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DISCIPLINA: Microbiologia Zootécnica Turma: Zootecnia – 4º período 2º semestre de 2015 UNIPAM – CENTRO UNIVERSITÁRIO DE PATOS DE MINAS AULA 1 INTRODUÇÃO CARACTERÍSTICAS GERAIS de BACTÉRIAS, FUNGOS, PROTOZOÁRIOS e VÍRUS INTRODUÇÃO 2 Por que estudar microbiologia zootécnica? Qual a sua importância na zootecnia? Existe relação com nossas áreas de interesse? Decomposição, putrefação, fermentação Produção de volumoso e produtos de origem animal Toxinas Etiologia e patologia de doenças O que estudaremos? Microrganismos e suas utilidades/relações zootécnicas • Quais microrganismos? Bactérias, fungos, protozoários, vírus e algas DISTRIBUIÇÃO dos MICRORGANISMOS 3 Procariotas: bactérias e cianobactérias* (* obtêm energia por fotossíntese) - Organismos unicelulares sem membrana nuclear Eucariotas: protozoários, fungos e algas - com membrana nuclear Eucariota Procariota Material genético não envolvido por membrana PRINCIPAIS DIFERENÇAS ENTRE PROCARIOTAS E EUCARIOTAS 4 CARACTERÍSTICA FUNÇÃO PROCARIOTA EUCARIOTA Divisão celular Multiplicação celular Não-mitótica Mitótica Aparelho mitótico Divisão mitótica Ausente Presente Membrana nuclear Delimitar o material genético Ausente Presente Mitocôndria Respiração celular e prod. de energia Ausente Presente Lisossomo Degradação de partículas, reciclagem Ausente Presente Ribossomo Síntese de proteínas e enzimas 70 S 80 S Aparelho de Golgi Processar e distribuir proteínas Ausente Presente Cromossomo Específicas e diversas Único Múltiplo Parede celular Proteção e forma Na maioria Em algumas Esteróis na membrana ------- Raro Presente Fagocitose Englobar partículas e digerí-las Ausente Facultativo Pinocitose Auxiliar a fagocitose Ausente Facultativo Fonte: modificado de Burnett & Schuster (1973). 5 Principais procariotas: bactérias Principais eucariotas: fungos, algas e protozoários Eucariota Procariota Classificação dos seres vivos, de acordo com Whittaker (1969) (Adaptado de Pommerville, J.C.(2004) Alcamo's Fundamentals of Microbiology) 6 BACTÉRIAS PARTES ESSENCIAIS: encontradas em todas as bactérias 8 Área nuclear: não envolvida por membrana nuclear. Plasmídeos: Encontram-se dispersos no citoplasma ou incorporados na fita de DNA circular; Sua função é benéfica para a célula que o abriga; Possuem informação do tipo resistência a antibióticos, produção de toxinas e determinadas enzimas; Essas informações são transmitidas através da conjugação. 9 Membrana celular: formada por fosfolipídeos e proteínas; Mesossomo: principal estrutura envolvida com a multiplicação celular (fissão binária); Parede celular: estrutura rígida constituída por peptidoglicano; confere forma a célula; Ribossomo: participa da divisão celular; tamanho menor que das células eucariotas. PARTES ESSENCIAIS: encontradas em todas as bactérias PARTES NÃO-ESSENCIAIS 10 Cápsula: camada viscosa de natureza proteica ou polissacarídica envolve externamente algumas bactérias relacionada com a virulência da bactéria proteção contra dessecação, anticorpos, fagocitose Membrana externa: encontrada nas bactérias Gram-negativas formada de lipoproteínas, lipopolissacarídeos e porinas Flagelo: motilidade Fíbria ou pili: menor que os flagelos, aparecem em algumas bactérias Gram-negativas promovem a aderência da bactéria serve para transferência de material genético na conjugação bacteriana Grânulos de reserva: de natureza química variada (pigmentos); PARTES NÃO-ESSENCIAIS 11 Esporo: estrutura de resistência aparece em poucas bactérias: Clostridium spp. e Bacillus spp. condição de dormência celular Passagem do esporo para a forma vegetativa 1) Ativação: processo de germinação do esporo; 2) Germinação: