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Bioquímica Thatielly Samora Araujo 1 EFEITOS DE TAMPÕES E INDICADORES DE pH EM SOLUÇÕES ÁCIDAS E BÁSICAS OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática foi caracterizar soluções ácidas e básicas pelo emprego de indicador de pH e compreender o funcionamento de um sistema tampão. METODOLOGIA Procedimento 1: Preparo do indicador ácido-base a partir do repolho roxo. 1. Separe 4 a 5 folhas do repolho roxo e pique em pedaços pequenos. 2. Adicione em uma panela com água até cobrir todo o material e deixe ferver. 3. Após a fervura desligue o fogo e passe o conteúdo em uma peneira. Reserve a parte líquida. 4. O seu extrato está pronto! Indicador ácido-base 2 EFEITOS DE TAMPÕES E INDICADORES DE pH EM SOLUÇÕES ÁCIDAS E BÁSICAS Procedimento 2: Testando o indicador ácido-base com o vinagre e a água sanitária. Para avaliar como o indicador se comporta diante de substâncias ácidas e básicas, vamos colocá-lo em contato com o vinagre (ácido) e com a água sanitária (base). Também é interessante avaliar o comportamento em uma solução neutra, e para isso, utilizaremos a água. 1. Identifique três copos ou recipientes transparentes, sendo um para o vinagre, outro para a água sanitária e outro para água; 2. Preencha pelo menos 1/3 do volume dos copos com seus respectivos produtos, em um copo o vinagre, no outro copo a água sanitária e no outro copo a água; 3. Com o auxílio de um conta gotas ou seringa adicione cerca de 10 gotas do indicador ácido-base em cada um dos copos e observe a mudança de cor na solução. Reserve os copos, pois serão utilizados na próxima etapa; 4. Registre através de fotos e da descrição da mudança de cor; 5. Associe a propriedade ácida ou básica das soluções com a cor observada. Procedimento 3: Avaliando a capacidade tampão dos comprimidos efervescentes. 1. Em um recipiente transparente com aproximadamente 100 mL de água, adicione 30 gotas de extrato de repolho e dissolva um comprimido antiácido efervescente; 2. Depois que o comprimido dissolver completamente, adicione água sanitária lentamente utilizando uma seringa. Anote a quantidade de água sanitária utilizada para mudar o pH do meio para verde; 3. Observe que a mudança de cor inicia pelo fundo, pois é onde a água sanitária deposita-se. Portanto, devemos agitar a solução a medida que vamos adicionando a água sanitária. 4. Para finalizar, adicione água sanitária ao copo contendo vinagre utilizado no procedimento anterior até verificar a mudança de cor. Anote a quantidade utilizada. 5. Registre através de fotos. 6. Descreva detalhadamente as mudanças observadas no pH do meio através da mudança de cor, apresentando a quantidade de base (água sanitária) que foi necessária para mudar o pH do meio. 7. Explique as observações utilizando o princípio de soluções tampões. 3 RESULTADOS E DISCUSSÃO Insira as fotos de cada passo realizado. Adicione uma descrição detalhada, no formato de texto, sobre as mudanças observadas no pH do meio através da mudança de cor. Compare a cor antes e após a adição de reagentes (procedimento 2 e 3). Relacione os resultados com as propriedades de ácidos e bases, e os princípios da escala e de indicadores de pH. Descreva o volume de água sanitária foi necessário para mudar a coloração do meio contendo antiácido e vinagre (procedimento 3). Relacione esses resultados com os princípios de solução tampão. EFEITOS DE TAMPÕES E INDICADORES DE pH EM SOLUÇÕES ÁCIDAS E BÁSICAS RESULTADOS E DISCUSSÃO É possível notar que a pós adicionar o indicador, houve mudança de cor, que de a cordo com a escala de indicadores de pH mostra que o rosado é ácido, o esverdeado tem um leve ácido e a água neutro. Vinagre DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS CONCLUSÕES Solução tampão é uma solução aquosa capaz de resistir a mudanças de pH quando ácidos ou bases são adicionados. Tampões são formados pela mistura de ácidos fracos e suas bases conjugadas em uma solução de pH próximo ao pKa do ácido. Alternativamente, podem ser formados por uma base fraca e seu ácido conjugado. A capacidade tamponante de um sistema tampão depende da concentração dos seus componentes. Sistemas tampões sã o extremamente importantes e m fluidos