prova 3 (prática)

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CARACTERIZAÇÃO
Proteínas reagem formando produtos coloridos. Reação de ninhidrina caracteriza grupo amino, e de biureto caracteriza lig peptídicas. Ninhidrina: grupos α-amino e ε-amino da lisina reagem formado produto violeta na sol. aquecida. Intensidade da cor proporcional à concentração. Biureto: reage com ligs peptídicas; positiva para peptídeos com mais de 2 aa’s e proteínas; coloração lilás; dipeptídeos dão reação negativa por conter apenas uma lig peptídica.
PRECIPITAÇÃO
Solubilidade de proteínas depende de grupos hidrofóbicos e hidrofílicos, pH, conc de sai e cte dielétrica. Podem possuir muitos grupos carregados que interagem com sais em solução aumentando a solubilidade. Quando a interação prot-prot é muito grande ela tende a ser insolúvel. Desnaturação diminui a solubilidade; temps elevadas, pH extremo sais de metais pesados desnaturam prot; pH extremo altera a ionização de aa’s, afetando as interações iônicas. A ligação de cátions pesado forma sais insolúveis com a proteína, que precipita. Solventes orgânicos apresentam constante dielétrica muito baixa, o que favorece a interação prot-prot, precipitando.
SALTING OUT
Presença de sal em elevada força iônica; proteínas podem precipitar sem desnaturar; a adição de sal remove a agua de hidratação das moléculas, aumentando a interação prot-prot
SALTING IN
Em baixa força iônica o sal aumenta a solubilidade de varias prot; proteína interage mais com o sal e diminui a interação prot-prot
	HIDRÓLISE ACIDA E ENZIMATICA DO AMIDO
Amido: uma cadeia de amilose (glu lig α1-4) e uma cadeia de amilopectina (glu lig α1-4 com ramificações α1-6). Enzimática: amilase catalisa a hidrólise; a α-amilase quebra as lig α1-4 da amilose, amilopectina e glicogênio, produzindo oligossacarídeos (inicialmente), que são degradados à maltotriose e maltose. A amilase não quebra maltose. Ácida: com ácidos forte e sob aquecimento a 100ºC as lig são hidrolisadas; ac a quente hidrolisa as α1-4 e α1-6; dextrinas e oligossacarídeos como prod intermediários, e glu como prod final.
REAÇÃO COM IODO
Forma complexo negro-azulado com a amilose, e vermelho-violácea com a amilopectina. As dextrinas intermediarias podem gerar colorações levemente diferentes (as maiores ficam púrpura ou azul, as médias ficam avermelhadas, e as menores não geram cor)
DOSAGEM DE AÇUCARES REDUTORES PELO 3,5-DINITROSALICILATO (DNS)
Na hidrólise do amido são liberadas unidades de glu que em meio muito alcalino e quente formam enedióis. Estes podem reduzir o DNS (amarelo forte) a 3-amino-5-nitrosalicilato (laranja-marrom forte). Pela determinação da luz absorvida pelo 3-amino-5-nitrosalicilato é possível determinar a [ ] de açúcar redutor na solução.
SOLUÇÃO TAMPÃO
São soluções que atenuam a variação dos valores de pH (ácido ou básico), mantendo-o aproximadamente constante, mesmo com adição de pequenas quantidades de ácidos ou bases. São formadas por acido fraco + sua base conjugada, ou base fraca + seu acido conjugado
	CARACTERIZAÇÃO
Proteínas reagem formando produtos coloridos. Reação de ninhidrina caracteriza grupo amino, e de biureto caracteriza lig peptídicas. Ninhidrina: grupos α-amino e ε-amino da lisina reagem formado produto violeta na sol. aquecida. Intensidade da cor proporcional à concentração. Biureto: reage com ligs peptídicas; positiva para peptídeos com mais de 2 aa’s e proteínas; coloração lilás; dipeptídeos dão reação negativa por conter apenas uma lig peptídica.
PRECIPITAÇÃO
Solubilidade de proteínas depende de grupos hidrofóbicos e hidrofílicos, pH, conc de sai e cte dielétrica. Podem possuir muitos grupos carregados que interagem com sais em solução aumentando a solubilidade. Quando a interação prot-prot é muito grande ela tende a ser insolúvel. Desnaturação diminui a solubilidade; temps elevadas, pH extremo sais de metais pesados desnaturam prot; pH extremo altera a ionização de aa’s, afetando as interações iônicas. A ligação de cátions pesado forma sais insolúveis com a proteína, que precipita. Solventes orgânicos apresentam constante dielétrica muito baixa, o que favorece a interação prot-prot, precipitando.
SALTING OUT
Presença de sal em elevada força iônica; proteínas podem precipitar sem desnaturar; a adição de sal remove a agua de hidratação das moléculas, aumentando a interação prot-prot
SALTING IN
Em baixa força iônica o sal aumenta a solubilidade de varias prot; proteína interage mais com o sal e diminui a interação prot-prot
	HIDRÓLISE ACIDA E ENZIMATICA DO AMIDO
Amido: uma cadeia de amilose (glu lig α1-4) e uma cadeia de amilopectina (glu lig α1-4 com ramificações α1-6). Enzimática: amilase catalisa a hidrólise; a α-amilase quebra as lig α1-4 da amilose, amilopectina e glicogênio, produzindo oligossacarídeos (inicialmente), que são degradados à maltotriose e maltose. A amilase não quebra maltose. Ácida: com ácidos forte e sob aquecimento a 100ºC as lig são hidrolisadas; ac a quente hidrolisa as α1-4 e α1-6; dextrinas e oligossacarídeos como prod intermediários, e glu como prod final.
REAÇÃO COM IODO
Forma complexo negro-azulado com a amilose, e vermelho-violácea com a amilopectina. As dextrinas intermediarias podem gerar colorações levemente diferentes (as maiores ficam púrpura ou azul, as médias ficam avermelhadas, e as menores não geram cor)
DOSAGEM DE AÇUCARES REDUTORES PELO 3,5-DINITROSALICILATO (DNS)
Na hidrólise do amido são liberadas unidades de glu que em meio muito alcalino e quente formam enedióis. Estes podem reduzir o DNS (amarelo forte) a 3-amino-5-nitrosalicilato (laranja-marrom forte). Pela determinação da luz absorvida pelo 3-amino-5-nitrosalicilato é possível determinar a [ ] de açúcar redutor na solução.
SOLUÇÃO TAMPÃO
São soluções que atenuam a variação dos valores de pH (ácido ou básico), mantendo-o aproximadamente constante, mesmo com adição de pequenas quantidades de ácidos ou bases. São formadas por acido fraco + sua base conjugada, ou base fraca + seu acido conjugado