término do processo de dormência; 3) Crescimento interno: síntese de novas macromoléculas; Esporo cél. vegetativa 4) Crescimento: processo de reprodução da cél. vegetativa. ESTRUTURA GERAL DAS BACTÉRIAS 12 Organismos procariotas comuns (adesinas) e sexuais (conjugação) CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS 13 Quanto à Forma • Cocos: grande maioria são Gram-positivos formas: diplococos, estreptococos, estafilococos, tétrades e sarcina. • Bacilos: predominantemente Gram-negativos formas: diplobacilos e estreptobacilos • Espiralados: se dividem em vibrio, espirilo e espiroquetas. - Quanto à forma CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS 14 CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS 15 Quanto à distribuição de flagelos: divididas em função do número e disposição • Atríquias: sem flagelos • Monotríquias: um único flagelo (A) • Lofotríquias: tufo de dois ou mais flagelos em um dos pólos (B) • Anfitríquias: um ou mais flagelos em cada pólo (C) • Peritríquias: vários flagelos ao redor da bactéria (D) CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS 16 Quanto a temperatura ótima de crescimento • Esternotermos: conseguem crescer em uma pequena faixa de temperatura, menor que 10°C; • Euritermos: crescem mesmo que a temperatura varie entre 30 e 40°C • Psicrófilos: menor que 20°C • Mesófilos: entre 20°C e 45°C • Termófilos: maior que 45°C • Hipertermófilos: maior que 80°C IMPORTANCIA? - Conservação de alimentos (pasteurização, cozimento, congelamento) - Pasteurização Classificação das bactérias quanto a temperatura ótima de crescimento 17 (Adaptado de Madigan et al., Brock Biology of Microorganisms, 2003.) CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS 18 Quanto à necessidade de oxigênio Microrganismos aeróbios estritos: necessitam de oxigênio • Aceptor final de elétrons na síntese de energia via cadeia respiratória • Requerido em pequenas quantidades em determinadas reações enzimáticas Microrganismos anaeróbios estritos: • O oxigênio é tóxico mesmo em pequenas concentrações Quanto à salinidade parâmetro bastante conhecido para as Halófilas (que habitam ambientes salinos) Técnica utilizada para inibir crescimento microbiano em alimentos CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS 19 Quanto à fonte de energia e carbono • Autótrofas: utilizam uma fonte de carbono inorgânica ou uma fonte de energia luminosa • Heterótrofas: necessitam de compostos orgânicos para seu crescimento. Quanto ao pH • maior parte possui um pH ótimo para crescimento próximo da neutralidade • valores mínimos (5) e máximos (9) de pH para o crescimento • Maioria das cianobactérias cresce em pH ótimo maior que 7 * Fungos: preferem ambiente ácido (pH mínimo entre 1 e 3; ótimo ± 5) * Protozoários: pH entre 5 e 8; ótimo ± 7 Classificação das bactérias quanto à fonte de energia e carbono 20 Classificação das bactérias quanto à fonte de energia e carbono 21 Quanto à característica de coloração CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIAS 22 Christian Gram – patologista dinamarquês Método desenvolvido em 1880 MÉTODO DE GRAM Envelope celular de uma bactéria gram-positiva Bactérias Gram-Positivas versus Gram-Negativas 23 Tamanho: 30-100 nm 40-80% - peptidoglicano (polímero) Prescott et al. (1996). Tamanho:20-30 nm 40-80% - peptidoglicano (polímero) Presença de uma membrana externa Prescott et al. (1996). Bactérias Gram-Positivas versus Gram-Negativas 24 Envelope celular de uma bactéria gram-negativa TIPOS DE REPRODUÇÃO 25 Fissão binária - forma assexuada - células com mesmo genoma da célula mãe TIPOS DE REPRODUÇÃO 26 Transformação - forma sexuada: quando há transferência de DNA de uma célula