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Protocolo de aula prática Disciplina: Análise de Microrganismos e Vigilância Sanitária Turma: Parte 1 PREPARO DE LÂMINA COM SINAIS FÚNGICOS COM O USO DE FITA ADESIVA Análise microscópica de 03 placas com fungos que contaminaram os alimentos. 1. Colocar uma lâmina de vidro sobre uma superfície clara e pingar sobre a lâmina uma gota de corante (azul algodão); 2. Cortar uma tira de fita adesiva do tamanho maior da lâmina de vidro; 3. Pressionar o centro da fita sobre os sinais do patógeno; 4. Fixar a fita na lâmina com as estruturas patogênicas sobre o corante; dispensa o uso de lamínulas; 5. Observar no microscópio e comparar com as imagens disponíveis na apresentação da professora. Parte 2 Objetivos da aula Ao final da aula, os alunos deverão ser capazes de: – Realizar o exame de urocultura – Identificar os principais bacilos Gram-negativos e positivos causadores de infecções do trato urinário Materiais – Amostras de urina – Reagentes para coloração de Gram – Lâminas limpas, óleo de imersão – Alça calibrada – Microscópio e bico de Bunsen - Contador de colônias - Placas contendo a urocultura Metodologia Primeira Parte 1. Preparar um esfregaço para coloração de Gram – 10µL de amostra. 2. Colocar na lâmina, secar, fixar e corar. 3. Relatar o resultado de acordo com o número de microrganismos encontrados por campo (raros, alguns, vários, numerosos). 4. Observar a presença de células epiteliais, bacilo de doderlain (Lactobacillus). 5. Proceder a semeadura semi-quantitativa em ágar sangue e Macconkey (Figura 1). 6. Usar alça calibrada de 1µL. 7. Incubar 24h, 35-37°C. Segunda Parte 1.Observar a morfologia colonial Protocolo: Sempre utilizar mais de uma placa, feita nas mesmas condições, para contagem da urocultura; As contagens deverão ser realizadas imediatamente após o período de incubação das placas. Na impossibilidade de realizar a contagem imediatamente após o período de incubação, manter as placas sob refrigeração em temperatura de 4 oC a 7 0C. Próxima aula: As colônias deverão ser contadas com o auxílio de contador de colônias equipado com placa de vidro ou acrílico, com diâmetro compatível com o das placas utilizadas, dividido milimetricamente em quadrantes com 1 cm2 de área e com iluminação artificial uniforme Parte 3: Resumo do artigo: O ataque silencioso dos fungos image1.png image2.png