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02/03/2022 1 INTRODUÇÃO AO METABOLISMO CELULAR BIOQUÍMICA METABÓLICA E CLÍNICA 3º PERÍODO Prof.ª Me. JANAÍNA LOPES CÂMARA Introdução ao Metabolismo Metabolismo – é o conjunto das reações bioquímicas que ocorrem em um organismo Metabolismo energético parte do metabolismo que diz respeito ao armazenamento e utilização de energia Metabolismo de lipídios diz respeito a síntese e degradação de lipídios Metabolismo de glicídios diz respeito a síntese e degradação açúcares A unidade do metabolismo é a via metabólica: ✓Cada via metabólica tem uma função Para que serve na célula? ✓Cada via metabólica tem sua regulação Como é ligada e desligada? ✓Cada via metabólica tem suas conexões Com que outras vias se conecta? Mapa metabólico v v Tipos de metabolismo Energético: fornece e armazena energia. ✓ Glicose (participa da respiração celular) produzindo energia na forma de ATP. ✓ Lipídios e carboidratos também participam do metabolismo energético. Plástico ou de Construção ✓ Relacionado à formação de novas células gerando crescimento ou renovação de tecidos. ✓ As proteínas e os lipídios atuam nesse metabolismo (membranas celulares são lipoprotéicas). Metabolismo de controle. ✓ O DNA controla todas as atividades celulares e também produz o RNA, o qual produz as proteínas, como as enzimas, que aceleram as reações do metabolismo. Conjunto altamente organizado e complexo de reações bioquímicas, catalisadas e reguladas por enzimas. Estas reações se organizam em sequências enzimáticas denominadas VIAS METABÓLICAS. O metabolismo celular, apesar de ser muito complexo, possui vias metabólicas centrais. Metabolismo Celular Ti p o s d e V ia s M et ab ó lic a s S B C D P Substrato Inicial Intermediários Metabólicos Produto Final B S C D P E Substrato Inicial Intermediários Metabólicos Produto Final 1 2 3 4 5 6 02/03/2022 2 Algumas vias metabólicas centrais: ❖ Glicólise - oxidação da glicose para obter ATP; ❖ Ciclo de Krebs - oxidação do acetil-CoA para obter energia; ❖ Fosforilação oxidativa - síntese de ATP a partir da energia liberada pelo transporte de elétrons na cadeia respiratória; ❖ Via das pentoses-fosfato - síntese de pentoses e obtenção de poder redutor para reações anabólicas. ❖ Ciclo da uréia - eliminação de NH4 + sob formas menos tóxicas; ❖ -oxidação dos ácidos graxos - transformação de ácidos graxos em acetil-CoA, para utilização no ciclo de Krebs; ❖ Gliconeogênese - síntese de glicose a partir de moléculas mais pequenas, para utilização no cérebro. Vias Metabólicas Organização em vias metabólicas As vias consistem numa sequência de passos catalisados por enzimas; Enzimas podem encontra-se separadas ou formar complexos multienzimáticos ou formar sistemas associados a membranas. Enzimas Separadas Complexo multienzimático Sistema ligado à membrana As vias metabólicas são reguladas em 3 níveis: 1- Controle alostérico reversível: Ex: A primeira reação de muitas vias de biossíntese sofre inibição alostérica pelo último produto da via; 2- Regulação hormonal: coordenam as relações metabólicas entre tecidos diferentes; 3- Controle da velocidade de uma dada reação enzimática pela regulação da concentração celular da enzima responsável pela mesma: Em qualquer tempo, a concentração de uma enzima é o resultado de um equilíbrio entre a sua velocidade de síntese e sua velocidade de degradação. Regulação do Metabolismo S C D R Enzima 3 Enzima 2 Enzima 1 Enzima 6 Enzima 5 D Q Enzima 4 Síntese e degradação de uma molécula não pode ocorrer simultaneamente numa mesma célula ou tecido; Para que