Aula 6 - Técnicas 02-4

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MEDIAÇÃO SÍNCRONA
Começaremos em instantes!
Professor Me. Thiago Manchester
AULA 6
BIOLOGIA MOLECULAR
• DNA → RNA → Proteínas
• Transcrição → Tradução
• Técnicas de Biologia Molecular.
• Reação em Cadeia da Polimerase (PCR).
• No termociclador:
➢ Desnaturação.
➢ Anelamento.
➢ Extensão.
• Forense.
• Identificação de DNA/RNA viral.
Bibliografia Recomendada
Capítulo 8
Bibliografia Complementar
● Sim!
● Sequenciamento.
● Clonagem.
É possível saber a sequência exata de 
nucleotídeos no DNA?
● Identificar genes causadores de doenças genéticas e câncer (protooncogenes).
● Aconselhamento genético.
● Descobrir a função de genes específicos.
● Proteômica.
● Desenvolvimento de fármacos específicos (Farmacogenética / farmacogenômica).
● Estudo do grau de parentesco entre espécies (filogenia).
● Desenvolvimento da biotecnologia.
Aplicações
● Necessidade de conhecer a sequência de interesse.
● Método desenvolvido ainda na década de 70 chamado de Sequenciamento 
Didesoxi ou Método de Sequenciamento de Sanger.
● São utilizados na reação: 
➢ dNTPs (A, T, C e G)
➢ ddNTPs (ddA, ddT, ddC e ddG)
➢ DNA Polimerase
➢ Primer
➢ Amostra de DNA
Sequenciamento
ddNTPs
Watson, James D., et al. Biologia molecular do gene. Artmed Editora, 2015.
Sequenciamento manual
Biologia molecular da célula / Bruce 
Alberts ... [et al.] – 6. ed. 2017.
● Utilização de ddNTPs associados à marcadores fluorescentes.
● A sequência pode ser identificada não só pelo tamanho mas também pelas cores.
Sequenciamento didesoxi automatizado
Biologia molecular da célula / Bruce Alberts ... [et al.] – 6. ed. 2017.
● Mais rápidas e mais baratas = mais acessíveis.
● Sequenciamento Illumina.
● Sequenciamento Ion-Torrent.
Tecnologias de 2ª geração
Biologia molecular da célula / Bruce Alberts ... [et al.] – 6. ed. 2017.
● Tricorder (Star Trek)
Tecnologias da 3ª geração?
Estamos perto?
● Obtenção de diversas cópias de uma sequência específica de DNA.
● Por PCR (Aula 5).
● Vetor plasmidial.
● Produção de grandes quantidades de RNAm.
● Superexpressão.
● Produção de proteínas específicas, hormônios e partículas virais 
(vacinas, por exemplo).
Usando clonagem na Biotecnologia
Biologia molecular da célula / Bruce Alberts ... [et al.] – 6. ed. 2017.
EXERCÍCIOS E 
QUESTÕES
Ano: 2019 Banca: Fundação Carlos Chagas – FCC Prova: FCC - SMS São José do Rio Preto - Biomédico – 2019
Considere as assertivas em relação à técnica da reação da polimerase em cadeia:
I. É um método utilizado para amplificação do DNA.
II. A técnica é dependente de uma DNA-polimerase.
III. São realizados vários ciclos e a cada ciclo é necessário incluir uma DNA-polimerase, devido a 
sua baixa resistência a altas temperaturas.
IV. A eletroforese é utilizada para separar fragmentos de DNA de diferentes tamanhos.
Está correto o que se afirma APENAS em:
A) I, II e IV.
B) I e III.
C) I, II e III.
D) II, III e IV.
E) I, III e IV.
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Ano: 2019 Banca: SELECON Instituto Nacional de Seleções e Concursos - SELECON
Prova: SELECON - SME/MT - Professor de Ensino Fundamental - Área Ciências – 2019
A reação em Cadeia da Polimerase (PCR) é uma técnica rotineira de laboratório usada para fazer muitas 
cópias de uma região específica do DNA. Sabe-se que a dupla hélice é estabilizada por ligações de 
hidrogênio, duas entre as bases adenina (A) e timina (T) e três entre guanina (G) e citosina (C). Inicialmente, 
para que o DNA possa ser replicado, a dupla hélice precisa ser totalmente desnaturada pelo aumento da 
temperatura, quando são desfeitas as ligações de hidrogênio entre as diferentes bases nitrogenadas. Dentre 
as figuras abaixo, o primeiro seguimento de DNA a desnaturar totalmente durante o aumento da temperatura 
na reação de PCR é:
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Ano: 2019 Banca: FUNDEP Gestão de Concursos – FUNDEP Prova: FUNDEP - Prefeitura de Santa Luzia - MG -
Professor de Educação Básica - Área: Ciências – 2019
A síntese de proteínas é um dos processos mais importantes do organismo. Uma das principais etapas da 
síntese de proteínas é a transcrição.
Analise o esquema a seguir, que representa as bases nitrogenadas de um trecho de DNA:
AGG CTA CCC AAA GCA TTA AGA
Assinale a alternativa que apresenta o resultado do processo de transcrição desse trecho de DNA.
