Relatório prática - MICROBIOLOGIA E PARASITOLOGIA

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RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS 
ENSINO DIGITAL 
	
RELATÓRIO 02
	
	
	DATA:
______/______/______
RELATÓRIO DE PRÁTICA
Sara Lima Oliveira
01632333
RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS: Microbiologia e Parasitologia
DADOS DO(A) ALUNO(A):
	NOME:Sara Lima Oliveira
	MATRÍCULA:01632333
	CURSO:Nutrição 
	POLO:Tauá 
	PROFESSOR(A) ORIENTADOR(A):
		TEMA DE AULA: 
PREPARAÇÃO E ESTERILIZAÇÃO DE MATERIAIS UTILIZADOS NA MICROBIOLOGIA 
CLASSIFICAÇÃO, COMPOSIÇÃO QUÍMICA E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA
RELATÓRIO:
1. PREPARAÇÃO E ESTERILIZAÇÃO DE MATERIAIS UTILIZADOS NA MICROBIOLOGIA 
A. Dentre os procedimentos utilizados na preparação de materiais utilizados na microbiologia, qual a importância no tamponamento dos tubos de ensaio e dos Erlenmeyer com algodão hidrofóbico?
O uso de algodão hidrofóbico é fundamental para garantir a confiabilidade dos resultados e a segurança no laboratório microbiológico. A importância do tamponamento dos tubos de ensaio e dos Erlenmeyer com algodão hidrofóbico na microbiologia reside em:
· Prevenção de contaminação: O algodão hidrofóbico atua como uma barreira física, evitando a entrada de contaminantes externos nos recipientes, garantindo a integridade das amostras microbiológicas.
· Manutenção do ambiente ideal: O algodão ajuda a manter o ambiente interno do recipiente estável, preservando as condições necessárias para o crescimento e cultivo das culturas microbiológicas.
· Segurança: Além de proteger as amostras, o algodão também contribui para a segurança dos operadores, evitando o vazamento de líquidos ou aerossóis potencialmente perigosos.
B. Qual material é utilizado para embalagem dos materiais que serão submetidos a processos de esterilização via estufa ou autoclave?
O papel grau cirúrgico é o material mais usado nos CME's para embalagem de produtos a esterilizar na autoclave, e um dos elos da corrente de proteção dos profissionais e pacientes
C. Adicione uma ou mais fotos da preparação de materiais utilizados no laboratório de microbiologia.
Schistosoma mansoni
Schistosoma cercaria
Miracidio
Esquistossomose
Esquistossomose mansoni
D. Descreva o fundamento da técnica de esterilização de autoclavação, e porque alguns meios de cultura não podem ser autoclavados
A autoclavação é uma técnica de esterilização que utiliza calor úmido em alta pressão para eliminar microrganismos e esporos bacterianos. É eficaz para a maioria dos equipamentos, vidrarias e meios de cultura de microbiologia, mas a escolha da técnica de esterilização depende das características específicas dos meios de cultura e dos componentes envolvidos. 
Alguns materiais sensíveis ao calor e à pressão podem não ser adequados para autoclavação e requerem métodos alternativos, como a filtração esterilizante. Nos fundamentos da autoclavação temos:
· Calor: Ele é usado para a destruição de microrganismos, incluindo bactérias, vírus e esporos. Pressão, que permite que a temperatura de ebulição da água seja elevada acima de 100 graus Celsius. Esse aumento na temperatura é fundamental para a eficácia da esterilização, pois a água fervente a temperaturas mais baixas pode não ser suficiente para eliminar todos os microrganismos e esporos. 
· Tempo: O tempo de exposição pode variar, mas é geralmente de 15 a 30 minutos após a temperatura e pressão desejadas serem alcançadas. 
A autoclavação se baseia em princípios físicos e químicos, como o uso de calor para danificar proteínas e ácidos nucleicos dos microrganismos, pressão elevada para elevar a temperatura de ebulição da água e tempo de exposição suficiente para garantir a destruição completa dos microrganismos. 
Alguns exemplos de meios de cultura que não podem ser autoclavados incluem os que contêm substâncias termossensíveis, produzem substâncias voláteis ou possuem agar, que só pode ser esterilizado separadamente. Em tais casos, a filtração esterilizante é preferível para manter a integridade dos componentes.
2. CLASSIFICAÇÃO, COMPOSIÇÃO QUÍMICA E PREPARAÇÃO DE MEIOS DE CULTURA
A. Quanto a composição química como podemos classificar meios de cultura? 
Os meios de cultura podem ser definidos ou complexos, dependendo da composição química. 