as rotas sejam controladas devem utilizar enzimas distintas e compartimentos celulares diferentes. Outra rota metabólica Compartimento A Compartimento B PP Regulação do Metabolismo ➢Rotas oxidativas de substratos energéticos; ➢Rotas de armazenamento e mobilização de substratos energéticos; ➢Rotas biossintéticas; ➢Rotas de detoxificação e excreção de resíduos. Rotas Metabólicas Termodinâmica Energia (Calor) Trabalho (movimento) Máquina à vapor Leis: 1ª Lei: Princípio da conservação da energia: A energia não pode ser criada nem destruída. Pode somente mudar a forma ou o local em que ela se apresenta 2ª Lei: Princípio da “desordem crescente” Nos processos espontâneos há uma tendência a aumentar o grau de desordem. o universo sempre tende para a desordem crescente: em todos os processos, naturais a entropia do universo aumenta. “Termodinâmica é o conjunto de princípios que regem as transformações de energia” 7 8 9 10 11 12 02/03/2022 3 Anabolismo e catabolismo A energia utilizada pelo o ser humano para manter suas atividades celulares, provém da modificação das moléculas celulares. Esse processo nos chamamos de metabolismo. Reações de síntese: São aquelas onde partículas simples são unidas, para forma compostos mais complexos. As reações onde as moléculas de aminoácidos se unem para forma as proteínas é uma reação de anabolismo. Reações de degradação: São aquelas que partículas mas complexas são quebradas e transformada em compostos simples. As reações de degradação que ocorre na molécula de glicogênio para forma a glicose é uma reação catabólica. Metabolismo Celular Catabolismo Anabolismo Energia Energia Reações endergônicas e exergônicas ➢ A reação química é mudança em que um ou mais compostos químicos, os reagentes, formam novos tipos de compostos, os produtos. ➢ Reações endergônicas: São aquelas que a quantidade de energia presente nas ligações químicas do produto, são maiores que as do reagente. ➢ Reações exergônicas: São aquelas que a quantidade de energia presentes nas ligações químicas dos reagente é maior do que as do produto . Mas seria muito complicado pra célula se ela usasse diretamente essas fontes para conseguir energia, pois precisariam de muitas enzimas em seu interior para poder quebrar as moléculas desses compostos e transformar em energia. As células, sozinhas, teriam que ter uma quantidade enorme de enzimas pra isso e seria um processo lento demais pra quantidade de energia que as células precisam. O que elas fazem então? Elas convertem a energia presente nessas moléculas de carboidratos, assim como proteínas e lipídios, em um único tipo de molécula de energia, chamada de ATP. Dessa forma, ao invés de ter de lidar com vários tipos de moléculas como carboidratos, proteínas e lipídios, a célula lida só com uma, que é a ATP. Ou seja, a função da Respiração Celular é transformar energia contida em compostos orgânicos em ATP para este fornecer energia para a célula. Nos alimentamos diariamente de inúmeros compostos orgânicos como: • Carboidratos • Proteínas • Lipídios Que podem servir como fonte de energia para as células. Catabolismo X Anabolismo ✓Catabolismo é a fase de degradação do metabolismo em que moléculas orgânicas de nutrientes (carboidratos, gorduras e proteínas) são convertidos em moléculas menores e mais simples: produtos (como o ácido láctico, CO2, NH3). ✓As vias Catabólicas liberam energia. Parte dessa energia é aprisionada: •na molécula de ATP •nos transportadores de elétrons (NADH, NADPH e FADH2), •o restante é perdida como calor. ✓No anabolismo (biossíntese) moléculas complexas (lipídios, polissacarídeos, proteínas, ácidos nucléicos) são produzidos à partir de precursores simples ; ✓As reações anabólicas exigem uma entrada de energia, geralmente sob a forma : ❖ das ligações fosfoanidrido do ATP ❖ do poder redutor do NADH, NADPH e FADH2 Macromoléculas •Proteínas •Polissacarídeos •Lipídeos •Ácidos nucléicos A n ab o lis m o C atab o lism o Nutrientes •Carboidratos •Gorduras •Proteínas Energia química Produtos finais •CO2 •H2O •NH3 Moléculas Precurssoras •Aminoácidos •Açúcares •Ácidos graxos •Bases nitrogenadas As fases catabólicas e anabólicas do metabolismo energético 13 14 15 16 17 18 02/03/2022 4 Como a energia é armazenada na célula? Nas ligações fosfato da molécula de ATP. ATP ➢ATP = Adenosina trifosfato ➢Armazena nasligações fosfatos a energia liberada na quebra da glicose. ➢Quando a célula precisa de energia para realizar alguma reação química, as ligações entre os fosfatos são quebradas, energia é liberada e utilizada no metabolismo celular. ATP – um carreador de grupamentos fosfato e de energia quimica Via glicolítica Fosforilação oxidativa Biossínteses Formação de gradientes (transporte) Movimentação celular Glicose Piruvato O2 + H+ + e- H2O ATP ADP + Pi Fosforilações Estrutura do Trifosfato de adenosina (ATP) P P Ribose Base P ATP Pensando simples Vias exergônicas (oxidações) Vias endergônicas Como sistema ATP—ADP funciona Quantidade de Energia Contida na molécula P fosfato P P Ribose Base ADP a b P P Ribose Base P ATP g a b Quando o fosfato se liga ao ADP absorve grande quantidade de energia, que fica armazenada na forma de uma ligação de alta energia ( ) Quando a ligação é quebrada essa energia é liberada Energia Adenina Pentose Fosfato A NUCLEOSÍDEO NUCLEOTÍDEO = AMP (Adenosina Monofosfato) ADP (Adenosina Difosfato) ATP (Adenosina Trifosfato) AMP , ADP & ATP Aceptores intermediários de H ➢NAD (nicotinamida-adenina-dinucleotídeo); ➢FAD (flavina-adenina-dinucleotídeo) São aceptores intermediários de hidrogênio, ligando-se a prótons H+ “produzidos” durante as etapas da respiração e cedendo-os para o oxigênio, que é o aceptor final de hidrogênios. Diferença entre NAD e FAD = quantidade de ATP que pode ser produzida através de cada um / NAD = 3 moléculas / FAD = 2 moléculas 19 20 21 22 23 24 02/03/2022 5 NAD FAD REDUÇÃO FAD NAD OXIDAÇÃO H REDUÇÃO H Quando examinamos uma molécula ou grupamento químico: ✓Oxigênio é um indicador de oxidação ✓Hidrogênio é um indicador de redução O NAD+ e FAD+ recolhem elétrons libertados no catabolismo; Catabolismo é oxidativo – substratos perdem H+; Anabolismo é redutivo - o NADPH e FADH fornecem elétrons para os processos anabólicos. H + H H2 Um exemplo de reação redox Lactato (álcool) Piruvato (cetona) Lactato desidrogenase ❖ Oxidação do lactato a piruvato: ✓Desidrogenação: dois elétrons e dois íons de hidrogênio (o equivalente a dois átomos de hidrogênio) são removidos do C-2 de lactato, um álcool, para formar piruvato, uma cetona. ✓Nas células a reação é catalisada pela enzima lactato desidrogenase e os elétrons são transferidos para um cofator chamado nicotinamida adenina dinucleotídeo (NAD+). NAD (Nicotinamida Adenina Dinucleotídeo) H+ ●¯ + H+ ❖ Composto orgânico, forma ativa da coenzima B3; ❖ Encontrado nas células dos seres vivos; ❖ Transportador de elétrons nas reações metabólicas de oxirredução; ❖ Importante papel na produção de energia para a célula. NADH e NADPH - transportadores solúveis de elétrons No NADP este grupo hidroxila é esterificado com fosfato P P Ribose Base Base P Fórmula esquemática do NAD(P)+ + NAD+ (NAD oxidado) NADH (NAD reduzido) nicotinamida