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A Microbiologia dos Diferentes Sítios Anatômicos Prof. Marcelo Pilonetto PUCPR Microbiologia - PUCPR 2 Introdução Perguntas essenciais no estudo das infecções: • Quem causa? • O que causa? • Como causa? • Quem está predisposto? • Como diagnosticar? • Como tratar? Microbiologia - PUCPR 3 Como analisar amostras no Laboratório? • Sinais e Sintomas • De onde e como coletar ? • Como transportar? • Onde semear e isolar? • Quais microrganismos valorizar? (patógenos x microbiota normal) Microbiologia - PUCPR 4 Introdução Importância da topografia • Invasor ou microbiota? • Patogênico ou comensal? • Valorizar o isolado? – Sim: Realiza-se id. e antibiograma – induz antibioticoterapia – Não: conclui-se análise - racionaliza custos, evita antibioticoterapia desnecessária Microbiologia - PUCPR 5 Introdução • Sítios a serem estudados – Trato Genitourinário, – Trato Gastrointestinal, – Trato Respiratório, – Peles e Ferimentos, – Sistema Circulatório, – Líquidos Estéreis, – Sistema Nervoso Central Microbiologia - PUCPR 6 Referências • Experiência profissional – Rotina do HC - UFPR – Rotina do Laboratório GR e do HGeC – Rotina e Direção do Laboratório Evangélico – Rotina e Direção do LACEN, outros hospitais • Koneman, E. - Diagnostic Microbiol. 6 ª ed. 2005 • Murray, P. - Manual of Clin. Microbiol. - 9 ª ed. 2007 • Pilonetto - Manual de Procedimentos Laboratoriais em Microbiologia - 1998 Microbiologia - PUCPR 7 TRATO URINÁRIO Microbiologia - PUCPR 8 TRATO URINÁRIO O que causa? Sintomas: • Cistite – Dor / ardência – Disúria/ polaciúria / – Urgência • Pielonefrite – Febre alta / lombalgia (Sinal de Giordani +) – Mal-estar geral Microbiologia - PUCPR 9 TRATO URINÁRIO Quem causa? • “Microbiota normal”/ contaminantes – Difteróides Lactobacilos ECN Estrepto viridans • Patógenos – Enterobactérias (E. coli, Proteus spp., grupo KESC...) – Estafilococos (S. aureus, S. saprophyticus) – Estreptococos (S. agalacitae, E. faecalis,) – Não fermentadores (P. aeruginosa); – Candida spp. Microbiologia - PUCPR 10 TRATO URINÁRIO Como causa? Contato • Microbiota fecal • Colonização vaginal/uretral • Ascensão uretral Adesão • Fímbria – células uroepiteliais • Receptores - Manose Multipli - cação • Uma geração a cada 20 minutos • Bacteriúria: superior a 105 UFC/mL • > 102 UFC/mL e < 105 UFC/mL - avaliar Microbiologia - PUCPR 11 TRATO URINÁRIO Como causa? Resposta • Leucócitos • Inflamação Sinais e sintomas • Dor / Ardência / Disúria / Urgência... Evolução • Eliminação (uso de atb) ou • Disseminação • Rins (pielonefrite), sangue (urosepsis) Microbiologia - PUCPR 12 TRATO URINÁRIO Quem está predisposto? • Mulheres jovens, sexualmente ativas • Homens com < 2 anos e > 65 anos • Diabéticos • Uso de sonda vesical - anestesias • Cálculo renal • Grávidas • Má formação congênita (ex.: prega ureteral) Microbiologia - PUCPR 13 Curso de Especialização em Microbiologia - PUCPR 14 TRATO URINÁRIO Como diagnosticar? Pré-Analítico • Higiene dos genitais: – Lavar com água e sabonete • Coleta de material: – Urina de jato médio – Urina de coletor – Aspirado de sonda urinária – Punção supra púbica • Transporte: refrigeração (se > 30 min) 15 TRATO URINÁRIO Como diagnosticar? Analítico • Exame direto (Microscopia) – Gram – gota não centrifugada • bactérias, leucócitos e células epiteliais • Processamento – Alça calibrada 1:1000 (1 microlitro) – CLED / MAC ou Meio Cromogênico – Incubação - 35º C / 24h – Identificação e Antibiograma (mais 24 - 48h) – TAT – 48 a 72h (24h, se negativa) Microbiologia - PUCPR 16 Microbiologia - PUCPR 17 TRATO URINÁRIO Quem está predisposto? • Mulheres jovens, sexualmente ativas • Homens com < 2 anos e > 65 anos • Diabéticos • Uso de sonda vesical - anestesias • Cálculo renal • Grávidas • Má formação congênita (ex.: prega ureteral) Microbiologia - PUCPR 18 TRATO URINÁRIO Como tratar? • Quinolonas e Fluorquinolonas – Ácido