LABORATORIO GENET PCR

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RELATÓRIO DE PRÁTICA VIRTUAL
	IDENTIFICAÇÃO
	1. Acadêmico: ERICA BERNARDINO DA SILVA
	2. Matrícula: 3340940333333333333333409403333/ 33340940 3340940 40940 
	3. Curso: BIOMEDICINAiomedicina 
	4. Turma: FLC8739BBI
	5. Disciplina: GENÉTICA HUMANA E MEDICA
	6. Tutor externo: LARISSA
	DADOS DA PRÁTICA
	1. Título: PCR
	2. Semestre: 5
	3. Data: 14/03/23 PRATICA III
	INTRODUÇÃO
	A técnica clássica utilizada nesse processo envolve a indução da divisão celular em uma cultura de células, seguida pela interrupção do processo durante a metáfase, provocada pelo tratamento com um inibidor da formação do fuso mitótico que separaria as cromátides irmãs. Na sequência, ocorre a fixação e coloração dos cromossomos com técnica específica (bandeamento), e a posterior visualização microscópica, fotografia e organização padronizada dos cromossomos, 
	OBJETIVOS
		Neste experimento, realizará a técnica de reação da transcriptase reversa (RT – reverse transcriptase) seguida da reação em cadeia da polimerase (PCR – polymerase chain reaction), entendendo o procedimento da reação. 
	MATERIAIS
	 • Jaleco; • Luvas; • Máscara; • Óculos; • Tubo Eppendorf; • Tubo Eppendorf contendo amostra de RNA; • Oligo Dt; • dNTP; • Buffer RT; • DTT; • RNAse inibidor; • Transcriptase reversa; • Termociclador; • Buffer amplificação 10x; • Primer F; • Primer R; • Taq DNA polimerase; • Água ultrapura; • Micropipeta; • Ponteira. 
	METODOLOGIA
	Mix de mistura 
pegar 5µL de buf e colocar no ependorf trocar a ponteira,colocar 2,5µL de cloreto de magnesio e colocar no mesmo trocar ponteira,colocar 0,5µL de prime Fna mesma amostra trocar a ponteira,colocar0,5µL de prime R e colocar na mesma amostra,colocar 8µLde DNTP(nucleotideos)e colocar na mesma amostra e trocar a ponteira,colocar 0,5µL TaqDNApolimerase e colocar no mesmo e trocar a ponteira,colocar 5µL da amostra de DNA colocar no mesmo e trocar a ponteira,mistura e pipetar 28µLdo ependorf e colocar em um tubo e levar para o termociclador que vai acontecer as mudancas de temperaturas.
Cadastro no aparelho
1 file
2 test
3 open 
4 editar
timer 11minutos
temp/c 95
ciclo 1 vez
salva
timer 1 minuto
temp/c 94
ciclo 28 vezes
salvar
timer 1 minuto
temp/c 59
ciclo 1 vez
timer 1 minuto
temp/c 72
ciclo 1 vez
HOT 1
tubo
50 µL 
salvar
conferir
run
processo dura 1 h e 14 minutos
	RESULTADOS E DISCUSSÕES
	
O resultado sai depois de 28 repeticoes nas 3 temperaturas 
Qual a diferença do RT-PCR para um PCR convencional? 
RT-PCRé uma variação da técnica de PCR, a qual permite que a amplificação e detecção ocorram simultaneamente. O resultado é visualizado em Tempo Real durante a amplificação da sequência de interesse, com capacidade ainda de gerar resultados quantitativos com maior precisão 
PCR convencional Consiste na replicação de sequências específicas de DNA utilizando equipamentos termocicladores 
2. O que são os dNTPs?
são nucleotídeos do DNA formados por: Uma base azotada (Adenina, Citosina, Guanina e Timina), um açúcar (desoxirribose) e 3 grupos fosfato. 
3. Explique como ocorre a ação da trancripitase reversa e da Taq DNA polimerase?
trancripitase reversa A transcrição é o processo pelo qual uma molécula de RNA é formada, utilizando como molde uma das fitas do DNA. Para que os genes consigam se expressar, é necessário que uma molécula de RNA seja formada a partir de uma molécula de DNA. Esse processo recebe o nome de transcrição, e sua enzima chave é a RNA polimerase. 
TAQ possibilita a síntese de fragmentos de DNA, usando a enzima DNA-polimerase, a mesma que participa da replicação do material genético nas células 
	REGISTRO FOTOGRÁFICO
	REFERÊNCIAS
	Laboratório virtual
	
	REFERÊNCIAS
	Laboratório virtual