· Os meios definidos têm composição conhecida e são usados para microrganismos que precisam de nutrientes específicos. Exemplos incluem o meio de cultura mínimo de Davis. 
· Os meios complexos têm composição desconhecida e são usados para microrganismos com necessidades nutricionais variadas.
Exemplos incluem caldo de carne e extrato de levedura. A escolha do meio de cultura influencia no crescimento e qualidade dos microrganismos, sendo importante selecionar o melhor meio para cada situação.
B. De acordo com os tipos de meios de cultura, no que diferem os meios sólidos, semissólidos e líquidos? 
Os meios de cultura sólidos, semissólidos e líquidos são diferentes na consistência física e na capacidade de suportar o crescimento microbiano. 
· Meios sólidos tem consistência firme, geralmente agar e oferecem uma superfície tridimensional para o crescimento, permitem a formação de colônias visíveis e isoladas, facilitando a identificação e o estudo das características microbianas.;
· Meios semissólidos tem consistência gelatinosa devido a adição de um agente gelificante como gelatina ou agar em concentrações mais baixas, e permitem a difusão limitada. Possui a capacidade intermediária de suportar o crescimento microbiano e são usados, por exemplo, para testar a motilidade bacteriana;
· Meios líquidos tem consistência fluida e não contem agentes gelificantes e permitem uma dispersão homogênea dos microrganismos.
C. Adicione uma ou mais fotos das etapas de preparo do meio de cultura.
Pesagem 
D. Descreva como deve ser feito o cálculo da pesagem do meio de cultura. E quais consequências são geradas por erro nesse cálculo na utilização desse meio?
O cálculo da pesagem do meio de cultura deve ser feito com precisão, seguindo as instruções fornecidas no protocolo. Ao preparar um meio de cultura, é essencial seguir as instruções fornecidas no protocolo, incluindo a quantidade precisa de cada componente a ser pesado. A balança utilizada deve estar calibrada para garantir precisão nas medições.
Erros nesse cálculo podem levar a variações na composição do meio, afetando o crescimento e a viabilidade dos microrganismos. Se houver um erro no cálculo da pesagem, os meios de cultura podem ter composições inadequadas. Isso pode levar a uma variedade de problemas, como falta de nutrientes essenciais para o crescimento microbiano, excesso de certos componentes que podem ser tóxicos e variação no pH do meio, afetando a seleção e o crescimento dos microrganismos. Erros no cálculo da pesagem podem levar a variações nos resultados experimentais, tornando difícil replicar os experimentos com precisão e podem levar a problemas de controle de qualidade, afetando a confiabilidade dos produtos fornecidos aos pesquisadores e profissionais da área de microbiologia. Em experimentos microbiológicos, a consistência nos meios de cultura é crucial para obter resultados confiáveis. Laboratórios e empresas que produzem meios de cultura geralmente têm protocolos rigorosos para garantir a precisão na preparação dos meios.
	TEMA DE AULA: 
TÉCNICAS ASSÉPTICAS DE ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS
COLORAÇÃO DE DIFERENCIAL DE GRAM 
RELATÓRIO:
1. TÉCNICAS ASSÉPTICAS DE ISOLAMENTO DE BACTÉRIAS
A. O que é zona de esterilidade e qual sua importância para o manuseio de materiais microbiológicos?
A zona de esterilidade é um espaço onde todos os microorganismos foram mortos ou removidos, sendo essencial para evitar contaminação de materiais microbiológicos. A importância reside no controle de contaminação e na prevenção da integridade dos experimentos.
· Prevenção de contaminação: Garante que os materiais não estejam contaminados por microrganismos indesejados que comprometam os resultados.
· integridade dos experimentos: Manter a zona de esterilidade assegura a validade dos experimentos microbiológicos,uma vez que os resultados não serão influenciados por contaminantes.
· Segurança: Evita a propagação de agentes patogênicos que podem ser prejudiciais à saúde humana.
Para criar uma zona de esterilidade, são usados métodos como autoclavagem, radiação UV, filtragem por membranas, desinfetantes químicos e capelas de fluxo laminar.
Essas técnicas eliminam ou reduzem os micro-organismos presentes no ambiente, ou nos materiais, mantendo a pureza dos experimentos microbiológicos e garantindo a confiabilidade dos resultados.
B. Cite as principais técnicas utilizadas para realização de semeio bacteriano?
Principais técnicas utilizadas para realização de semeio bacteriano incluem a técnica de disseminação em placa, a técnica de estrias e a técnica de semeadura por picada.