A) TCC GAT GGG TTT CGT AAT TCT
B) UAA ACU AAA UUU AAU GGU UAU
C) UCC GAU GGG UUU CGU AAU UCU
D) CTT AGC AAA TTT CTG GGC GCG
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Ano: 2019 Banca: Instituto de Desenvolvimento Educacional, Cultural e Assistencial Nacional - IDECAN
Prova: IDECAN - IFAM - Professor de Ensino Básico, Técnico e Tecnológico - Área: Biologia – 2019
O DNA, como Crick e eu estávamos cientes, contém a chave da natureza das coisas vivas, armazenando as 
informações hereditárias, que são passadas de uma geração a outra e orquestrando o mundo 
inacreditavelmente complexo da célula. (Trecho adaptado – retirado de Veja, 6 mai 2016) A frase é de James 
Watson, biólogo que auxiliou a desvendar a estrutura do DNA, ganhador do prêmio Nobel de 1962. A respeito 
do DNA, assinale a afirmativa correta.
A) Na molécula de DNA podem existir cinco diferentes tipos de bases nitrogenadas.
B) A molécula de DNA é formada por duas cadeias caracterizadas por sequências de bases nitrogenadas.
C) Na molécula de DNA, podem existir oito diferentes tipos de complementação de bases nitrogenadas.
D) Na molécula de DNA, a quantidade de guanina presente em uma das cadeias é levemente maior que a 
quantidade de citosina.
E) A síntese do RNA a partir de duas trincas de uma molécula de DNA: AGG – CAA será TCC-GTT.
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Ano: 2019 Banca: Ganzaroli Assessoria, Consultoria e Concursos – Ganzaroli Prova: 
Ganzaroli - Prefeitura de Trombas - Biólogo – 2019
O esquema abaixo representa a formação de proteínas no interior das células. Em relação a esse esquema, 
pode-se afirmar que:
A) O número 2 representa a transcrição e ocorre no núcleo.
B) O número 1 representa a tradução e ocorre no núcleo.
C) O número 3 representa a transcrição e ocorre no citoplasma.
D) O número 2 representa a duplicação e ocorre no núcleo.
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Um trecho de uma das cadeias da molécula de DNA tem a seguinte sequência de bases 
nitrogenadas:
Abaixo, temos os códons correspondentes a quatro aminoácidos:
Suponha que, em um caso de mutação, a terceira base daquele trecho de DNA, que se encontra sublinhada (A), seja 
substituída pela base Guanina. Essa nova situação:
A) acarretaria modificação em parte da sequência de aminoácidos da proteína a ser sintetizada.
B) acarretaria modificação em todos os códons subsequentes no trecho do RNA mensageiro 
correspondente.
C) não acarretaria modificação na sequência de nucleotídeos do RNA mensageiro correspondente.
D) não acarretaria modificação na sequência de aminoácidos da proteína a ser sintetizada.
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MVPT, feminino, com 33 anos de idade, procurou o ambulatório de otorrinolaringologia do 
Hospital Universitário Lauro Wanderley (PB), com queixa de odinofagia (dor de garganta) e 
febre há um mês. Durante a anamnese mostrou-se bastante prostrada e ansiosa com a 
persistência de suas queixas. O médico prescreveu o quimioterápico ciprofloxacina de 12 em 
12 horas por 10 dias. Essa droga apresenta, como mecanismo de ação, a inibição da enzima 
topoisomerase denominada girase; assim pode-se afirmar que essas drogas:
A) São drogas antimicrobianas, que agem inibindo a síntese da parede celular bacteriana.
B) São drogas antimicrobianas, que agem inibindo a síntese da membrana citoplasmática.
C) São drogas antimicrobianas, que agem interferindo na síntese de proteínas.
D) São drogas antimicrobianas, que afetam a replicação do RNA.
E) São drogas antimicrobianas, que agem inibindo a replicação do DNA bacteriano.
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No bloco superior abaixo, são citados processos relacionados à síntese proteica; no inferior, 
seus eventos característicos.
Associe adequadamente o bloco inferior ao superior.
1. Transcrição
2. Tradução
( ) A síntese de RNA, a partir do DNA, é catalisada pela polimerasedo RNA.
( ) O RNAt que transporta o aminoácido metionina emparelha-se com um códon AUG, 
presente na molécula de RNAm.
( ) O sítio P é sempre ocupado pelo RNAt que carrega a cadeia polipeptídica em formação.
( ) A região promotora é uma sequência de bases nitrogenadas do DNA que determina o local 
de encaixe da polimerase do RNA.
A sequência correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:
A) 1 – 1 – 2 – 2.
B) 1 – 2 – 2 – 1.
C) 1 – 2 – 2 – 2.
D) 2 – 1 – 1 – 1.
E) 2 – 1 – 1 – 2.
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1. A
2. C
3. C
4. B
5. A
6. D
7. E
8. B
Gabarito 
Programando Vacinas de RNA – Átila Iamarino
https://www.youtube.com/watch?v=bDOuBb9uDOo&ab_channel=Nerdologia
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• Revisão!
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	Slide 5: Bibliografia Complementar
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	Slide 8: Sequenciamento
	Slide 9: ddNTPs
	Slide 10: Sequenciamento manual
	Slide 11: Sequenciamento didesoxi automatizado
	Slide 12: Tecnologias de 2ª geração
	Slide 13: Tecnologias da 3ª geração?
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	Slide 15: Usando clonagem na Biotecnologia
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