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I IMUNOHEMATOLOGIA IMUNOLOGIA A imunologia é o estudo das respostas do organismo que fornecem imunidade, ou seja, proteção às doenças. Ainda que o sistema componentes do sistema imune imune seja muito complexo, certos são facilmente detectados, como por exemplo os anticorpos. Sistema Imune Conjunto das barreiras físico, químicas e celulares do organismo com função de defesa. Infecção Invasão do organismo por um agente patogênico, geralmente microrganismos, como vírus, fungos e bactérias. Antígeno Antígeno é a substância que induz a formação de anticorpos, porque é reconhecida pelo sistema imune como non-self , são moleculas complexas, que em sua maioria contem polissacarideos e/ou lipossacarideos. Antígenos Os antígenos são substâncias que podem ser reconhecidas pelas células T, células B ou ambas através de receptores representados por anticorpo ou TCR (receptor de célula T). Antígeno completo ou imunógeno: é capaz de ativar uma resposta imune. Antígeno incompleto: não é capaz de ativar uma resposta imune. Anticorpo Anticorpos, ou imunoglobulinas, são glicoproteínas sintetizadas e excretadas por células plasmáticas (Linfocito B ativado – Plasmócitos). Imunidade Imunidade Inata/Natural Imunidade Adaptativa / Adquirida Imunidade Inata X Adquirida 1º linha de defesa; Não guarda memória; Reconhece através de alguns padrões moleculares. Imunidade Inata: Imunidade Adquirida: Demora alguns dias; Guarda memória; Imensa diversidade de receptores para antígenos altamente específico. IMUNIDADE INATA Barreiras naturais Pele Trato respiratório Trato digestivo Trato gênito-urinário Conjuntiva dos olhos Classes dos anticorpos envolvidos anticorpos estudados em Imuno- IgM, Em geral os hematologia observando-se são das classes IgG e a temperatura de reatividade, a presença de frações do complemento ativada e principalmente sua especificidade Anticorpos – Classificação de acordo com o estímulo Desenvolvidos por transfusão ou gravidez contra antígeno “não próprio”. Imunes ou Irregulares: Naturais ou Regulares: Desenvolvidos contra antígenos não presentes nos indivíduos pelo estímulo das bactérias que colonizam a flora intestinal, exemplo: Sistema ABO, produção de anti-A e anti-B. IgG Melhor temperatura de reatividade 37ºC Atravessa a placenta Liga-se ao complemento e destrói antígenos aos quais está ligada Presente nas respostas imunes secundárias. 80% das imunoglobulinas sérica IgM Anticorpo COMPLETO para aglutinação Melhor temperatura de reatividade 4º a 25ºC Não atravessa a placenta Ativa sistema complemento Resposta imune primária 5% do total de imunoglobulinas séricas Testes Imunohematológicos Os testes imunohematológicos para qualificação do doador devem ser realizados a cada doação, segundo critérios estabelecidos pelo Ministério da Saúde, sendo obrigatórios: - tipagem ABO; - tipagem Rh(D); e - pesquisa de anticorpos anti-eritrocitários irregulares (PAI) Nos protocolos do serviço de hemoterapia devem constar outros testes realizados nas amostras de sangue dos doadores, tais como fenotipagem para outros antígenos de sistemas eritrocitários adicionais, investigação de subgrupos de A1 e B e a identificação de anticorpos irregulares. Imunohematologia em doadores de sangue REALIZAÇÃO DE TIPAGEM ABO/RhD PAI (PESQUISA DE ANTICORPOS IRREGUALRES) FENOTIPAGEM DE DOADORES ( Rh (D, C, c, E, e) e Kell (K1) Anticorpos envolvidos ANTICORPOS PODEM SER: NATURAIS: Presente na maioria das pessoas com determinado grupo sanguíneo ABO (anti-A, anti-B, anti-AB). IRREGEGULARES: Aqueles que se desenvolvem após imunização (transfusão ou gestação). Os resultados da tipagem ABO são apresentados na tabela abaixo Grupo ABO Soro anti-A Soro anti-B Soro anti-AB Hemácias A1 Hemácias B A + - + - + + - + + + - + + - B AB + - O - + Existem 5 classes de anticorpos IgG, IgM, IgA, IgD e IgE CLASSES DOS ANTICORPOS ENVOLVIDOS Em geral os anticorpos estudados em Imuno- hematologia são da classe IgG e IgM, observando-se a temperatura de reatividade, a presença de frações do complemento ativada e principalmente sua especificidade HEMAGLUTINAÇÃO É a técnica mais comum utilizada para a demonstração da reação antígeno anticorpo A B AB RA RB P.A.I. Verifica a presença ou não de anticorpos irregulares no soro/ plasma do indivíduo. 