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1 HIGIENE E INSPEÇÃO DE LEITE E DERIVADOS 1 Sumário NOSSA HISTÓRIA .................................................................................. 2 INTRODUÇÃO ......................................................................................... 3 ORIGEM DO LEITE BOVINO NO BRASIL .............................................. 4 LATICÍNIOS NO BRASIL ......................................................................... 5 EFICIÊNCIA NO PROCESSO DE PASTEURIZAÇÃO ............................ 7 EFEITOS DA PASTEURIZAÇÃO NO PROCESSAMENTO DE QUEIJOS EM GERAL ......................................................................................................... 8 LATICÍNIOS – FORMAÇÃO DE MÃO DE OBRA ESPECIALIZADA NO BRASIL .............................................................................................................. 9 MEMBRANAS - ACOMPANHANDO A EVOLUÇÃO ............................. 10 APLICAÇÃO DE MEMBRANAS NA INDÚSTRIA DE LATICÍNIOS ....... 10 HISTÓRICO DA INSPEÇÃO SANITÁRIA DE ALIMENTOS .................. 19 MICROBIOLOGIA DO LEITE ................................................................ 29 PRODUÇÃO DE LEITE E DERIVADOS ................................................ 35 LEITE PASTEURIZADO ........................................................................ 36 LEITE EM PÓ ........................................................................................ 40 LEITES FERMENTADOS ...................................................................... 41 IOGURTE .............................................................................................. 42 REFERÊNCIAS ..................................................................................... 45 2 NOSSA HISTÓRIA A nossa história inicia-se com a ideia visionária e da realização do sonho de um grupo de empresários na busca de atender à crescente demanda de cursos de Graduação e Pós-Graduação. E assim foi criado o Instituto, como uma entidade capaz de oferecer serviços educacionais em nível superior. O Instituto tem como objetivo formar cidadão nas diferentes áreas de conhecimento, aptos para a inserção em diversos setores profissionais e para a participação no desenvolvimento da sociedade brasileira, e assim, colaborar na sua formação continuada. Também promover a divulgação de conhecimentos científicos, técnicos e culturais, que constituem patrimônio da humanidade, transmitindo e propagando os saberes através do ensino, utilizando-se de publicações e/ou outras normas de comunicação. Tem como missão oferecer qualidade de ensino, conhecimento e cultura, de forma confiável e eficiente, para que o aluno tenha oportunidade de construir uma base profissional e ética, primando sempre pela inovação tecnológica, excelência no atendimento e valor do serviço oferecido. E dessa forma, conquistar o espaço de uma das instituições modelo no país na oferta de cursos de qualidade. 3 INTRODUÇÃO De modo semelhante a muitas situações relatadas na história, o acaso e a necessidade de sobrevivência, certamente, fizeram com que o homem identificasse, ainda na antiguidade, a importância do leite e de, pelo menos, dois de seus derivados, a manteiga e o queijo, como importantes fontes nutricionais. A utilização destes três produtos pelas civilizações mais antigas está comprovada em pelo menos cinco citações no Antigo Testamento: Gênesis 18:8, 1º Samuel 17:18, 2º Samuel 17:29, Jó 10:10 e Provérbio 30:33, mas evidentemente, naquela época ainda não se conhecia uma forma eficiente para conservação do leite. Durante muito tempo o leite foi consumido por quem o produzia e não tinha valor comercial, em virtude de sua rápida deterioração. Até meados do século XIX, pesquisadores já haviam observado a ocorrência da fermentação em alguns produtos, mas não tinham fundamentos para provar a hipótese de que seres vivos participavam do processo fermentativo. Para explicar, por ex., o fato do vinho avinagrar e da cerveja azedar, na época um problema na indústria de bebidas, Louis Pasteur, considerado o "expert" em fermentação da Universidade de Lille, foi consultado. Descobriu, então, que a acidificação do