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Transporte por membranas e potencial de repouso Proªf. Caroline M. P. Schuabb, PhD Compartimentos químicos do corpo • O corpo tem dois compartimentos de fluido distintos: as células e o fluido que circunda as células. • O líquido extracelular (LEC) fora das células é o tampão entre as células e o meio externo do corpo formado pelo plasma e interstício. Compartimentos químicos do corpo Homeostasia é estabilidade, não equilíbrio • Os compartimentos do corpo encontram-se em desequilíbrio químico, relativamente estável. • A membrana celular é uma barreira semipermeável entre o LIC e o LEC. Homeostasia é estabilidade, não equilíbrio LEC: Alta concentração de proteínas no plasma e não no interstício. X • Os compartimentos do corpo encontram-se em desequilíbrio químico, relativamente estável. • A membrana celular é uma barreira semipermeável entre o LIC e o LEC. Equilíbrio osmótico mas em desequilíbrio químico • O movimento livre da água, os compartimentos intracelular e extracelular alcançam um estado de equilíbrio osmótico, no qual as concentrações nos líquidos são iguais dos dois lados da membrana celular. Equilíbrio osmótico mas em desequilíbrio químico O desequilíbrio químico é mantido apenas com a entrada contínua de energia mantém o corpo nesse estado. Íons K+ que saem da célula e íons Na+ que entram na célula têm as suas concentrações restabelecidas por uma enzima, chamada de Na+-K+ -ATPase. Sem energia, as células obedecem à segunda lei da termodinâmica, retornando a um estado de distúrbio marcado pela equilíbrio químico. Movimento da água por OSMOSE • A água é capaz de se mover livremente para dentro e para fora de quase todas as células no corpo, atravessando os canais iônicos cheios de água e os canais especiais de água, criados pela proteína aquaporina (AQP). • O movimento da água através de uma membrana em resposta a um gradiente de concentração de um soluto é denominado osmose. • Na osmose, a água move-se para diluir a solução mais concentrada. Osmose e pressão osmótica Osmolaridade • O número de partículas osmoticamente ativas (íons ou moléculas) por litro de solução. • A osmolaridade é expressa em osmoles por litro (osmol/L ou OsM) ou, para soluções muito diluídas, miliosmoles/litro (mOsM). • A osmolaridade normal do corpo humano encontra-se por volta dos 300 mOsM (entre 280 e 296 mOsM). Murcha ou Inchada???? Tonicidade é um termo fisiológico para descrever uma solução e como esta afeta o volume de uma célula se a célula for colocada nessa solução até o equilíbrio. • Se uma célula é colocada na solução e incha ao ganhar água em equilíbrio, a solução é hipotônica para a célula. • Se a célula perde água e murcha em equilíbrio, a solução é hipertônica. • Se a célula na solução não muda de tamanho em equilíbrio, a solução é isotônica. Infusão de soluções intravenosas • A escolha do líquido depende de como o médico quer que os solutos e a água se distribuam entre os compartimentos extracelular e intracelular. • Se o problema for desidratação celular, a solução IV apropriada é __________, uma vez que as células necessitam de líquido. • Se a situação requer líquido que permaneça no líquido extracelular para repor o sangue perdido, é utilizada uma solução IV _____________. Infusão de soluções intravenosas • A escolha do líquido depende de como o médico quer que os solutos e a água se distribuam entre os compartimentos extracelular e intracelular. • Se o problema for desidratação celular, a solução IV apropriada é HIPOTÔNICA, uma vez que as células necessitam de líquido. • Se a situação requer líquido que permaneça no líquido extracelular para repor o sangue perdido, é utilizada uma solução IV ISOTÔNICA. Infusão de soluções intravenosas • Se o problema for desidratação celular, a solução IV apropriada é hipotônica, uma vez que as células necessitam de líquido. • Se a situação requer líquido que permaneça no líquido extracelular para repor o sangue perdido, é utilizada uma solução IV isotônica. • Em medicina, a tonicidade de uma solução é geralmente a consideração mais importante. A tonicidade depende apenas da concentração de solutos não penetrantes. Hora de falar no transporte de solutos por membrana Difusão • A difusão é um processo passivo. • As moléculas movem-se de uma área de maior concentração para uma área de menor concentração. • O movimento de