZAR O EXAME DE ALBUMINA NA URINA POR FALTA DE FITA REAGENTE ESPECIFICA PORÉM REALIZADA ALBUMINA NO SAGUE DE ACORDO COM ROTEIRO ANTERIOR. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 1 AULA: 3 DATA DA AULA: 30/09/2023 DETERMINAÇÃO DE ACIDO URICO NO SANGUE Objetivo: Relembrar a fórmula geral dos nucleotídeos e das bases nitrogenadas. Explicar a Figura 18: AMOSTRA. Fonte: Autor, 2023. 23 Fonte: Autor, 2023. 22 Figura 17: LEITURA. importância da determinação do ácido úrico e suas implicações para a saúde dos seres humanos. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza a leitura do manual do kit de enzimas em seguida a coleta de sangue venoso de uma aluna voluntaria em tubo seco, devidamente identificado o preparo do kit de determinação enzimática com auxílio de micropipetas em seguida realizado banho- maria a 37º por 5 minutos. Seguida da calibração e adequação dos parâmetros do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: Figura 20: LEITURA DO KIT ENZIMATICO. Fonte: Autor, 2023. 25 Tabela 6: ABSORBÂNCIAS. ACÍDO URICO ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1 BRANCO 0 PADRÃO 0,144 ABS. AMOSTRA 1 0,103 Fonte: Autor, 2023. 26 APOS CALCULO: RESULTADO: 4,29 g/dL Fonte: Autor, 2023. 24 Figura 19: BANHO-MARIA RESULTADOS E DISCUSSÃO De acordo com os padões de normalidade, mulher 1,5 - 6 e homen 2,5 - 7 o resultado esta dentro da normalidade, Poré é nescessario sempre se atentar ao manual de intruções tanto do armazenamento, preparo em relação a pipetagem e contaminação que podem alterar e inviabilizar o resultado obtido. Altos niveis de acido urico geralmente são associados a doenças cardiacas, renais e diabetes. Por ser resultado da degradação de alimentos ricos em purinas quando ocorre um desequilibrio no organismo resulta em alto indices no sangue (hiperuricemia) seja pelo excesso de produção ou pela diminuição de excreção. Esse acumulo pode acumular-se nas articulações ocasionando a Gota. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 2 AULA: 3 DATA DA AULA: 30/09/2023 DETERMINAÇÃO DE ACÍDO URICO NA URINA Objetivo: Relembrar a função renal e o limiar de reabsorção renal para ácido úrico. Como a urina fica acumulada na bexiga, dependendo se a pessoa ingeriu muito ou pouco líquido, não reflete o ácido úrico sanguíneo no momento do teste. (UNIP, 2023) RESULTADOS E DISCUSSÃO Foi realiza coleta de amostra de urina em frasco simples por alunas voluntarias, em seguida cada urina foi transferida para um tubo diferente identificado e após 40 segundos da tira reagente na urina foi feita a comparação com os padões estabelecidos pelo fabricante: Figura 21: TESTE DE FITA REAGENTE. Fonte: Autor, 2023. 27 NÃO TINHA DISPONIVEL A FITA REAGENTE COM O PARAMETRO PARA ACIDO URICO NA URINA. RESULTADOS E DISCUSSÃO Altos niveis de acido urico geralmente são associados a doenças cardiacas, renais e diabetes. Por ser resultado da degradação de alimentos ricos em purinas quando ocorre um desequilibrio no organismo resulta em alto indices no sangue (hiperuricemia) seja pelo excesso de produção ou pela diminuição de excreção. Esse acumulo pode acumular-se nas articulações ocasionando a Gota. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 3 AULA: 3 DATA DA AULA: 30/09/2023 DETERMINAÇÃO DE BILIRRUBINAS NO SANGUE Objetivo: Quantificação das bilirrubinas total (BT), direta (BD) e indireta (BI) em amostra de soro. Correlacionar os valores obtidos com as patologias associadas ao predomínio de hiperbilirrubinemia direta e hiperbilirrubinemia indireta. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza a leitura do manual do kit de enzimas em seguida a coleta de sangue venoso de uma aluna voluntaria em tubo seco, devidamente identificado o preparo do kit de determinação enzimática com auxílio de micropipetas seguida da calibração e adequação dos parâmetros do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: Fonte: Autor, 2023. 28 Figura 22: KIT ENZIMAS BILIRRUBINA. Tabela 7: ABSORBÂNCIA DA BILIRRUBINA. ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1 PADRÃO 0,337 AMOSTRA 0,0163 Fonte: Autor, 2023. 29 RESULTADO APOS CALCULO: 4,84 DIRETA 0,474 RESULTADOS E DISCUSSÃO O aumento da bilirrubina direta pode estar relacionado com alteraçoes no figado ou vias biliares e até mesmo por doenças sem relação com o figado. Grande parte da bilirrubina é formada pela degradação do heme das hemoglobinas. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 1 AULA: 4 DATA DA AULA: 30/09/2023 DETERMINAÇÃO DE BILIRRUBINA EM AMOSTRA DE URINA Objetivo: Quantificação da bilirrubina em amostra de urina utilizando-se fita reagente de uroanálise. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza coleta de amostra de urina em frasco simples por alunas voluntarias, em seguida cada urina foi transferida para um tubo diferente identificado e após 40 segundos da tira reagente na urina foi feita a comparação com os padões estabelecidos pelo fabricante: Fonte: Autor, 2023. 30 Figura 23: DETERMINAÇÃO DE BILIRRUBINAS. RESULTADO : NEGATIVO RESULTADOS E DISCUSSÃO Na urina normal não esta presente a bilirrubina, quando ocorre a elevação dos niveis de bilirrubina conjulgada essa que são soluveis em agua são eliminadas na urina sugerindo uma alteração hepatica ou obstrução dos ductos biliares. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 2 AULA: 4 DATA DA AULA: 30/09/2023 DETERMINAÇÃO DE FERRO NO SANGUE Objetivo: Relembrar as funções, metabolismo e fontes alimentares do ferro. (UNIP, 2023) PROCEDIMENTO Foi realiza a leitura do manual do kit de enzimas em seguida a coleta de sangue venoso de uma aluna voluntaria em tubo seco, devidamente identificado o preparo do kit de determinação enzimática com auxílio de micropipetas em seguida realizado banho- maria a 37º por 10 minutos. Seguida da calibração e adequação dos parâmetros do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: Figura 25: KIT ENZIMATICO Fonte: Autor, 2023. 32 ABSORBANCIA TESTE 1: 0,148 ABSORBÂNCIA TESTE 2: 0,575 PADRÃO: 0,00169 Ab2 – Ab1 X 500 Ab. Padrão RESULTADO: 126,331 RESULTADOS E DISCUSSÃO Durante dialogalo sobre ferro serico entendeu-se que na anemia ferropriva ocorre niveis baixo da dosagem de ferro sérico além de ser utíl no diagnostico de anemias, hemacromatose e hemossiderose, podendo com altos niveis no figado acarretar cirrose, no pancreas diabetes e insuficiencia cardiaca se no coração além de problemas na produção hormonal. DESCRIÇÃO DOS RESULTADOS ROTEIRO: 3 AULA: 4 DATA DA AULA: 30/09/2023 DETERMINAÇÃO DE CALCIO NO SANGUE Objetivo: Relembrar as funções, metabolismo e fontes alimentares do cálcio. (UNIP, 2023) Fonte: Autor, 2023. 31 Figura 24: BANHO-MARIA PROCEDIMENTO Foi realiza a leitura do manual do kit de enzimas em seguida a coleta de sangue venoso de uma aluna voluntaria em tubo seco, devidamente identificado o preparo do kit de determinação enzimática com auxílio de micropipetas. Seguida da calibração e adequação dos parâmetros do espectrofotômetro resultando nos seguintes parâmetros: ABSORBÂNCIA AMOSTRA 1: 0,848 PADRÃO: 0,775 Abs. AMOSTRA X 10 PADRÃO RESULTADO: 10,94 RESULTADOS E DISCUSSÃO O resultado obtido esta dentro dos padrões de normalidade de niveis de calcio no sangue. Sendo o calcio importante para o funcionamento adequado de condução nervosa, contração muscular, coagulação do sangue e até a liberação de hormonios além de outros processos metabolicos A diminuição desses niveis pode ocasionar doenças realacionadas aos ossos como hipocalcemia, osteoporose, osteomalacia e tambem raquitismo, já em niveis elevados pode acaretar hipercalcemia e ser fatal. Figura 26: KIT ENZIMATICO CALCIO. Fonte: Autor, 2023. 33 Referências Silva, E. F. (2020). BIOQUIMICA METABÓLICA. São Paulo, SP. UNIP. (outubro de 2023). Roteiro Bioquimica Metabólica. bauru. UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP CURSO: BIOMEDICINA DISCIPLINA:BIOQUÍMICA METABÓLICA RA: 0603525 POLO DE PRÁTICA BAURU- POLO PRÓPIO 23/09/2023 ATIVIDADE OBRIGATÓRIA Referências
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