Biolog. Molec. Farma

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GABARITO | Avaliação I - Individual
(Cod.:1018879)
Peso da Avaliação 2,00
Prova 97346729
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00
"A clonagem de genes possui variadas aplicações na área de pesquisa, por meio do 
conhecimento da organização de genomas, da sequência de genes e suas proteínas 
codificadas, da criação de bibliotecas de DNA e cDNA, além de produtos que 
beneficiam a sociedade, como a produção de enzimas industriais, produção de insulina 
humana, vacinas, hormônios de crescimento e melhoramento genético".
Fonte: CALEFFE, R. T. T.; OLIVEIRA, S. R.; FREITAS, A. C. O.; KIDO, K. K.; 
GARCIA, A.; PAMPHILE, J. A. Clonagem de genes: métodos e aplicações. Revista 
UNINGÁ, v. 47, p. 73-77, jan./mar. 2016. Disponível em: 
http://revista.uninga.br/index.php/uninga/article/view/1252/874. Acesso em: 5 fev. 
2021.
Sobre as principais diferenças entre essas técnicas, destacando os objetivos de cada uma 
delas, analise as sentenças a seguir:
I- As Bibliotecas de DNA ou cDNA são grandes coleções de material genético mantidas 
em colônias de bactérias, nas quais um fragmento específico de DNA ou um gene 
podem ser procurados.
II- Uma biblioteca de DNA é formada por fragmentos originados a partir de um DNA 
genômico. Já uma biblioteca de cDNA é formada por sequências codificantes dos genes 
que estavam expressos na forma de mRNA em uma determinada amostra.
III- A formação das bibliotecas de DNA e cDNA permite que fragmentos clonados 
sejam mantidos e replicados por tempo indeterminado.
Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças I, II e III estão corretas.
B Somente a sentença I está correta.
C As sentenças II e III estão corretas.
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D Somente a sentença II está correta.
E Somente a sentença III está correta.
Na área da saúde, percebemos a importância das moléculas de DNA e RNA para a vida 
dos organismos em geral. Dessa forma, identificar e diferenciar moléculas de DNA e 
RNA é essencial para o bom desempenho como molecular. Considerando esse fator, é 
representado abaixo uma sequência genética específica. 
“AAATATAGGACCCAATCATG”I – A sequência se refere a uma molécula de DNA. 
II – A sequência é referente a uma molécula de RNA. 
III – A sequência se refere aos aminoácidos de uma proteína.
IV- A sequência é representada por DNA, que pode ser convertido em RNA com a 
substituição de U por T. 
É correto o que se afirma em:
A Somente a sentença II está correta. 
B Somente a sentença I está correta.
C Somente a sentença III está correta. 
D Somente a sentença IV está correta.
E As sentenças I e IV estão corretas.
A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as 
sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de 
amplificar a molécula. 
Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA:
A
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado
em fragmentos de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços.
A cada novo nucleotídeo adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e
a detecção ocorre em tempo real.
B Nenhuma das alternativas é correta.
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C
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas
sólidas, nas quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser
sequenciado, formando uma biblioteca de DNA.
D
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que
o DNA a ser sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são
acoplados a uma placa de vidro por meio de primers adaptadores, formando uma
biblioteca de DNA, que será submetida ao PCR.
E
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de
DNA de forma portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em
pequenos equipamentos, semelhantes a pen drives. A plataforma SMRT é a mais
utilizada.
Existem várias técnicas e combinações genéticas utilizadas para identificar e diferenciar 
DNA e RNA em amostras biológicas. 
Considerando as técnicas moleculares, correlacione as colunas:I - PCR 
II - RT – PCR
III - Hibridização 
(   )  Usada para amplificar e identificar sequências de DNA específicas. Os primers 
específicos para a sequência alvo de DNA são utilizados para iniciar a amplificação.
(   ) Envolve a transcrição reversa do RNA em cDNA (DNA complementar) seguida 
pela amplificação desse cDNA por PCR. Isso permite a identificação de RNA através da 
conversão em DNA.
(    ) Utilizada para detectar e localizar a presença ou ausência de sequências específicas 
de DNA ou RNA em células e tecidos. As sondas fluorescentes são hibridizadas com 
alvos específicos no material biológico.
É correto o que se afirma em:
A A sequência correta é II, III e I. 
B A sequência correta é III, II e I. 
C A sequência correta é I, II e III.
D Todas as alternativas estão incorretas. 
E A sequência correta é I, III e II.
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[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa 
prática depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares 
após a desnaturação (período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de 
fusão do DNA, ou seja, o momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e 
a abertura da dupla fita de DNA, varia de um organismo para outro. O ponto de fusão 
do DNA também depende da quantidade de pares de base G-C e A-T, sendo que, quanto 
mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre porque o par G-C é 
mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta apenas 
com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o 
padrão de hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de 
fusão, outros fatores podem interferir na hibridização da sonda de DNA. 
Sobre esses fatores, analise as opções a seguir:I- Temperatura de fusão.
II- pH alto para produzir condições de hibridização.
III- Concentração de cátions monovalentes.
IV- Presença de solventes orgânicos.Assinale a alternativa CORRETA:
A As sentenças II, III e IV estão corretas.