para outra - Absorvem DNA do meio - Usado na Engenharia Genética (transferência de genes entre bactérias) TIPOS DE REPRODUÇÃO 27 Transdução - forma sexuada: quando há transferência de DNA de uma célula para outra - DNA é transferido entre bactérias usando vírus como vetores (bacteriófagos) TIPOS DE REPRODUÇÃO 28 Conjugação - forma sexuada: quando há transferência de DNA de uma célula para outra - DNA é transferido diretamente da bactéria doadora (“macho”) para a receptora - Material genético se recombina e será transmitido nas próximas gerações Conjugação bacteriana mostrando o pili sexual (macho) TIPOS DE REPRODUÇÃO 29 Esporulação: em condições ambientais adversas forma de defesa CURVA DE CRESCIMENTO BACTERIANA 30 Fase Lag: síntese de macromoléculas requeridas para a replicação Fase Log: células se dividem a uma taxa constante Fase estacionária: células em condições de suprimento de energia e nutrientes exauridos Fase de morte: algumas bactérias morrem e outras sobrevivem Para demonstrar o crescimento de uma população bacteriana, usamos um gráfico semi-logarítmico. EXIGÊNCIAS NUTRICIONAIS 31 MEIOS DE CULTURA UTILIZADOS 32 MEIOS DE CULTURA UTILIZADOS 33 34 Fatores que influenciam na morte dos microrganismos: • Quantidade de água presente no meio: menor quantidade, menor será a temperatura para destruir os microrganismos • pH do meio: maior resistência ao calor em pH próximo a 7 • Composição do meio: meios ricos em proteínas protegem melhor os microrganismos do calor • Idade das células microbianas: velhas são mais resistentes • Formação de esporos: são mais resistentes que células vegetativas FUNGOS CARACTERÍSTICAS 36 Possui características de vegetais e animais → por isso classificados em um reino a parte: Fungi Principais espécies: fungos, líquens e algas do gênero Prototheca São eucariontes: possuem membrana nuclear Não formam tecidos verdadeiros como plantas e animais Não possuem pigmento fotossintético Saccharomyces cerevisiae CARACTERÍSTICAS 37 Armazenam glicogênio (igual aos animais) Parede celular rígida (de quitina basicamente) Micélio e ascocarpo são as estruturas típicas - micélio é visível a olho nu CARACTERÍSTICAS 38 Micélio e ascocarpo são as estruturas típicas - micélio é visível a olho nu CARACTERÍSTICAS 39 São unicelulares → leveduras São multicelulares (filamentosos) → bolores e cogumelos Esporos assexuados representam a forma mais comum de multiplicação Bastante adaptáveis: pH de 2 a 8,5; temperatura de - 10 oC a mais de 45 oC CLASSIFICAÇÃO 40 Fungos limosos – Fungos inferiores flagelados – Fungos terrestres Fungos terrestres: - maioria produz micélio bem desenvolvido - possui reprodução assexuada e sexuada - espécies mais conhecidas: leveduras, bolores, cogumelos, mofo - 4 grupos importantes: Zygomycetes, Ascomycetes Basidiomycetes, Deuteromycetes CLASSIFICAÇÃO 41 REPRODUÇÃO 42 • Maioria se reproduz por meio de esporos: forma assexuada REPRODUÇÃO 43 TIPOS DE REPRODUÇÃO 44 Brotamento - Forma assexuada de reprodução em fungos TIPOS DE REPRODUÇÃO 45 Fragmentação: forma assexuada - forma mais simples de um fungo filamentoso se reproduzir - um micélio se fragmenta originando novos micélios BENEFÍCIOS 46 Produção de alimentos (queijos Gorgonzola, Roquefort, Camembert) Produção de aromas (salames, salsichas) Produção de enzimas industriais: hidrolíticas, proteolíticas, celulolíticas... Produção de conservantes (ácidos glucônico, cítrico, fumárico e succínico) Produção de celulase (degradação da celulose – ruminantes) Arambel (1988): - Aspergillus oryzae para vacas pode aumentar a gordura do leite - Saccharomyces cerevisiae (levedura) e Aspergillus oryzae (bolor) tende a aumentar o numero de bactérias celulolíticas no