· A técnica de disseminação em placa é uma das principais abordagens utilizadas para o semeio bacteriano. Nesse método, uma amostra bacteriana é diluída em série e uma alíquota da diluição é espalhada uniformemente sobre a superfície de uma placa de agar. Isso permite que as bactérias se desenvolvam em colônias individuais que podem ser facilmente contadas e isoladas para estudo posterior. 
· A técnica de estrias é outra técnica comum. Nesse processo, uma alça de inoculação é utilizada para transferir uma pequena quantidade de cultura bacteriana em uma placa de agar, e então a alça é usada para estriar a cultura em setores específicos da placa. Isso permite o isolamento de diferentes cepas bacterianas em áreas distintas da placa. 
· A técnica de semeadura por picada envolve a inserção de uma alça de inoculação diretamente na cultura bacteriana e, em seguida, picando a placa de agar com a alça. Isso resulta na formação de pequenos orifícios na placa onde as bactérias foram inseridas, permitindo o crescimento de colônias bacterianas isoladas.
C. Qual o objetivo da técnica de semeio por esgotamento? Por que a mesma é comumente utilizada nas análises clínicas?
A técnica de semeio por esgotamento é utilizada nas análises clínicas com o objetivo de obter colônias puras de microrganismos presentes em uma amostra, facilitando a identificação e o estudo de cada microrganismo. Essa técnica permite a contagem de microrganismos e auxilia no diagnóstico de doenças infecciosas. É uma das técnicas utilizadas nas análises clínicas para obter colônias puras de microrganismos presentes em uma amostra.
O objetivo principal dessa técnica é isolar e identificar os microrganismos presentes em uma amostra, permitindo a realização de testes e análises específicas para cada tipo de microrganismo.
Essa técnica é comumente utilizada nas análises clínicas devido à sua eficácia na obtenção de colônias puras. Ao semear a amostra em um meio de cultura sólido, como uma placa de Petri contendo ágar, e realizar o processo de esgotamento, é possível diluir a amostra e garantir que cada colônia que se desenvolva seja originada de um único microrganismo. Isso facilita a identificação e o estudo das características de cada microrganismo presente na amostra. Além disso, a técnica de semeio por esgotamento também permite a contagem de microrganismos presentes em uma amostra, uma vez que cada colônia representa uma unidade formadora de colônia. Essa informação é importante para avaliar a quantidade de microrganismos presentes em uma amostra e auxiliar no diagnóstico de doenças infecciosas.
D. Como visualmente pode-se identificar que um semeio bacteriano apresenta apenas um tipo de bactéria isolada?
A identificação visual de um semeio bacteriano com apenas um tipo de bactéria isolada baseia-se na análise macroscópica das características das colônias, como cor, tamanho, forma e textura, complementada por uma confirmação microscópica para garantir a pureza do cultivo. Essa abordagem visual é crucial em microbiologia para garantir resultados confiáveis em experimentos e pesquisas.
Cor Uniforme: Se todas as colônias bacterianas apresentam a mesma cor, isso sugere homogeneidade, indicando a presença de uma única espécie bacteriana. Diferentes espécies bacterianas podem ter características de cor específicas quando cultivadas em meios apropriados. A uniformidade indica a ausência de contaminação por diferentes cepas.
Tamanho Homogêneo: Colônias bacterianas de tamanho semelhante são indicativas de pureza no semeio. Diferentes espécies bacterianas podem formar colônias com características distintas de tamanho. A uniformidade sugere que apenas uma cepa está presente.
· Forma Consistente: A forma das colônias é um indicativo visual de pureza. Cada espécie bacteriana pode formar colônias com uma forma característica. A consistência na forma sugere a presença de um único tipo bacteriano.
· Textura Uniforme: A análise da textura das colônias reforça a homogeneidade. A textura, como rugosidade ou lisura, pode variar entre espécies bacterianas. Uma textura uniforme aponta para a presença de uma única cepa.
· Exame Microscópico Confirmatório: Um exame microscópico pode confirmar a pureza do semeio bacteriano. A observação microscópica das células bacterianas revela características morfológicas específicas de uma determinada espécie. A ausência de variedade microscópica reforça a conclusão de um semeio puro.
2. COLORAÇÃO DE DIFERENCIAL DE GRAM 
A. Qual o fundamento da coloração de Gram que permite a separação das bactérias em dois grandes grupos?
Em suma, o procedimento de coloração de Gram permite que as bactérias retenham a cor com base nas diferenças nas propriedades químicas e físicas da parede celular.
B. Geralmente quais formas bacterianas são classificadas como Gram positivas e quais são classificadas como Gram-negativas?
