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CENTRO UNIVERSITÁRIO LEONARDO DA VINCI NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA - NEAD RELATÓRIO DE PRÁTICA VIRTUAL IDENTIFICAÇÃO 1. Acadêmico: THAYNÁ LORENA LACERDA RODRIGUES PORTILHO 2. Matrícula: 4271618 3. Curso: BIOMEDICINA 4. Turma: FLC5309BBI 5. Disciplina: BIOQUÍMICA CLÍNICA 6. Tutor(a) Externo(a): KARLA ALMEIDA DE OLIVEIRA DADOS DA PRÁTICA 1. Título: COLESTEROL TOTAL 2. Semestre: 6 3. Data: 14-11-2024 INTRODUÇÃO Neste experimento, irei aprimorar meus conhecimentos sobre dosagem bioquímica do colesterol total por meio de uma reação colorimétrica. Esta técnica é realizada através de um método analítico que se baseia na interação da matéria com a radiação eletromagnética, calculando o quanto é absorvido e quanto é transmitido, com o uso do espectrofotômetro. OBJETIVOS Neste experimento, irei aprimorar meus conhecimentos sobre dosagem bioquímica do colesterol total por meio de uma reação colorimétrica. Esta técnica é realizada através de um método analítico que se baseia na interação da matéria com a radiação eletromagnética, calculando o quanto é absorvido e quanto é transmitido, com o uso do espectrofotômetro. MATERIAIS • Banho-maria; • Caneta marcadora; • Cubeta; • Espectrofotômetro; • Kit Colesterol total (reagente de trabalho e solução padrão de colesterol); • Micropipeta de 100 µL; • Micropipeta de 1000 µL; • Ponteira para micropipeta; • Recipiente de descarte; • Suporte para micropipeta; • Suporte para tubo de coleta; • Suporte para tubo de ensaio; • Tubo de coleta com amostra de soro; • Tubo de ensaio. METODOLOGIA LIVRO E LABORATÓRIO VIRTUAL RESULTADOS E DISCUSSÕES Higienizei as mãos na pia e coloquei os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de EPIs”. jaleco, luvas e óculos de proteção. Identifiquei o primeiro tubo de ensaio com a sigla A. Identifiquei o segundo tubo de ensaio com a sigla B, o terceiro tubo de ensaio com a sigla P. Em seguida fiz a identificação das cubetas. Identifiquei a primeira cubeta com a sigla A; identifiquei a segunda cubeta com a sigla B, e por fim, identifiquei a terceira cubeta com a sigla P. Pipete 1000 µL do reagente de trabalho. Transferi a solução pipetada para o tubo de ensaio B (branco). Em seguida, pipete 1000 µL do reagente de trabalho e transferi para o tubo B. Repeti as etapas de pipetagem e transferi o reagente de trabalho para o tubo de ensaio P e A. Descartei a ponteira. Ajustei o volume da micropipeta de 100 µL para 20 µL. Pipetei 20 µL da solução padrão e transferi a solução pipetada para o tubo de ensaio P (padrão). Descartei a ponteira e pipete 20 µL da amostra de soro. Transferi a amostra pipetada para o tubo de ensaio A (amostra) e descartei a ponteira. Homogeneizei a solução agitando o tubo por 20 segundos. Movi os tubos para o banho-maria. Liguei o banho-maria e aguardei por 10 minutos. Retirei os tubos de ensaio do banho-maria. Liguei o espectrofotômetro e configurei o comprimento de onda para 505 nm. Abri o equipamento. Pipete 1000 µL do conteúdo do tubo B e transferi o conteúdo para a cubeta B. Descartei a ponteira. Coloquei a cubeta do branco (B) no equipamento e fechei o equipamento. Zerei o equipamento. Abri e retirei a cubeta do espectrofotômetro. Em seguida, pipete 1000 µL do conteúdo do tubo P e transferi o conteúdo para a cubeta P. Descartei a ponteira. Coloquei a cubeta com a solução padrão (P) no espectrofotômetro, fechei o equipamento e realizei a leitura. Retirei a cubeta P. Pipetei 1000 µL do conteúdo do tubo A e transferi o conteúdo para a cubeta A. Descartei a ponteira. Coloquei a cubeta com a amostra (A) e realizei a leitura. Abri o equipamento e retirei a cubeta. Fechei o equipamento. Calculei a concentração de colesterol na amostra utilizando a seguinte fórmula: Colesterol (mg/dL) = Abs. amostra / Abs. padrão x 200. Preenchi o laudo com o resultado encontrado. AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 1. Qual é o conceito da espectrofotometria? A espectrofotometria é um método utilizado para medir o quanto uma substância química absorve a luz, medindo a intensidade quando um feixe de luz passa através da solução da amostra. 2. O que é absorbância e transmitância? Transmitância é a fração de energia luminosa que consegue atravessar a espessura de um determinado material, sem ser absorvida, ou seja, a capacidade de transmitir luz. Já a absorbância é a energia luminosa absorvida pela espessura de determinado material. 2. Explique o tipo de reação bioquímica que ocorreu na realização do teste? Resultado do teste sexo feminino valores de referência: Ótimo 240 mg/dl REGISTRO FOTOGRÁFICO Durante a prática realize 1 registro fotográfico em que você aparece executando a prática. Você pode tirar um selfie. REFERÊNCIAS PORTAL LEO APP E ROTEIRO, INTERNET. image1.jpeg image2.png