biológicos , tendo também grande importância e m diversas áreas da industria, já que o grau de ionização pode afetar a estabilidade de moléculas e consequentemente suas funções. EFEITOS DE TAMPÕES E INDICADORES DE pH EM SOLUÇÕES ÁCIDAS E BÁSICAS DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS OBJETIVO O objetivo dessa atividade prática é observar os efeitos da desnaturação de proteínas por agentes físicos e químicos e compreender como isso implica na perda da estrutura e função. METODOLOGIA Procedimento 1: desnaturação por mudança no pH Preparar um copo de leite; Adicionar meio copo de suco de limão ao leite e homogeneizar. Em seguida, deixar em repouso; Aguarde de 5 a 10 minutos e observe as alterações ocorridas; Registre através de fotos; Descreva detalhadamente as mudanças nas características físicas do ovo. Leite com limão 7 DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS Procedimento 2: desnaturação por solvente Em recipiente raso ou um prato, quebre um ovo com cuidado para manter a gema intacta; A seguir, adicione cerca de meio copo de álcool (preferencialmente 70 a 100%); Aguarde de 5 a 10 minutos e observe as alterações ocorridas no ovo; Registre através de fotos; Descreva detalhadamente as mudanças nas características físicas do ovo. Procedimento 3: desnaturação por calor Colocar um ovo inteiro em uma panela com água suficiente para cobrir o ovo. Ferver a água com o ovo por aproximadamente 8 minutos. Desligue o fogo e aguarde esfriar. Depois de frio, abra a casca do ovo e observe as alterações ocorridas no ovo. Registre através de fotos. Descreva detalhadamente as mudanças nas características físicas do ovo. Desnaturação com álcool Desnaturação por fonte de calor 8 DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS RESULTADOS E DISCUSSÃO Caro discente, para o relatório desta prática você deverá: A) Registrar através de fotos e descrever no formato de texto as alterações físicas observadas no ovo para cada etapa da atividade prática: - Procedimento 1: ovo em contato com limão; - Procedimento 1: ovo em contato com álcool; - Procedimento 3: ovo em contato com uma fonte de calor. DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS RESULTADOS E DISCUSSÃO B) Explicar a correlação entre as alterações e o provável processo ocorrido, ressaltando qual proteína está envolvida em cada uma das situações: - Procedimento 1: ovo em contato com limão; - Procedimento 1: ovo em contato com álcool; - Procedimento 3: ovo em contato com uma fonte de calor. C) Pontuar as limitações encontradas no desenvolver da atividade prática. RESULTADOS E DISCUSSÃO Procedimento 1: ovo em contato com limão; O limão deixou o leite, com uma textura grossa parecendo que talhou. Procedimento 2: ovo em contato com álcool; Ao adicionar o álcool no ovo a clara ficou se tornou branca. Procedimento 3: ovo em contato com uma fonte de calor. Ao cozinhar o ovo, a clara ficou branca, pois a proteína se desnaturalizou com a fonte de calor B) Procedimento 1: ovo em contato com limão; Ao colocar o limão no leite e ele talhou, pois o ácido abaixa o pH e torna a proteína do leite mais ácida. Procedimento 2: ovo em contato com álcool; O álcool atua na proteína da clara do ovo, causando desnaturação e deixando-a branca. Procedimento 3: ovo em contato com uma fonte de calor. Cozinhando o ovo, nota-se muda a forma da proteína. C)Não houve limitações DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS CONCLUSÕES Desnaturação é um processo que se dá em moléculas biológicas, principalmente nas proteínas, expostas a condições diferentes àquelas em que foram produzidas, como variações de temperatura, mudanças de pH, força iônica, entre outras. A desnaturação ocorre quando a proteína perde sua estrutura secundária e/ou terciária, ou seja, o arranjo tridimensional da cadeia polipeptídica é rompido, fazendo com que, quase sempre, perca sua atividade biológica característica.O objetivo desta atividade prática foi atingido. Foi possível observar os efeitos da desnaturação de proteínas. Não houve limitações, mesmo não estando no laboratório. Tudo ocorreu conforme as orientações. image2.png image3.png image4.png image5.png image6.png image7.png image8.png image9.png image10.png image11.png