nalidíxico, Norfloxacin • Ácido Pipemídico • Nitrofurantoína • Sulfazotrim • Cefalosporinas de 1, 2ª geração • Aminoglicosídeos • Pielonefrite/ Septicemia – Amicacina ou Cefalo de 3ª Geração ou Ciprofloxacina Microbiologia - PUCPR 19 TRATO GASTROINTESTINAL Microbiologia - PUCPR 20 TRATO GASTROINTESTINAL O que causa? • Sintomas – Superior • Gastrite / Úlcera péptica – Inferior • Diarréia (perda de líq. e eletrólitos) / Desidratação • Disenteria (pus / muco / sangue) • Caimbra abdominal / tenesmo • Vômitos Microbiologia - PUCPR 21 TRATO GASTROINTESTINAL Quem não causa? • Microbiota normal – Enterobactérias • E. coli, Klebsiella, Proteus, Enterobacter... – Enterococcus faecalis e E. faecium – Bacteroides fragilis, Bifidobacterium (Anaeróbios) – Lactobacillus spp., entre outros – Pós – antibioticoterapia: Pseudomonas, Acinetobacter, VRE Microbiologia - PUCPR 22 TRATO GASTROINTESTINAL Quem causa? • Patógenos – Sorotipos enteropatogênicos de E. coli • EPEC, EIEC, EAEC, EHEC/VTEC, ETEC, DAEC – Salmonella, Shigella, Yersinia, – Campylobacter spp. – Aeromonas, Plesiomonas – Vibrio spp. – Vírus: Rotavírus, Adenovírus, Norovírus, Astrovírus, HAV – H. pylori (gastroduodenal) Microbiologia - PUCPR 23 TRATO GASTROINTESTINAL Como causa? Contato (7 Fs) • Água ou alimentos contaminados • Falta de higiene pessoal • Contaminação fecal Adesão • Fímbria – células do epitelio intestinal • Permanece na luz ou invade células Multipli - cação •I - Destruição celular •T - Produção de Toxinas ou Microbiologia - PUCPR 24 TRATO GASTROINTESTINAL Como causa? Resposta • I - Invasão – Leucócitos – Inflamação • T- Secreção de AMPc, Cl-, Na+ e H2O Sinais e sintomas • I – pouco volume, vários episódios, muco e sangue • T – volumosos, pouco episódios Evolução • Eliminação - TRO ou uso de atb • Portador sadio (Salmonella) 25 TRATO GASTROINTESTINAL Como diagnosticar? • Diagnóstico de Rotina – Salmonella, Shigella – Laboratórios avançados: • EPEC, EIEC, ETEC – Culturas especializadas: • Campylobacter / Aeromonas – Lab. Saúde Pública: • Todas acima mais: Vibrio spp., EHEC, Plesiomonas 26 TRATO GASTROINTESTINAL Como diagnosticar? • Coleta do Material – Biopsia (gastrite, úlcera) – Fezes / Swab retal – valorizar muco/sangue – Outros: Hemocultura, urina – Transporte: • H. pylori - BHI (biopsia), NÃO usar formol • Fezes/Swab: Cary-Blair ou Glic. Tamponada, • Vibrio spp: Água peptonada 27 Exame direto – Leucócitos – invasão (disenteria) – BGN curvos - Campilo? Vibrio? – Leveduras - desequilíbrio da microbiota / alergia/ imunosupressão ? – BGP esporulados – pós uso de atb? C. difficille ? TRATO GASTROINTESTINAL Como diagnosticar? 28 • Semeadura e Isolamento – Meio pouco seletivo (MAC / EMB) – Meio mod. seletivo (HE / SS / XLD) – Caldo de enriquec. (GN, SEL, TET.) • Repique para HE ou SS ou XLD • Observar tempo de incubação – Outros (TCBS, com ATB...)– Incubação - 35º C / 24 h TRATO GASTROINTESTINAL Como diagnosticar? 29 Diarréias não complicadas – Terapia de reposição oral Diarréias complicadas – Salmonella: ciprofloxacina – Outros: sulfazotrim, gentamicina – Vibrio: tetraciclina + soro glicosado EV TRATO GASTROINTESTINAL Como tratar? Microbiologia - PUCPR 30 TRATO RESPIRATÓRIO Microbiologia - PUCPR 31 TRATO RESPIRATÓRIO O que causa? • Sintomas – Pneumonia típica: – Dor ao respirar/inspirar – Tosse produtiva – Escarro purulento – Febre alta – Bacteremia e/ou septicemia – Choque séptico Microbiologia - PUCPR 32 TRATO RESPIRATÓRIO O que causa? • Sintomas – Pneumonia Atípica e Pneumonia Viral – Dor de garganta – Coriza – Tosse seca – Escarro menos purulento – Febre moderada – Pode complicar com superinfecção Microbiologia - PUCPR 33 TRATO RESPIRÁTORIO Quem não causa? • “Microbiota normal”/ contaminantes – Estrepto viridans – Difteróides – Estafilococos Coagulase Negativa (ECN) – Anaeróbios Microbiologia - PUCPR 34 TRATO RESPIRÁTORIO Quem causa? • Patógenos Comunitários Típicos – Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus – Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis Atípicos – Mycoplasma pneumoniae, Legionela pneumophila, – Chlamydophila pneumoniae - Microbiologia - PUCPR 35 TRATO RESPIRÁTORIO Quem causa? • Patógenos Comunitários Vírus: - RSV, Coronavírus - Parainfluenza 1, 2 e 3 - Influenza A, B e C - Metapneumovírus - Bocavírus... Microbiologia - PUCPR 36 TRATO RESPIRÁTORIO Quem causa? • Patógenos Hospitalares – Staphylococcus aureus - MRSA – Enterobactérias • Klebsiella pneumoniae, Enterobacter spp. , Escherichia coli, Proteus spp... – Não fermentadores • P. aeruginosa, Acinetobacter baumanii , Stenotrophomonas maltophilia , Burkholderia cepacia... Microbiologia - PUCPR 37 TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR Como causa? Contato •Aspiração ou Inalação •Refluxo gastroesofágico Adesão • Fímbrias – células do alvéolo • Fibronectina Multipli - cação • No alvéolo - Fagocitose • Superação da defesa/fagocitose Microbiologia - PUCPR 38 TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR Como causa? Resposta • Ativação de Macrófagos • Liberação de Citocinas - Inflamação Sinais e sintomas • Tosse produtiva • Grande n° de neutrófilos • Febre Evolução • Eliminação - Uso de antibióticos e • Reabsorção do derrame ou • Bacteremia - Septicemia Microbiologia - PUCPR 39 TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR Quem está predisposto? • RN pré-maturos • Crianças 6m-2 anos • Idosos (>65a) • Uso de Ventilação Mecânica • Uso de antibióticos e anti-a • Infecção viral • Hospitalização prolongada (ex.: UTI) Microbiologia - PUCPR 40 TRATO RESPIRATÓRIO Como diagnosticar? • Material: – Escarro – Lavado brônquico – Aspirado de sonda traqueal – Aspirado trans-traqueal • Transporte: temperatura ambiente – Rápido, sem refrigerar Microbiologia - PUCPR 41 TRATO RESPIRATÓRIO Como diagnosticar? • Cultura: – Bactérias comuns: AS/MAC/ACH – Atípicas: meios específicos – Viral: meios para isolamento de virus Microbiologia - PUCPR 42 TRATO RESPIRATÓRIO Como tratar? • Resfriado – Sintomático • Gripe – Oseltamivir • Atípicas – Macrolídeos • Comunitárias – Amox/Clavulanato; Ceftriaxona • Hospitalares – Aminoglicosídeos + Ceftriaxona; Gatifloxacin; Cefepime; Imipenem; Vancomicina; Tigeciclina Microbiologia - PUCPR 43 TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR • Quem causa? • O que causa? • Como causa? • Quem está predisposto? • Como diagnosticar? • Como tratar? Microbiologia - PUCPR 44 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Microbiologia - PUCPR 45 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Microbiologia - PUCPR 46 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Quem não causa? • Microbiota normal – Inexistente – Contaminantes: bactérias da pele e do ar • ECN, • Difteróides • Bacillus Microbiologia - PUCPR 47 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Quem causa? • Patógenos bacterianos – Neisseria meningitidis (A, B e C) – Streptococcus pneumoniae – Haemophilus influenzae – RN - Streptococcus agalactiae, Listeria monocytogenes, Escherichia coli K1 – Raros: sífilis, tuberculose Microbiologia - PUCPR 48 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Quem causa? Vírus: Enterovírus, HSV 1 e 2, VZV, Caxumba, HIV Fungos: Cryptococcus neoformans Microbiologia - PUCPR 49 SISTEMA NERVOSO CENTRAL O que causa? • Sintomas – Dor de cabeça – Rigidez na nuca – Confusão mental – Febre – Dor no pescoço e nas costas – Vômitos e náuseas – Torpor (até coma) – Petéquias (meningite meningocóccica) Microbiologia - PUCPR 50 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Como causa? Contato •Nasofaringe •Corrente sanguínea •SNC (alguns vírus) Adesão • Fímbrias – células do SNC Multipli - cação • Superação da defesa/fagocitose • Bactérias capsuladas Microbiologia - PUCPR 51 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Como causa? Resposta • Ativação de astrócitos