vinho ocorria devido à presença de micro-organismos vivos no ar, que não eram gerados espontaneamente pela bebida e que não resistiam a um aquecimento de 60 °C. Esta hipótese de que seres vivos participavam do processo fermentativo foi comprovada por Pasteur, a partir de 1863, com seus trabalhos sobre vinho e cerveja. Através de experimentos com micro-organismos, Pasteur negou a teoria da geração espontânea pela qual, ratos podiam ser obtidos a partir da mistura de trapos e pedaços de queijo. A partir de suas observações estabeleceu o processo que ficou conhecido como pasteurização, no qual as bactérias são eliminadas pelo aquecimento por alguns minutos, na faixa de temperatura de 50 a 60 °C, seguido por resfriamento 4 brusco, atribuindo-se ao choque térmico a destruição dos micro-organismos em geral. A contribuição decisiva de Pasteur neste campo da ciência pode ser considerada o início da biologia moderna, e resultou em novos caminhos para utilização de certas espécies microbianas benéficas e procedimentos para evitar as prejudiciais. O processo de pasteurização não foi empregado imediatamente no leite, pois foi necessário aguardar o desenvolvimento do sistema de refrigeração. Portanto, a combinação da pasteurização com a maior utilização da refrigeração industrial, no final do século XIX, permitiram assegurar leite isento de micro- organismos prejudiciais à saúde e a disponibilidade de uma maneira eficiente para sua conservação. As contribuições de Pasteur para a ciência despertaram a admiração mundial. O Brasil se fez presente através do imperador D. Pedro II que, por ser profundamente interessado pelas ciências em geral, teve encontros com o cientista, trocou correspondência e financiou algumas de suas pesquisas quando da fundação do Instituto Pasteur em Paris. ORIGEM DO LEITE BOVINO NO BRASIL Há registros de que os bovinos, para suprir a necessidade de leite e carne, foram introduzidos no Brasil por Martim Afonso de Souza e sua mulher Ana Pimentel após 1531, na capitania de São Vicente, quando da 1ª expedição colonizadora enviada por D. João III, rei de Portugal. Consta que em 1535, o donatário de Pernambuco, Duarte Coelho, tenha levado bovinos para o nordeste, enviando algumas cabeças para a Bahia. Em 1550, Tomé de Souza, após ter fundado Salvador, na Bahia, onde instalou a capital do Brasil colonial, mandou buscar em Cabo Verde um lote de bovinos. Acredita-se que destes pontos geográficos o rebanho bovino tenha se espalhado pelo Brasil, dando origem às fazendas de gado que mais tarde se transformaram em povoados e vilas. Data do século XVIII a criação das primeiras fazendas regulares de gado bovino no Brasil. 5 Os senhores de engenho, em várias regiões do Brasil, possuíam fazendas com criação de bovinos que, inicialmente, foram utilizados no trabalho do campo e nos engenhos de açúcar. No final do século XIX, novas raças de bovinos foram introduzidas no país, sendo que em 1893 foram importados exemplares selecionados da raça zebu. Nessa época a produção de leite e carne atendia ao consumo interno, e o couro, de maior valor, era exportado. LATICÍNIOS NO BRASIL A crescente necessidade mundial de consumo de carne no início do século XX tornou o Brasil um dos países mais procurados para a exportação deste produto. Surgiram nessa época imensos matadouros e frigoríficos nos estados de São Paulo e Rio Grande do Sul. Com o crescimento do rebanho ocorreu um aumento da produção de leite, que não era inteiramente aproveitada devido às condições desfavoráveis de transporte. Esta produção adicional foi,sistema automático de circuito fechado constituído de: refrigerador a placas para o leite proveniente da ordenha, tanque regulador de nível constante provido de tampa, bombas sanitárias, filtro-padronizadora centrífuga, pasteurizador, tanque isotérmico para leite pasteurizado e máquinas de envase. A matéria-prima a ser utilizada deve ser o leite cru refrigerado tipo A, que será avaliado laboratorialmente (como descrito anteriormente), para depois passar pelos processos de filtração (remoção de sujidades maiores) e preaquecimento (para evitar a instabilidade do leite), clarificação (redução da CCS e CBT), homogeneização (redução dos glóbulos de gordura), pasteurização (redução do risco ao consumidor decorrente da redução da microbiota contaminante), resfriamento e envase asséptico em embalagens plásticas. Tal produto deve ser mantido em refrigeração a 4 ºC. A finalidade do preaquecimento é diminuir a viscosidade do leite, o que irá facilitar a clarificação, com temperatura atingida entre 40 ºC e 45 ºC. A clarificação é realizada por centrifugação, que visa retirar bactérias e células somáticas do leite, melhorando suas qualidades e aspectos para o processo; é feita por centrífugas antes da pasteurização. No conjunto de equipamentos, é obrigatório o emprego do homogeneizador se a validade do produto for superior a 24horas (BRASIL, 2011). A homogeneização do leite é utilizada para evitar a separação de gordura e sedimentação em produtos lácteos, para melhorar a viscosidade, o sabor e a textura. Deve ser realizada em temperaturas entre 50 °C e 60 °C; nesse processo é utilizada alta pressão (15 kPa a 20 kPa) para fragmentação dos glóbulos de gordura. O pasteurizador deve ser de placas e possuir painel de controle, termorregistrador automático, termômetros e válvula automática de desvio de fluxo, bomba positiva ou homogeneizador; a refrigeração a 4 °C máximos após a pasteurização deve ser feita igualmente em seção de placas. Na pasteurização, devem ser rigorosamente observados os limites quanto à 38 temperatura e ao tempo de aquecimento de 73 ºC a 75 ºC por 15 s a 177 20 (BRASIL, 2017). Na refrigeração subsequente, a temperatura de saída do leite não deve ser superior a 4 °C (BRASIL, 2011). Após a pasteurização, o leite será empacotado em embalagens plásticas (garrafas ou sacos), confeccionadas em bobina pigmentada branca, esterilizadas por luz UV (ultravioleta), garantindo proteção apropriada, e acondicionadas em câmaras a 4 ºC até o momento da expedição. Para ter sua expedição autorizada, o leite pasteurizado tipo A integral deverá apresentar valor mínimo de 3% de gordura (0,6% a 2,9% se for semidesnatado e máximo de 0,5% se for desnatado), 14 g a 18 g ácido lático/mL, estabilidade na prova do alizarol 72%, mínimo de 8,4% de sólidos não gordurosos, índice crioscópico entre −0,512 ºC a −0,531 ºC, negativo na prova da fosfatase alcalina e positivo na prova da peroxidase. Em relação aos parâmetros microbiológicos, deve ser analisado quanto à presença de Salmonella spp., coliformes termotolerantes e totais (35 ºC) e contagem padrão em placas (BRASIL, 2011). Já o leite pasteurizado é elaborado a partir do leite cru refrigerado na propriedade rural, que apresenta as especificações de produção, de coleta e de qualidade dessa matéria-prima contidas em Regulamento Técnico próprio e que tenha sido transportado a granel até o estabelecimento processador. O processo de pasteurização deverá ser o mesmo já descrito para o leite pasteurizado tipo A. No momento da recepção do leite cru refrigerado no laticínio, serão coletadas amostras do leite transportado e realizadas as seguintes análises (provas de plataforma): temperatura (máxima de 7 ºC), teste do álcool/alizarol 72% (estável), acidez titulável (14 g a 18 g de ácido lático/mL), índice crioscópico (−0,512 ºC a −0,531 ºC), densidade relativa a 15 ºC (1,028 g/mL a 1,034 g/mL), teor de gordura (mínimo de 3%), pesquisa de peroxidase e fosfatase alcalina (quando o leite for oriundo de usina ou fábrica, as duas devem estar presentes), percentual de sólidos desengordurados (mínimo de 8,4%), proteínas (mínimo de 2,9 g/100 g), pesquisa de neutralizantes da acidez e reconstituintes da densidade e pesquisa de inibidores microbianos. 