moléculas por membranas ocorre até que a concentração seja igual. Difusão Simples por membranas A taxa de difusão depende da capacidade de a molécula se dissolver na bicamada lipídica da membrana. Apenas lipídeos, esteroides e pequenas moléculas lipofílicas. Pequenas moléculas polares e sem carga, como água, oxigênio, CO2, urea são exemplos de moléculas que fazem difusão simples por membranas. Difusão facilitada - Transpostadores • Proteínas de transporte movem moléculas através da membrana. • São chamadas também de proteínas canais ou carreadoras. • Seguem o mesmo critério da difusão simples, mas com ajuda de uma proteína. Canais iônicos • Os canais iônicos podem ser específicos para um íon ou podem permitir a passagem de íons com tamanho e carga similares. • Por exemplo, existem canais de Na+ , canais de K+ e canais de cátions monovalentes (com uma carga) inespecíficos que transportam Na+, K+ e íons lítio Li+. Tipos de canais iônicos • Os canais abertos passam a maior parte do tempo com o seu portão aberto, permitindo aos íons moverem-se de um lado a outro através da membrana, sem regulação. • Canais com portão passam a maior parte do tempo em um estado fechado, o que permite que esses canais regulem o movimento de íons que passam através deles. 1. Canais com portão controlados quimicamente, o portão é controlado por moléculas mensageiras intracelulares ou por ligantes extracelulares que se ligam ao canal proteico. 2. Os canais com portão dependentes de voltagem abrem e fecham quando o estado elétrico da célula muda. Tipos de canais iônicos 3. Canais com portão controlados mecanicamente respondem a forças física como um aumento de temperatura ou pressão que aplica tensão na membrana e faz o portão do canal se abrir. Ativo Transporte ativo • O transporte ativo é um processo que transporta as moléculas contra os seus gradientes de concentração. • O transporte ativo cria um estado de desequilíbrio, tornando a diferença de concentração mais pronunciada. • A energia para o transporte ativo vem direta ou indiretamente das ligações fosfato ricas em energia do ATP. Transporte ativo primário • A energia empurra as moléculas contra os seus gradientes de concentração vem diretamente das ligações fosfato de alta energia do ATP. O transporte ativo secundário • Nessa modalidade se usa a energia potencial armazenada no gradiente de concentração de uma molécula para empurrar outras moléculas contra os seus gradientes de concentração. • Todo transporte ativo secundário depende do transporte ativo primário agir anteriormente. Transporte por vesículas • As células utilizam dois processos básicos para importar partículas e moléculas grandes: fagocitose e endocitose. • Matéria pode deixar a célula pelo processo conhecido como exocitose, um processo que é similar à endocitose, mas que ocorre na direção contrária. Endocitose vs Fagocitose 1. Na endocitose, a superfície da membrana se retrai, em vez de se projetar para fora. 2. A vesícula formada pela endocitose é muito menor do que na fagocitose. • Algumas endocitoses são constitutivas; isto é, elas são uma função essencial que sempre ocorre. • A fagocitose deve ser iniciada pela presença de uma substância a ser ingerida. Endocitose mediada por receptores • A endocitose mediada por receptores ocorre nas regiões da membrana celular conhecidas como poços revestidos, recortes onde o lado citoplasmático da membrana tem altas concentraçõesde proteína. • A proteína mais comum encontrada em poços revestidos é a clatrina. • Transporta várias substâncias para dentro da célula, incluindo hormônios proteicos, fatores de crescimento, anticorpos e proteínas plasmáticas que atuam como carreadores de ferro e colesterol. Hipercolesterolemia familiar • Indivíduos com a doença genética hipercolesterolemia familiar (HF) têm mutações no receptor de LDL, que previne a captação normal de LDL pelo fígado e pelos tecidos periféricos. O resultado da captação defeituosa de LDL são níveis muito altos de LDL no sangue (e de colesterol que ela carrega). Pequena tangente... Exocitose • A exocitose é o oposto da endocitose. • As vesículas intracelulares movem-se em direção à membrana celular, fundindo-se com ela. Transporte epitelial • Moléculas que entram e saem do corpo ou que se deslocam entre certos compartimentos dentro do corpo devem atravessar uma camada de células epiteliais que são conectadas umas às outras através de junções de adesão e junções de oclusão. Movimento transcelular e paracelular • O transporte epitelial pode ocorrer como transporte paracelular através das junções entre as células vizinhas ou como transporte transcelular através das células epiteliais. Exemplo: Transporte transcelular da glicose – Absorção intestinal Transporte epitelial com vesículas Algumas moléculas, como as proteínas, são muito grandes para atravessar o epitélio pelos transportadores de membrana. São movidas entre epitélios por transcitose, que é uma combinação de endocitose, transporte vesicular através da célula e exocitose. 