26 Quando detectamos a presença de anticorpos irregulares Próximo passo: Identificar a especificidade do anticorpo Painel de hemácias Provas para a detecção de anticorpos irregulares Deve ser realizada nos doadores a pesquisa de anticorpos séricos irregulares, empregando-se métodos que evidenciem a presença de anticorpos clinicamente significativos. As unidades de sangue que contenham anticorpos irregulares devem ser rotuladas como tais. As condições e situações nas quais estes componentes podem ser utilizados ficarão a critério do responsável técnico de cada local, sendo porém recomendável que o plasma não seja utilizado para transfusão 1 3 4 5 6 7 8 9 10 11 2 Controle de qualidade em imunohematologia Os reativos devem ser armazenados de acordo com as instruções do fabricante, devendo ser evitada, ao máximo, a permanência do reativo fora das temperaturas indicadas para seu armazenamento. O serviço deve realizar controles de qualidade em cada lote recebido para comprovar que os reativos estão dentro dos padrões estabelecidos e que não foram alterados durante o transporte. Devem ser verificadas, periodicamente, possíveis alterações durante sua manipulação ou armazenamento no serviço de hemoterapia. - Controle de qualidade das técnicas empregadas Devem ser utilizados, sistematicamente, e durante o procedimento técnico, controles negativos e positivos, para confirmar os resultados obtidos FENOTIPAGEM ERITROCITÁRIA TIPAGEM RhD O controle da tipagem Rh(D) deve ser sempre efetuado em paralelo, utilizando-se soro-controle do mesmo fabricante. Se a reação com o soro-controle de Rh(D) for positiva, o hemocomponente só deve ser rotulado e liberado para uso após a resolução do problema. Quando a reação para a presença do antígeno Rh(D) resultar negativa, deve ser efetuada a pesquisa do antígeno D-fraco. Caso a pesquisa do antígeno D-fraco resultar positiva, a bolsa de sangue ou hemocomponente deve ser etiquetado como "Rh(D) positivo". EXPRESSÃO DO ANTÍGENO RhD Normal – antígeno D expressão normal D-fraco – antígeno D em menor expressão Del – antígeno D com expressão muito baixa Tipificação ABO O grupo ABO deve ser determinado testando-se vermelhos com reagentes anti-A, anti-B e anti-A,B. os glóbulos A tipagem reversa deve ser sempre realizada, testando-se o soro ou plasma com suspensão de glóbulos vermelhos conhecidos A1 e B e, opcionalmente, A2 e O. Uma unidade de sangue não deve ser liberada para utilização até que qualquer discrepância entre a tipagem direta e reversa tenha sido resolvida. Pesquisa de Subgrupo ser realizada a investigação de Recomenda-se subgrupo de A em doadores de sangue, quando houver resultados discrepantes entre as provas ABO direta e reversa ou na busca de concentrado de subgrupo A2 para pacientes que anticorpo anti-A1 clinicamente hemácias de apresentam significante. AUTOMAÇÃO OLYMPUS Sistema totalmente automatizado para teste ABO/Rh de sangue doado, o PK7200 também detecta D Fraco, assim como anticorpos irregulares Alimentadores integrados de rack que aceitam 120 amostras primárias Produtividade de até 240 amostras ou 2.880 resultados de teste por hora QWALYS - MICROPLACA TECHNO - CARTÃO Rotulagem do Sangue do Doador Dados a serem incluídos no rótulo dos hemocomponentes liberados para uso Temperatura adequada para a conservação; Data de vencimento do produto e, nos casosem que se aplique, o horário de vencimento. O horário do vencimento de componentes que não foram submetidos a manipulações em sistema aberto será sempre às 23h e 59min, do último dia de validade; O grupo ABO e Rh e o resultado da pesquisa de anticorpos irregulares, quando esta for positiva, de preferência com o nome do anticorpo identificado; O resultado dos testes não reagentes para triagem de doenças infecciosas; OBRIGADO!
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