39 Quanto aos requisitos microbiológicos e de CCS, são para CBT máximo de 3,0 × 105 UFC/mL e 5,0 × 105 céls./mL (BRASIL, 2011). Para a expedição do leite pasteurizado integral ser autorizada, ele deverá apresentar valor mínimo de 3% de gordura (para o leite desnatado no máximo 0,5% e para o semidesnatado de 2,9% a 0,6%), 14 g a 18 g de ácido lático/mL, estabilidade na prova do alizarol 72%, mínimo de 8,4% de sólidos não gordurosos, índice crioscópico entre −0,512 ºC a −0,531 ºC. Em relação aos aspectos microbiológicos, deve ser analisada a presença de Salmonella spp., coliformes totais e termotolerantes e a contagem padrão em placas (BRASIL, 2011). Admite-se ainda a utilização da pasteurização lenta, utilizando o binômio tempo/temperatura de 65 ºC por 30 minutos, somente para fins filantrópicos e para a produção de derivados (BRASIL, 2011). O processo de pasteurização do leite tem por finalidade reduzir quase toda a microbiota banal e a totalidade da microbiota patogênica do leite, procurando alterar o mínimo possível as propriedades organolépticas normais, a estrutura física, o equilíbrio químico, bem como as enzimas e as vitaminas. No entanto, esse processo tem algumas desvantagens, como a insolubilização parcial dos sais de cálcio, a inativação parcial de algumas vitaminas e algumas enzimas e a parcial caramelização da lactose, bem como a formação de compostos sulfidrílicos, originados dos aminoácidos sulfurados das proteínas, alterando o sabor do leite (sabor de cozido). As falhas mais comuns durante o processamento do leite pasteurizado tipo A ou do pasteurizado consistem em não atingir o binômio temperatura/tempo da pasteurização, na queima do leite pelo uso da temperatura muito elevada e na coagulação do leite nas tubulações em decorrência da utilização de matéria- prima de baixa qualidade, como o uso do leite instável não ácido (LINA). Se o binômio tempo/temperatura não for atendido, o leite não pode mais ser destinado ao consumo direto, pois é proibido repasteurizar o leite, devendo ser destinado à fabricação de derivados. 40 LEITE EM PÓ Entende-se por leite em pó o produto obtido por desidratação do leite integral, desnatado ou parcialmente desnatado e apto para a alimentação humana, mediante processos tecnologicamente adequados (BRASIL, 1996). Pode ser classificado de acordo com o tratamento térmico utilizado em seu processamento em baixo, médio e alto tratamento térmico, com conteúdo de nitrogênio da proteína do soro não desnaturada igual ou maior a 6 mg/g, entre 1,51 mg/g e 5,99 mg/g, e menor do que 1,50 mg/g, respectivamente. Ainda, pode ser classificado em instantâneo ou não; integral (igual ou superior 183 a 26% de gordura), semidesnatado (1,5% a 26,9%) ou desnatado (inferior a 1,5%) (BRASIL, 1996). A água é eliminada através de um processo que envolve operações unitárias, evaporação e secagem por pulverização (atomização, nebulização), restando o extrato seco do leite e uma pequena quantidade de água. A matéria-prima a ser utilizada é o leite cru refrigerado, que será clarificado, padronizado e pasteurizado, como descrito anteriormente para o leite UAT, e após a pasteurização será homogeneizado para melhorar a solubilidade do pó, além de influenciar na digestibilidade e sabor. Na sequência, ocorrerá a concentração por evaporação para eliminação parcial da água e redução de custos da posterior desidratação total. O leite concentrado será evaporado e depois será borrifado ou atomização com pequenas gotículas em câmaras secas ou torres de secagemcom elevadas temperaturas para sua desidratação. O pó resultante será retirado por gravidade, resfriado e envasado assepticamente em embalagens estéreis, dispensando refrigeração. No processamento do leite, adota-se a evaporação para a retirada de água em menor temperatura (50 °C) até atingir concentração de 30% a 40% de extrato seco, que impede o desenvolvimento de microrganismos e ocasiona menores alterações pela ação do calor, nos constituintes e nas propriedades do leite, reduzindo, assim, os custos da desidratação total. Se esse processo não fosse utilizado, geraria partículas com grande quantidade de ar e menor solubilidade em água. Na desidratação ou secagem, 41 que consiste na eliminação de água mediante a aplicação de calor a temperatura elevada (150 ºC a 300 ºC) com secador spray dryer. Essa técnica possibilita a transformação do leite até então concentrado em leite em pó. Posteriormente, o leite em pó pode passar pelo processo de aglomeração (instantaneização), que consiste em aglomerar as partículas em tamanhos superiores a 100 mm para evitar que ocorra o umedecimento superficial das partículas e que as proteínas e hidrocoloides formem um gel que impede a penetração da água, formando “bolsas de pó seco