rúmem Fonte proteica para aves e suínos (Chavez et al., 1988) Produção de antibióticos para aves e suínos PREJUÍZOS 47 Deterioração de silagens e fenos Produção de micotoxinas - Abortos e problemas reprodutivos - Menor produção - Morte PROTOZOÁRIOS PROTOZOÁRIOS 49 Microrganismos eucarióticos e unicelulares Não apresentam parede celular rígida e não contêm clorofila Podem apresentar apêndices para locomoção: - Cílios: curtos e finos - Flagelos: longos, em forma de chicote PROTOZOÁRIOS 50 Amebas: arrastam-se, emitindo parte da célula em determinada direção Movimento amebóide PROTOZOÁRIOS 51 Amplamente distribuídos na natureza: - Vida livre (água e solo) ou simbiontes (dentro ou sobre hospedeiros vivos) - principalmente em ambientes aquáticos - alguns poder causar doenças: ex.: coccidiose; malária - alguns são úteis: rúmen Absorvem nutrientes dissolvidos Alguns são predadores: ingerem bactérias e outros protozoários CLASSIFICAÇÃO dos PROTOZOÁRIOS 52 Flagelados: fitoflagelados e zooflagelados - Reprodução assexuada por fissão binária longitudinal - Autotróficos e/ou heterotróficos - Possui um ou mais flagelos - Comensais, simbiontes e parasitas - Principais gêneros: Leishmania, Trypanosoma, Giardia, Trichomonas CLASSIFICAÇÃO dos PROTOZOÁRIOS 53 Ciliados: maior grupo, com cerca de 7200 espécies - Cílios também podem servir para obtenção de alimentos - Reprodução assexuada por fissão transversal - Reprodução sexuada sem formação de gametas - 1/3 das espécies são parasitas, restante de vida livre (água e solo) - Principais gêneros: Paramecium, Euplotes, Didinium, Balantidium Controla a reprodução Controla o metabolismo CLASSIFICAÇÃO dos PROTOZOÁRIOS 54 Amebas - Maioria das espécies é de vida livre - Reprodução assexuada por fissão, reprodução sexuada com gametas flagelados - Movimento amebóide e alimentação por meio de pseudópodes - Principal gênero: Amoeba CLASSIFICAÇÃO dos PROTOZOÁRIOS 55 Sporozoa - Estágio de formação de esporo durante o ciclo de vida - Reprodução assexuada por fissão múltipla, reprodução sexuada com união de gametas - Todas espécies são parasitas - Geralmente não são móveis - Principais gêneros: Toxoplama, Plasmodium VÍRUS VÍRUS 57 Representam o limite entre as formas vivas e sem vida Não são células como outros microrganismos discutidos Considerados agentes infecciosos de plantas, animais e microrganismos 10 a 100 vezes menores e mais simples que uma bactéria (vistos somente em microscópio eletrônico) - Contem somente um tipo de ácido nucléico: DNA ou RNA - Não possuem estruturas celulares para metabolismo ou reprodução por isso somente se reproduzem no interior de célulasvivas processo chamado de replicação - Parasitas intracelulares obrigatórios 58 VÍRUS BACTERIÓFAGO 59 MULTIPLICAÇÃO VIRAL: REPLICAÇÃO 60 Só ocorre no interior de outra célula MULTIPLICAÇÃO VIRAL: REPLICAÇÃO 61 Só ocorre no interior de outra célula CONSIDERAÇÕES FINAIS 62 Conhecimento das características microbianas é extremamente importante: - Usá-los na produção de alimentos - Usá-los em beneficio da produção animal - Usá-los na produção de medicamentos, enzimas, vacinas - Controle microbiológico de ambientes e instalações - Prevenção, controle e tratamento de doenças EXERCÍCIOS Qual a diferença básica entre células eucariontes e procariontes? Cite exemplos de microrganismos eucariontes e procariontes. Explique e exemplifique a relação existente entre microbiologia e zootecnia. Porque é importante saber a classificação das bactérias quanto a temperatura ótima de crescimento? Cite exemplos de onde e de que forma os microrganismos podem ser úteis à criação de animais e produção de alimentos.
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