As bactérias Gram-positivas possuem uma parede celular espessa composta principalmente por peptidoglicano e uma camada de ácido teicoico, e aparecem roxas quando coradas com o método de Gram. Exemplos incluem o gênero Streptococcus e Staphylococcus. As bactérias Gram-negativas possuem uma parede celular mais fina, uma camada externa de lipopolissacarídeo e uma camada de peptidoglicano, e aparecem vermelhas quando coradas com o método de Gram. Exemplos incluem o gênero Escherichia e Pseudomonas.
C. Adicione uma foto ou mais da realização da coloração de Gram ou da leitura microscópica da lâmina.
D. Qual a importância da coloração de Gram na rotina clínica no laboratório de microbiologia?
A coloração de Gram é um passo muito importante na caracterização e classificação inicial das bactérias. Afinal, esse método de coloração permite que as bactérias sejam visualizadas no microscópio óptico, uma vez que sem a coloração é impossível observá-las ou identificar sua estrutura.
		TEMA DE AULA: OBSERVAÇÃO DE LÂMINAS DE Schistosoma mansoni E PROTOZOÁRIOS 
RELATÓRIO:
1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINAS DE CERCARIAS E OVOS DE Schistosoma mansoni
1. Como o ser humano é contaminado pela forma infectante (cercarias) e contrai a esquistossomose?
A esquistossomose é uma doença causada pela infecção com cercárias, que são larvas do parasita Schistosoma. As cercárias penetram na pele humana quando uma pessoa entra em contato com água doce contaminada por fezes ou urina contendo os ovos do parasita.
1. Visto ao microscópio óptico, o ovo pode ser reconhecido pela presença de qual estrutura morfológica?
A estrutura morfológica que permite reconhecer o ovo ao microscópio óptico é a zona pelúcida, que é uma camada extracelular presente ao redor do oócito, ela tem uma aparência clara e brilhante e é visível como uma espessa camada ao redor da célula. Essa camada é composta principalmente por glicoproteínas, que ajudam a proteger o oócito e a regular a entrada de espermatozoides durante a fertilização. Além da zona pelúcida, o oócito também possui outras estruturas morfológicas visíveis ao microscópio óptico, como o núcleo, o citoplasma e os grânulos corticais. No entanto, a zona pelúcida é a estrutura mais proeminente e distintiva vista ao microscópio óptico.
1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE CISTOS DE Entamoeba histolytica
A. Descrever a característica morfológica que permite a diferenciaçãoentre os cistos da Entamoeba histolytica da Entamoeba coli
Os cistos da Entamoeba histolyitica e da Entamoeba coli, são duas espécies de protozoários que podem ser encontradas nas fezes humanas, eles podem ser diferenciados pela análise do tamanho, núcleo, cromatina e presença de hialoplasma. Os cistos da Entamoeba histolytica são menores, possuem núcleo central, cromatina densa e uniforme, e hialoplasma mais evidente. Já os cistos Entamoeba coli são maiores, possuem núcleo excêntrico, cromatina dispersa e granular, e hialoplasma menos evidente. Apesar de serem semelhantes morfologicamente, existem características que permitem diferenciá-los.
· Tamanho: Os cistos da Entamoeba histolytica são geralmente menores, com cerca de 10 a 20 micrômetros de diâmetro, enquanto os cistos da Entamoeba coli são maiores, com cerca de 20 a 30 micrômetros de diâmetro.
· Núcleo: Os cistos da Entamoeba histolytica possuem um núcleo central, que geralmente é pequeno e compacto. Já os cistos da Entamoeba coli possuem um núcleo excêntrico, ou seja, localizado fora do centro do cisto.
· Cromatina: A cromatina, que é o material genético presente no núcleo, também apresenta diferenças entre as duas espécies. Nos cistos da Entamoeba histolytica, a cromatina é mais densa e uniforme, enquanto nos cistos da Entamoeba coli, a cromatina é mais dispersa e granular.
· Presença de hialoplasma: O hialoplasma é uma região clara e homogênea presente no citoplasma dos cistos. Nos cistos da Entamoeba histolytica, o hialoplasma é mais evidente e pode apresentar grânulos, enquanto nos cistos da Entamoeba coli, o hialoplasma é menos evidente e geralmente não apresenta grânulos
Portanto, a análise do tamanho, núcleo, cromatina e presença de hialoplasma nos cistos permite diferenciar a Entamoeba histolytica da Entamoeba coli. É importante ressaltar que a identificação correta dessas espécies é fundamental para o diagnóstico e tratamento adequado das doenças causadas por elas.
1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE TROFOZOITO DE Giardia lamblia.
A. Cite qual estrutura permite a fixação do trofozoíto da Giardia lamblia no intestino humano.
Para se fixar no intestino humano, o trofozoíto da Giardia lamblia utiliza uma estrutura especializada chamada de disco de sucção.