e ar” que somente se dispersam por ação mecânica. Quando ocorre a utilização desse processo, os produtos deverão ser denominados instantâneos. É aceita a adição de lecitina como emulsionante, na proporção de 5g/kg, para a elaboração de leites instantâneos e antiumectantes com utilização 184 restrita ao leite em pó a ser utilizado em máquina automática de venda (BRASIL, 1996). Após a secagem, o leite em pó é envasado em embalagens próprias, sendo sugado para o interior das latas; depois do enchimento, é realizada a gasagem (infusão de gás inerte) e recravação da lata. Caso sejam utilizadas embalagens plásticas, é feita a substituição da atmosfera interna das embalagens, que devem ser armazenadas em temperatura ambiente até o momento da expedição. LEITES FERMENTADOS Entende-se por leites fermentados os produtos adicionados ou não de outras substâncias alimentícias, obtidas por coagulação e diminuição do pH do leite, ou reconstituídos, adicionados ou não de outros produtos lácteos, por fermentação láctica mediante ação de microrganismos específicos. Esses microrganismos específicos devem ser viáveis, ativos e abundantes no produto final e durante a vida de prateleira (BRASIL, 2007). Em sua composição é obrigatória a utilização de leite e/ou leite reconstituído padronizado em seu conteúdo de gordura, cultivos de bactérias lácticas e/ou cultivos de bactérias lácticas específicas (BRASIL, 2007). 42 Os ingredientes adicionais consistem em leite concentrado, creme, manteiga, gordura anidra de leite ou butter oil, leite em pó, caseinatos alimentícios, proteínas lácteas, outros sólidos de origem láctea, soros lácteos, concentrados de soros lácteos. Também são ingredientes adicionais frutas em forma de pedaços, polpa(s), suco(s) e outros preparados à base de frutas, mel, coco, cereais, vegetais, frutas secas, chocolate, especiarias, café, amidos e açúcares (BRASIL, 2007). Os ingredientes opcionais não lácteos, sozinhos ou combinados, deverão estar presentes em uma proporção máxima de 30% (m/m) do produto final. No caso em que os ingredientes opcionais sejam exclusivamente açúcares, acompanhados ou não de glicídios (exceto polissacarídeos e poliálcoois) e/ou amidos ou amidos modificados e/ou maltodextrina e/ou se adicionam substâncias aromatizantes/saborizantes, classificam-se como leites fermentados com açúcar, açucarados ou adoçados e/ou aromatizados/saborizados (BRASIL, 2007). Quando em sua elaboração tenham sido adicionados ingredientes opcionais não lácteos, antes, durante ou depois da fermentação, até um máximo de 30% (m/m), classificam-se como leites fermentados com adições (BRASIL, 2007). No caso em que se mencione o uso de bifidobactérias, a contagem será de no mínimo UFC de bifidobactérias/mL (BRASIL, 2007). IOGURTE Iogurte pode ser definido como o produto lácteo cuja fermentação se realiza com cultivos protossimbióticos de Streptococcus salivarius subsp. thermophilus e Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, aos quais se podem acompanhar, de forma complementar, outras bactérias ácido-lácticas que, por sua atividade, contribuem para a determinação das características do produto final (BRASIL, 2007). Para processamento de iogurte é necessária a obtenção de matéria-prima de boa qualidade, isenta de inibidores, avaliada quanto a parâmetros de acidez, estabilidade térmica, densidade e carga microbiana. 43 Após essa avaliação ocorrerá a padronização do leite por meio da adição de leite em pó ou concentrado com o objetivo de aumentar o teor de sólidos totais, aumentando assim consistência e incorporação de soro (aumento do ESD de 8,5% para 11%). Posteriormente, será homogeneizado a fim de reduzir o tamanho dos glóbulos de gordura, para prevenir a separação da gordura, melhorando a consistência e a viscosidade, além da estabilidade do coagulo, dando origem a um produto mais liso e cremoso. Essa fase deve ser realizada a uma temperatura entre 50 ºC e 60 ºC. A pasteurização deverá ser mais drástica que a utilizada para o leite fluido, pois com maior temperatura ocorre maior desnaturação da caseína e das proteínas do soro, levando a uma maior hidratação do coagulo, o que melhora a incorporação do soro, a