adenina ✓Capacidade de se oxidar e se reduzir ✓A nicotinamida é o grupamento funcional ✓Incorpora um íon hidreto (H2 -) Ribose Funções do NAD e do NADP NAD → oxidação de combustíveis NADP → biossíntese Via glicolítica Ciclo de Krebs Oxidação de ácidos graxos Cadeia de transporte de elétronsNAD+ NADH O2 H2O Biossíntese de lipídeos Outras biossínteses Via das pentoses NADPH NADP+ Glicose (C6) Pentose (C5) Vias Anabólicas Vias Catabólicas Outras vias oxidativas Deficiência em niacina causa a Pelagra ✓Pelagra – do italiano “pele áspera” ✓Sintomas (3 Ds) •Dermatite •Diarréia •Demência ✓Nos EUA entre 1912 e 1916, 100.000 pessoas foram afligidas pela pelagra, ocorreram 10.000 mortes ✓Em 1920 Joseph Goldberguer mostrou que a pelagra era dívida à uma deficiência nutricional ✓Em 1937 um grupo de pesquisadores identificou a niacina como agente curativo para essa doença ✓O ácido nicotínico foi produzido pela primeira vez em laboratório à pratir da nicotina, daí seu nome. ✓Mas a ingestão de nicotina não tem nenhum efeito curativo sobre a pelagra Niacina (ácido nicotínico) Nicotinamida Nicotina 25 26 27 28 29 30 02/03/2022 6 FAD (Flavina Adenina Dinucleotídeo) H+ H+ ❖ Composto orgânico, forma ativa da coenzima B2; ❖ Capazes de aceitar reversivelmente 2 átomos de H+, formando FADH2; ❖ Ligadas fortemente a flavoenzimas que catalisam oxidação ou redução de um substrato. FAD e FMN transportadores de elétrons associados à proteínas Isoaloxazina (flavina) FADH• (FMNH• ) (Semiquinona) FADH2 (FMNH2) (Totalmente reduzido) FMN FAD Flavina adenina dinucleotídeo (FAD) e Flavina mononucleotídeo (FMN) P P Ribose R ib o s e Base Base P R ib o s e Base Pensando simples FAD FMN ✓Capacidade de oxirredução ✓Flavina é o grupamento funcional ✓Incorpora H2 1-Moléculas complexas são quebrados até a formação de seus blocos constituintes. 2- Oxidação das unidades monoméricas até a formação de ACETIL- CoA 3-Formação de ATP, NADH e FADH2 a partir de ACETIL- CoA 4- Síntese de ATP a partir de NADH e FADH2 glicose Ácidos graxos aminoácidos Ciclo de krebs Cadeia transportadora de elétrons Fase 1 da respiração Oxidação de substratos energéticos Fase 2 da respiração Produção de ATP a partir da fosforilação oxidativa Respiração Celular Processo pelo qual a glicose é degradada em CO2 e H2O na presença de oxigênio. Rendimento → 38 ATPs por molécula de glicose quebrada. Daqui pra frente, é um resumão do que será mostrado de forma mais detalhada nas próximas aulas, ok. Glicólise (Citosol) Ciclo de Krebs ou Ciclo do ácido cítrico ou Ciclo do ácido tricarboxílico (Mitocôndria) Cadeia transportadora de elétrons e Fosforilação oxidativa (Mitocôndria) 31 32 33 34 35 36 02/03/2022 7 ETAPAS DA RESPIRAÇÃO NA MITOCÔNDRIA Respiração Celular Fases: ✓ Anaeróbia (glicólise): não necessita de oxigênio para ocorrer e é realizada no citoplasma. ✓ Aeróbia (ciclo de Krebs e cadeia transportadora de elétrons): requer a presença de oxigênio e ocorre dentro das mitocôndrias. Respiração Celular Equação geral: C6H12O6 + 6O2→ 6CO2 + 6H2O + 38 ATP Mitocôndria Formada por 2 membranas. Membrana externa é lisa e controla a entrada/saída de substancias da organela. Membrana interna contém inúmeras pregas chamadas cristas mitocondriais, onde ocorre a cadeia transportadora de elétrons. Cavidade interna é preenchida por uma matriz viscosa, onde podemos encontrar várias enzimas envolvidas com a respiração celular, DNA, RNA e pequenos ribossomos. É nessa matriz mitocondrial que ocorre o ciclo de Krebs. Mitocôndria Glicose - proveniente da dieta ou produção endógena é degradada pelo organismo com o principal propósito de liberar energia. Glicólise aeróbica: é a degradação da glicose na presença de O2, produto final o piruvato que é transportado para dentro da mitocôndria para completar sua oxidação até CO2 e H2, ativando o ciclo de krebs e a cadeia respiratória. Glicólise anaeróbica: degradação da glicose sem a necessidade de O2, produto final ácido lático. Utilizada quando exercícios rigorosos são realizados. 