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COLORAÇÃO DE GRAM A coloração de Gram é a técnica diferencial mais utilizada para corar as bactérias e diferenciá-las em dois grupos: Gram-positivas e Gram-negativas. Saiba quais são as etapas da coloração e como diferenciá-las no microscópio óptico de campo claro: 1. ADICÃO DE CRISTAL DE VIOLETA Nesta etapa, é necessário adicionar corante cristal de violeta de forma que cubra toda a lâmina e aguardar 1 minuto. Então, deve-se lavar suavemente a lâmina em água corrente da torneira. 2 ADIÇÃO DE SOLUCÃO DEIODO Aqui, é necessário adicionar solução de iodo de forma que cubra toda a lâmina e aguardar 1 minuto. 3. DESCOLORAÇÃO COM SOLVENTE ORGÂNICO Nesta etapa, é necessário descolorar a lâmina com a adição de solução álcool-acetona. Então, deve-se lavar suavemente a lâmina em água corrente da torneira por aproximadamente 10 segundos. 4 ADIÇÃO DE SAFRANINA FUCSINA Nesta etapa, é necessário adicionar corante safranina (ou fucsina) de forma que cubra toda a lâmina e aguardar 30 segundos. Então, deve-se lavar suavemente a lâmina em água corrente da torneira e secá-la em temperatura ambiente ou em calor brando (50°C). APARÊNCIA NO MICROSCOPIC ÓPTICO E PRINCÍPIO DA TÉCNICA GRAM-POSITIVAS GRAM-NEGATIVAS As bactérias Gram-positivas coram-se As bactérias Gram-negativas coram-se de azul/púrpura. Elas retêm o complexo de rosa/vermelho. Elas eliminam o cristal violeta-iodo, uma vez que esse complexo cristal violeta-iodo, uma vez complexo não consegue ultrapassar a que o álcool penetra e rompe a camada espessa camada de peptidoglicano. externa de lipopolissacarídeos. São coradas pela safranina ou fucsina.

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