consistência e a viscosidade do produto final. Para tal, pode ser utilizada tanto a pasteurização rápida como a lenta, levando em consideração a possibilidade de alterar o binômio tempo/temperatura. Então, será transferido para um tanque maturador e resfriado a uma temperatura entre 40 ºC e45 ºC serão adicionados agentes edulcorantes (melhorar sabor), bem como corantes e aromas (estes podem ser adicionados antes ou após a fermentação), e inoculado o fermento. Após essa inoculação, recomenda-se uma homogeneização por dois minutos e posterior incubação por aproximadamente quatro horas para que ocorra a fermentação da lactose em ácido lático e se estabeleça a coagulação ácida e o desenvolvimento das características sensoriais do produto, por meio da formação de um gel de aspecto liso, brilhoso, sem presença de gases ou liberação de soro. A acidez deve estar em torno de 70 ºD a 72 ºD, e o pH, em torno de 4,4 a 4,7. O produto, então, é resfriado, para paralisar a multiplicação da cultura láctea. A redução da temperatura pode ser feita em duas etapas: inicialmente a 24 ºC e depois a 4 ºC,; no intervalo entre as duas etapas, adiciona-se a polpa. A polpa de frutas é adicionada na proporção de 0,5% a 5% em relação ao volume total do leite, destacando-se a necessidade de serem monitoradas quanto à qualidade microbiológica, uma vez que o produto já foi pasteurizado. 44 É indicado que o pH e a viscosidade da polpa sejam próximos aos do iogurte, para que não ocorra a separação de fases. 45 REFERÊNCIAS ALVES, D.R. Industrialização e comercialização do leite de consumo no Brasil. In: Produção de Leite e Sociedade (on line). Belo Horizonte: FEPMVZ, 2001. BRESSAM, M.C. Legislação de alimentos de origem animal. Lavras: UFLA/ FAEPE, 1999. BRASIL. Decreto nº 8.331, de 31 de outubro de 1910. Cria o Serviço de Veterinária, no Ministério da Agricultura, Indústria e Comércio, e aprova o respectivo regulamento. Rio de Janeiro, 31 out. 1910. BRASIL. Decreto nº 11.462, de 27 de janeiro de 1915. Cria o Regulamento de Inspeção Sanitária. Rio de Janeiro, 27 jan. 1915. BRASIL. Decreto nº 24.549, de 03 de julho de 1934. Regulamento de Inspeção Federal de Leite e Derivados. Diário Oficial da União, Brasília, 03 jul. 1934. BRASIL.Decreto nº 24.550, de 03 de julho de 1934. Regulamento de Inspeção Federal de Carne e Derivados. Diário Oficial da União, Brasília, 03 jul. 1934. BRASIL. Lei nº 1.283, de 16 de dezembro de 1950. Dispõe sobre a inspeção industrial e sanitária dos produtos de origem animal. Diário Oficial da União, Brasília, 19 dez. 1950. BRASIL. Decreto n.º 30.691, de 29 de março de 1952. Regulamenta a Lei 1.283 de 18 de dezembro de 1950, que institui o Regulamento da Inspeção Industrial e Sanitária de Produtos de Origem Animal. Diário Oficial da União, Rio de Janeiro, seção 1, p.10.785, 07 jul. 1952. BRASIL. Decreto nº 52.375, de 19 de agosto de 1963. Institui Grupo de Trabalho para estudar a produção e industrialização do leite e propor medidas para a solução de seus problemas. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 7.331, 22 ago. 1963. BRASIL. Decreto nº 52.662, de 11 de outubro de 1963. Aprova o Regimento do Departamento de Defesa e Inspeção Agropecuária, do Ministério da Agricultura. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 8.713, 16 out. 1963. BRASIL. Lei nº 5.517, de 23 de outubro de 1968. Dispõe sobre o exercício da profissão de médico-veterinário e cria os Conselhos Federal e Regionais de Medicina Veterinária. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 9.401, 23 out. 1968. 46 BRASIL. Decreto nº 68.593, de 6 de maio de 1971. Reorganiza a estrutura básica do Ministério da Agricultura e dá outras providências. Diário Oficial da União, Brasília, seção 3, p. 3.481, 10 mai. de 1971. BRASIL. Decretos nº 68.594, de 06 de maio de 1971. Altera o Regulamento do Ministério da Agricultura. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 3.481, 06 26 mai. 1971. BRASIL. Lei nº 5.760, de 03 de dezembro de 1971. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 10.003, 07 dez. 1971. BRASIL. 