B As sentenças I, II, III e IV estão corretas.
C Somente a sentença III está correta.
D Somente a sentença II está correta.
E Somente a sentença I está correta.
As bibliotecas de DNA e cDNA são essenciais para manter e replicar um fragmento 
clonado por tempo indeterminado. 
Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir: 
I- Biblioteca de cDNA.
II- Biblioteca de DNA.
III- Hibridização em colônia.
( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em 
meio de cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, 
isolamento e sequenciamento do genoma.
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( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca 
diferente, considerando o padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a 
sua função. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - III - II.
B I - II - III.
C Nenhuma dasalternativas está correta.
D II - I - III.
E III - II - I.
O sequenciamento Shotgun, o qual é aplicado como estratégia para o sequenciamento 
de grandes sequências de nucleotídeos, especialmente genomas inteiros dos mais 
diversos organismos. 
Sobre o sequenciamento Shotgun, avalie as asserções a seguir e relação proposta entre 
elas:
I- Devido ao grande volume de informação gerado por esse procedimento, é necessário 
que programas computacionais sofisticados sejam utilizados para a determinação da 
sequência do material em estudo.
PORQUE
II- Na técnica Shotgun, o material clonado é sequenciado diversas vezes, fornecendo 
uma quantidade de dados de cerca de 10 vezes o tamanho do material genético que está 
sendo estudado, assegurando que todos os nucleotídeos presentes no material genético 
sejam detectados e inseridos na sequência final do DNA. 
Assinale a alternativa CORRETA:
A As asserções I e II são falsas.
B As asserções I e II são verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I.
C A asserção I é uma proposição verdadeira e a II é uma proposição falsa.
D As asserções I e II são verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I.
E A asserção I é uma proposição falsa e a II é uma proposição verdadeira.
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Existem diferentes formas de sequenciar um genoma, sendo que cada uma se aplica 
dependendo da realidade do pesquisador em questão, podendo ser técnicas recentes, 
que são mais robustas e sofisticadas, ou então, técnicas mais antigas, que, ainda assim, 
demonstram um excelente resultado, apesar de serem mais complicadas e menos 
automatizadas. 
Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:
 I- Sequenciamento de Sanger.
II- Next Generation Sequencing.
III- Sequenciamento de terceira geração.
( ) Método de primeira geração, mais conhecido por utilizar nucleotídeos terminados de 
cadeia (ddNTP).
( ) Método que permite a análise da sequência de nucleotídeos em uma única molécula 
de DNA, sem a necessidade de amplificação dessa molécula, em tempo real.
( ) São métodos de nova geração, que não utilizam nucleotídeos terminadores de cadeia 
para o processamento das amostras. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - II - III.
B Nenhuma das alternativas está correta.
C III - II - I.
D I - III - II.
E II - I - III.
Os ciclos do PCR (reação em cadeia da polimerase) são críticos para o sucesso da 
técnica. Em torno de 20-40 ciclos são programados no termociclador, a fim de se obter 
milhares de cópias de DNA. 
Sobre os ciclos do PCR associe os itens, utilizando o código a seguir:I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
( ) Estágio em que os primers se ligam à fita do DNA na sua sequência complementar.
( ) Estágio inicial, em que ocorre abertura da dupla fita, liberando os nucleotídeos de 
cada uma das fitas simples. Esta etapa ocorre em uma alta temperatura, em cerca de 95º 
C.
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( ) Estágio correspondente à adição de nucleotídeos pela DNA polimerase específica, 
denominada como Taq DNA polimerase, em uma temperatura de 72º C. 
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A III - II - I.
B I - III - II.
C II - I - III.
D I - II - III.
E Nenhuma das alternativas é correta.
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Conforme o sumário da 
prática, os ácidos nucleicos apresentam características estruturais específicas, que 
permitem que sejam isolados e manipulados para diversos tipos de aplicações. A 
técnica de hibridização in situ, por exemplo, baseia-se na complementaridade das fitas 
de DNA ou RNA, utilizando sondas fluorescentes para a detecção da fita complementar 
em uma determinada amostra. Essa técnica permite o estudo da expressão gênica. Outra 
técnica, que também tem o mesmo princípio e finalidade, é a reação em cadeia da 
polimerase transcriptase reversa (RT-PCR), muito utilizada no diagnóstico de algumas 
infecções e doenças. Considerando esses aspectos, o primeiro passo para a maioria das 
técnicas citadas é o isolamento e a purificação das moléculas de DNA e RNA. O 
processo de extração do DNA pode ser dividido em etapas. 
Com relação às etapas visualizadas na aula prática, assinale a alternativa CORRETA:
A A segunda etapa é denominada como Etapa de Ligação, em que é adicionado álcool
96% no eppendorf, homogeneizado, e 640 µl são transferidos para o tubo spin.  
B A mensuração da amostra não considera a leitura do "blank".
C O principal composto adicionado na Etapa de Ligação é a Proteinase K.
D Na Etapa de Lavagem, são adicionados 210 µl de álcool 96%.
E A primeira etapa é a Etapa de Ligação, em que adicionamos 250 µl de Proteinase K,
20 µl da amostra e 20 µl do tampão de lise S.
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