e microglia • Grande liberação de Citocinas – Inflamação aguda Sinais e sintomas • Edema cerebral- hipertensão craniana • Febre, dor de cabeça, rigidez de nuca... Evolução • Disseminação • Choque/Óbito - de rápida evolução • Eliminação Microbiologia - PUCPR 52 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Quem está predisposto? • RN e RN pré-maturos • Crianças 6m-2 anos • Idosos (>65a) • Cateter intra-craniano • Pacientes com sepsis • Imunocomprometidos (transplante, HIV, leucemias...) Microbiologia - PUCPR 53 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Como diagnosticar? • Material: – LCR – látex, cultura e PCR – Sangue - Hemocultura – Soro- látex • Transporte: temperatura ambiente – Ideal: ágar chocolate com CO2, em tubo – Rápido, sem refrigerar Microbiologia - PUCPR 54 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Como diagnosticar? • Cultura: – Bactérias comuns: Agar Sangue e Agar Chocolate – Atípicas: meios específicos – Viral: meios para isolamento de vírus Microbiologia - PUCPR 55 SISTEMA NERVOSO CENTRAL Como tratar? • Bacterias típicas: – Penicilina ou Ceftriaxona • BMR: – Ver epidemiologia local: ERV? KPC? Microbiologia - PUCPR 56 SISTEMA CIRCULATÓRIO Microbiologia - PUCPR 57 SISTEMA CIRCULATÓRIO Quem não causa? • Microbiota normal – Inexistente – Contaminantes: - bactérias da pele (ECN, Difteróides...) - bactérias do ar (Bacillus) Microbiologia - PUCPR 58 SISTEMA CIRCULATÓRIO Quem causa? • Patógenos – Gram negativos • E. coli, Klebsiella, Enterobacter, Proteus mirabilis, Salmonella • Pseudomonas aeruginosa, A. baumannii, S. maltophilia • Grupo HACEK – Gram positivos • S. aureus, S epidermidis, S. haemolyticus • S. pneumoniae, S. pyogenes, S. agalactiae • Enterococcus faecalis, E. faecium Microbiologia - PUCPR 59 SISTEMA CIRCULATÓRIO O que causa? • Sintomas – Febre alta / Calafrios – Mal estar / Choque – Hemorragia ungueal – Petéquias (pele e mucosas) – Murmúrio cardíaco (endocardite) Microbiologia - PUCPR 60 SISTEMA CIRCULATÓRIOComo tratar? • Bacterias típicas: – Ceftriaxona – Ceftazidima – Oxacilina • BMR: – Ver epidemiologia local: • Carbapenem, Vancomicina, Anfotericina... Microbiologia - PUCPR 61 SISTEMA CIRCULATÓRIO Como tratar? • Bacterias típicas: – Ceftriaxona – Ceftazidima – Oxacilina • BMR: – Ver epidemiologia local: • Carbapenem, Vancomicina, Anfotericina... Microbiologia - PUCPR 62 TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR • Como causa? – Infecção - pulmonar, sítio cirúrgico e de • Quem está predisposto? – Pacientes de UTI, Imunossuprimidos • Como diagnosticar? – Hemocultura (2 a 6 frascos ou outras amostras) • Como tratar? – Várai muito com suspeita clínica Microbiologia - PUCPR 63 TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR • Quem causa? • O que causa? • Como causa? • Quem está predisposto? • Como diagnosticar? • Como tratar? Microbiologia - PUCPR 64 PELE E FERIMENTOS Microbiologia - PUCPR 65 PELE E FERIMENTOS Microbiologia - PUCPR 66 PELE E FERIMENTOS • Sintomas: – Dor / eritema / edema/ febre – Secreção (serosa / purulenta) – Abscesso (subcutâneo / mucosa) – Crepitação ou Ulceração • Material: – Swab profundo ou punção de desc. purulenta – Aspirado de drenos / Aspirado de abscesso (punção) – Biopsia tecidual – Transporte: Stuart (até 24 h) Microbiologia - PUCPR 67 PELE E FERIMENTOS • Microbiota normal / contaminantes – Estafilcocos Coagulase Negativa e Bacillus spp. (BGP) • Patógenos – S. aureus, S. pyogenes, fungos – pele íntegra; – E. coli, Proteus, Klebsiella, Enterobacter – Pseudomonas aeruginosa, A. baumannii Microbiologia - PUCPR 68 Microbiologia - PUCPR 69 Microbiologia - PUCPR 70 Resumo • Ter noções clínicas • Saber o quê e onde coletar • Como devo transportar? • O quê devo valorizar como patógeno? • Quem comumente é contaminante / flora ? • Dúvidas? – Literatura, laboratórios, microbiologistas, colegas...
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