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Faculdade Anhanguera Unidade Governador Valadares Departamento de Farmácia Disciplina: Biotecnologia e Produção de Alimentos Prof. Paloma Esteves de Carvalho. Governador Valadares, 2024. TECNOLOGIA DE DNA RECOMBINANTE ❖ Engenharia genética ou Tecnologia de DNA recombinante é um conjunto de técnicas que permite aos cientistas identificar, isolar, multiplicar e expressar genes de quaisquer organismos. MANIPULAÇÃO GÊNICA FEITA EM LABORATÓRIO. TECNOLOGIA DE DNA RECOMBINANTE ❖ Clonagem de genes de interesse para expressão e produção de proteínas recombinantes: insulina, hormônio do crescimento. FERRAMENTAS UTILIZADAS: - PCR; - Eletroforese; - Enzimas; - Bibliotecas genômicas; - Vetores; - Sequenciamento de DNA; Clonagem: obtenção de uma grande quantidade de uma determinada sequência de DNA de interesse. Clonagem de fragmentos de DNA • Enzimas: - Enzimas de restrição; - DNA Polimerase; - DNA ligase/ topoisomerase; • Vetores: - Plasmídeos; - Vírus/ Bacteriófagos. • Hospedeiros: - Escherichia coli; - Células animais; - Células vegetais. ENZIMAS DE RESTRIÇÃO : • São endonucleases; • Enzimas de bactérias; • O nome da enzima = derivada do nome da espécie em que foi isolada; • Cortam DNA em fragmentos definidos e reprodutíveis; • Ferramenta básica em clonagem de genes. ENZIMAS DE RESTRIÇÃO : Proteínas que reconhecem e clivam (cortam) o DNA em pontos específicos; - Geralmente em 4, 6 e 8 bases. ENZIMAS DE RESTRIÇÃO : Proteínas que reconhecem e clivam (cortam) o DNA em pontos específicos; A enzima corta as duas fitas de DNA no mesmo sítio. DNA exógeno. O fragmento de DNA se liga ao DNA exógeno através das pontas adesivas DNA RECOMBINANTE AÇÃO DA ENZIMA - EcoR1 Vetores são moléculas de DNA de um organismo com capacidade de replicação. O DNA de interesse é inserido no vetor. ❖ Tipos de vetores: - Plasmídeos; - Vírus/ Bacteriófagos. paloma.carvalho@kroton.com.br mailto:fernanda.h.assis@kroton.com.br