1. Nesse processo, a molécula é trazida para dentro da célula epitelial através de endocitose mediada por receptor. 2. A vesícula resultante se liga aos microtúbulos no citoesqueleto da célula e é movida através da célula por um processo conhecido como transporte vesicular. 3. No lado oposto do epitélio, o conteúdo da vesícula é liberado para o líquido intersticial por exocitose. O POTENCIAL DE MEMBRANA EM REPOUSO Sinalização elétrica dos neurônios – Potencial de Membrana • O corpo é eletricamente neutro: para todos os cátions, há um aníon correspondente. • No entanto, os íons não são distribuídos uniformemente entre o LEC e o LIC. Sinalização elétrica dos neurônios – Potencial de Membrana • O compartimento intracelular contém alguns ânions que não possuem cátions correspondentes, o que confere às células uma carga líquida negativa. • O compartimento extracelular apresenta uma carga líquida positiva: alguns cátions do LEC não possuem ânions correspondentes. • Os dois compartimentos existem em um estado de desequilíbrio elétrico. Função da membrana Entendendo a geração do potencial Entendendo a geração do potencial Equilíbrio eletroquímico Todas as células vivas possuem potencial de membrana Potencial de repouso O potencial de membrana em repouso é devido principalmente ao potássio. A bomba Na+- K+-ATPase ØA bomba contribui para o potencial de membrana por bombear 3 Na+ para fora para cada 2 K+ bombeados para dentro. ØUma vez que a Na+-K+-ATPase ajuda a manter o gradiente elétrico, ela é chamada de bomba eletrogênica. Mudanças no potencial da membrana O potencial de membrana (Vm) começa com um valor de repouso de é -70 mV constante. Quando o traço se move para cima (torna-se menos negativo), a diferença de potencial entre o interior e o exterior da célula (0 mV) é menor, e a célula é dita despolarizada. O retorno ao potencial de repouso da membrana é denominado repolarização. Se o potencial de repouso se torna mais negativo, dizemos que a célula hiperpolarizou. Potencial de repouso O potencial de membrana (Vm) começa com um valor de repouso de é -70 mV constante. Movimento dos íons em células reais O potencial de membrana muda em resposta ao movimento de qualquer um destes quatro íons: Na+, Ca2+, Cl- e K+. Na+, Ca2+ e Cl- são mais concentrados no LEC. Basta abrir um canal para que esses íons entrem na célula causando mudança no potencial. vA entrada de Ca2+ ou de Na+ _________ a célula (o potencial de membrana se torna mais _______). vA entrada de Cl– ___________ a célula (faz o potencial de membrana ser mais _________). Movimento dos íons em células reais O potencial de membrana muda em resposta ao movimento de qualquer um destes quatro íons: Na+, Ca2+, Cl- e K+. Na+, Ca2+ e Cl- são mais concentrados no LEC. Basta abrir um canal para que esses íons entrem na célula causando mudança no potencial. vA entrada de Ca2+ ou de Na+ despolariza a célula (o potencial de membrana se torna mais positivo). vA entrada de Cl– hiperpolariza a célula (faz o potencial de membrana ser mais negativo). Os canais iônicos e a alteração do potencial de repouso Canais de vazamento de potássio permanecem a maior parte do tempo abertos. Outros canais têm portões que abrem ou fecham em resposta a um estímulo em particular: • Os canais iônicos controlados mecanicamente são encontrados em neurônios sensoriais e se abrem em resposta a forças físicas, como pressão ou estiramento. • Os canais iônicos dependentes de ligante da maioria dos neurônios respondem a uma grande variedade de ligantes, como neurotransmissores e neuromoduladores extracelulares ou moléculas sinalizadoras intracelulares. • Os canais iônicos dependentes de voltagem respondem a mudanças no potencial de membrana da célula. Para fechar…. exemplo: secreção de insulina FIM