O disco de sucção é uma estrutura em forma de ventosa localizada na parte anterior do trofozoíto. Ele é composto por uma série de microvilosidades que se projetam da superfície do parasita. Essas microvilosidades permitem que a Giardia lamblia se fixe nas células do epitélio intestinal, garantindo sua aderência e evitando que seja facilmente eliminada do intestino. Além do disco de sucção, a Giardia lamblia também possui dois núcleos, quatro pares de flagelos e um corpo em forma de pera. Essas características são importantes para a sua sobrevivência e reprodução no intestino humano.
1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE Leishmania sp.
A. Quais características morfológicas permitem a diferenciação das firmas evolutivas amastigota e promastigotas?
As formas evolutivas amastigota e promastigota são estágios de desenvolvimento de protozoários pertencentes ao gênero Leishmania, que causam a doença leishmaniose. As principais características morfológicas que permitem a diferenciação entre amastigotas e promastigotas são: 
Amastigotas:
· São a forma intracelular do parasita.
· Possuem um corpo arredondado ou oval.
· Não possuem flagelo.
· São encontradas dentro das células hospedeiras, como macrófagos.
Promastigotas:
· São a forma extracelular do parasita, encontradas no vetor (geralmente uma espécie de mosquito do gênero Phlebotomus).
· Possuem um corpo alongado.
· Possuem um flagelo que se estende desde a extremidade anterior do corpo.
· São móveis e se movem através do movimento do flagelo.
· Essas características são fundamentais para distinguir esses dois estágios evolutivos das leishmanias.
1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE TROFOZOITO DE Trichomonas vaginalis
A. Quais as estruturas substituem as mitocôndrias no trofozoíto de Trichomonas vaginalis?
No trofozoito dе Trichomonas vaginalis, as mitocondrias são substituídas por еstruturas conhecidas como hidrogеnossomas. Estеs organеlos são rеsponsávеis pеla produção dе energia na ausência dе mitocondrias.
Os hidrogеnossomas são organеlas quе atuam na gеração dе еnеrgia еm alguns organismos anaеróbicos, como o Trichomonas vaginalis. Elеs rеalizam uma forma dе mеtabolismo anaeróbio quе ajuda na adaptação do parasita ao ambiеntе dе baixo oxigênio da vagina humana.
Essas organelas são essenciais para a sobrevivência е virulência do parasita, compensando a falta de mitocôndrias
1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE EPIMASTIGOTA DE Trypanosoma cruzi
A. Descrever as diferenças morfológicas entre as formas evolutivas amastigota, epimastigota e tripomastigota de Trypanosoma cruzi, citando em qual hospedeiro elas são encontradas. 
Trypanosoma cruzu é um protozoário parasita responsável pela doença de Chagas, uma doença tropical endêmica em algumas regiões da América Latina. Ele é transmitido principalmente por insetos vetores, conhecidos como barbeiros, mas também pode ser transmitido por transfusão de sangue, transplante de órgãos e da mãe para o feto durante a gravidez. O parasita apresenta diferentes formas evolutivas, incluindo amastigota, epimastigota e tripomastigota, cada uma adaptada a diferentes fases do seu ciclo de vida complexo e que ocorrem em diferentes hospedeiros, incluindo insetos, mamíferos e humanos.
· Amastigota: é a forma intracelular e arredondada do parasita, sem flagelo, encontrada no interior de células de mamíferos;
· Epimastigota: é a forma intermediária, encontrada no tubo digestivo dos vetores transmissores da doença, como os barbeiros;
· Tripomastigota: é a forma infectante do parasita, encontrada no sangue de mamíferos infectados, incluindo humanos.
1. OBSERVAÇÃO DE LÂMINA DE TAQUIZOITO DE Toxoplasma gondii
A. Em que fase do ciclo evolutivo do Toxoplasma gondii, estão presentes os taquizoítos. E como eles podem infectar o ser humano?
A toxoplasmose é uma doença causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. Este parasita infecta a maior parte das espécies endotérmicas, o que inclui os seres humano e os seus hospedeiros definitivos são os membros da família Felidae. Com base nas formas evolutivas do T. Gondii, algumas características deste protozoário:
· A forma evolutiva de trofozoíto ocorre na infeção aguda;
· Os oocistos são resultados do ciclo assexuado do parasita que ocorre no epitélio gastrointestinal do humano;
· Nos cistos teciduais, a forma evolutiva encontrada são os bradizoítos;
· Trofozoítos podem se disseminar pela corrente sanguínea e sistema linfático para outros tecidos do hospedeiro infectado
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