37 38 39 40 41 42 02/03/2022 8 É a sequência metabólica de várias reações enzimáticas, na qual a glicose é oxidada produzindo: 2 moléculas de Ácido Pirúvico (Piruvato) 2 moléculas de ATP 2 equivalentes reduzidos de NAD+, que serão introduzidos na cadeia respiratória ou na fermentação. GLICÓLISE glicose + 2 NAD+ + 2 ADP + 2 Pi 2 NADH + 2 ácido pirúvico + 2 ATP + 2 H2O Funções da Via Glicolítica ➢ Transformar glicose em piruvato. ➢ Sintetizar ATP com ou sem oxigênio. ➢ Preparar a glicose para ser degradada totalmente em CO2 e H2O. ➢ Permitir a degradação parcial da glicose em anaerobiose. ➢ Alguns intermediários são utilizados em diversos processos biossintéticos. Ciclo de Krebs Nomes: ciclo do ácido cítrico ou ácido tricarboxílico. Mentor: Hans Adolf Krebs, 1953. Local: matriz mitocondrial Procedimento: ◦ Piruvato→ acetil: liberação de CO2 e H. ◦ Acetil → Acetil-coenzima A (acetil-CoA) : entra no ciclo de Krebs. ◦ Ciclo de Krebs: liberação de CO2, ATP, NADH, FADH2 Obs.: todo o gás carbônico liberado na respiração provém da formação do acetil e do ciclo de Krebs. Todo carbono responsável pela formação do acetilCoA é degradado em CO2 que é então liberado pela célula, caindo na corrente sanguínea. Ciclo de Krebs São liberados vários hidrogênios, que são então capturados pelos NAD e FAD, transformando-se em NADH e FADH2. Ocorre também liberação de energia resultando na formação de ATP. Cadeia respiratória Função: formação de ATP Local: crista mitocondrial Procedimento: Fosforilação oxidativa: transferência de hidrogênios pelos citocromos, formando ATP e tendo como aceptor final o oxigênio e a formação de água Obs.: O rendimento energético para cada molécula de glicose é de 38 moléculas de ATP. 43 44 45 46 47 48 02/03/2022 9 Glossário – responder no caderno!!! 1) Defina os seguintes termos: metabolismo, catabolismo, anabolismo, reações endergônicas e exergônicas, reações de oxidação e redução. Metabolismo: Catabolismo: Anabolismo: Reações exergônicas: Reações endergônicas: Reações de oxidação: Reações de redução: Reações de oxidação-redução: Estudo Dirigido 1) De que forma as reações do catabolismo e do anabolismo estão relacionadas? 2) Como a energia fica armazenada na molécula do ATP? (Que tipo de energia é essa: térmica, mecânica, química, elétrica?) 3) Qual a função do NAD+? Que outra molécula tem a mesma função que o NAD+ nos organismos vivos? 4) O que é metabolismo aeróbico? E anaeróbico? 5) Descreva a morfologia da mitocôndria, dizendo qual é o papel dela na célula e cite exemplo de célula que não contém mitocôndria: 6) O que é glicólise? Quais são os produtos obtidos ao final da glicólise? Em que local da célula ocorre a glicólise? 7) O que ocorre na primeira etapa da glicólise? E na segunda? 8) Como é regulada a via glicolítica? 9) Qual o destino do piruvato em anaerobiose? E qual a importância dessa transformação? REFERÊNCIAS 1. DEVLIN, T.M. Manual de bioquímica com correlações clínicas. 7. ed. São Paulo: Blücher, 2011. 2. MOTTA, V.T. Bioquímica. 2. ed. Rio de Janeiro: MedBook, 2011 3. NELSON, D.L.; COX, M. M. Princípios de bioquímica de Lehninger. 7. ed. Porto Alegre: Artmed, 2019. 49 50 51 52