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Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 4, 28 mai. 2003. BRASIL. Portaria nº 399, de 22 de fevereiro de 2006. Diário Oficial da União, Brasília, 23 mai. 2006. BRASIL. Decreto nº 5.741, de 30 de março de 2006. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 82, 31 mar. 2006. BRASIL. Instrução Normativa nº 19, de 24 de julho de 2006. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 28, 28 jul. 2006. BRASIL. Decreto nº 6.348, de 08 de janeiro de 2008. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 5, 09 jan. 2008. BRASIL. Decreto nº 7.216, de 17 de junho de 2010. Diário Oficial da União, Brasília, seção 1, p. 2, 18 jun. 2010. BRASIL. Portaria nº 99, de 17 de março de 2010. Diário Oficial da União, Brasília, 19 mar. 2010. BRASIL. Portaria nº 100, de 17 de março de 2010. Diário Oficial da União, Brasília, 19 mar. 2010. BRASIL. Portaria nº 101, de 17 de março de 2010. Diário Oficial da União, Brasília, 19 mar. 2010. COSTA, E.A. Vigilância Sanitária: proteção e defesa da saúde. 2. ed. São Paulo: SOBRAVIME, 2004. DIAS, J.C. 500 anos de leite no Brasil. 1ª ed. São Paulo: Ed. Atual, 2006. DÜRR J.W. Programa Nacional de Melhoria da Qualidade Leite: uma oportunidade única. In: CARVALHO, M.P.; SANTOS M.V. O compromisso com a qualidade do leite no Brasil. Editora UPF, Passo Fundo: UPF, 2004, p.35-55 OLIVEIRA, L.C.; GOMES, M.F.; VELLOSO, C.R.V. Modernização da legislação sanitária federal sobre leite e derivados. In: CASTRO, M.C.D.; PORTUGAL, J.A.B. Perspectivas a avanços em laticínios. Juiz de Fora. EPAMIG. Centro Tecnológico da Zona da Mata, ILCT, 2000. PIOVESAN, M.F. A construção política da Agência Nacional de Vigilância Sanitária. [Mestrado] - Fundação Oswaldo Cruz, Escola Nacional de Saúde Pública, 2002. SOUZA, F.A.S. O estado e o cartel de leite no Brasil. Brasília: Horizonte, 1981.então, aproveitada na fabricação de manteiga e queijos pela dificuldade, devido à 1ª Grande Guerra, em importar estes produtos. Há registros de que a primeira fábrica de laticínios da América do Sul foi fundada por volta de 1888, na Serra da Mantiqueira, em Minas Gerais, pelo Dr. Carlos Pereira de Sá. Para esta instalação importou maquinário e mão-de-obra especializada da Holanda. Após o surgimento em outros estados de novas fábricas deste setor, sentiu-se a necessidade de divulgação do que vinha sendo feito no Brasil na área de laticínios. Isto foi feito em 1925, quando da realização da 1ª Conferência Nacional de Leite e Laticínios realizada no Rio de Janeiro. Nesta conferência, procurou-se enfatizar a importância do leite para a saúde, o valor dos métodos científicos e técnicos aplicáveis à sua industrialização e seus derivados, bem como os métodos mais eficientes para 6 prevenir doenças relacionadas com a saúde pública que atacavam o gado leiteiro. Falou-se, também, do rápido crescimento da indústria de laticínios no Brasil principalmente nos estados de Minas Gerais, São Paulo, Rio de Janeiro e Santa Catarina, apesar das poucas aparelhagens adequadas existentes. Durante essa conferência, aproveitou-se para fazer uma campanha educativa sobre higiene na indústria laticinista. Para tanto, foram encomendados nos Estados Unidos cartazes, filmes e coleções. No Brasil foram feitas oito frases ilustrativas sobre o leite e quinze quadros aquarelados sobre saúde e leite, pelo pintor Mario Tullio. Foi também encenada uma pequena comédia intitulada "Atrás do pote do leite", representada por alunos do então Instituto La-Fayette, no Teatro do Pavilhão Português. A partir deste evento, tem-se procurado melhorar a qualidade microbiológica do leite através da manutenção de rebanho saudável e ações efetivas de boas práticas de higiene, manuseio do leite, durante e após a ordenha, e, na higienização correta dos equipamentos e utensílios utilizados. Atualmente, já existe a conscientização, pela maioria dos produtores, da importância de se promover o resfriamento do leite na faixa de zero a 4 ºC, no máximo 2 h após a ordenha. Através destes recursos, é possível manter a qualidade microbiológica do leite por até 72 h. Mesmo com todas as boas práticas, devido à sua própria natureza e composição, o leite não deixa de ser um excelente meio para multiplicação de micro-organismos. Portanto, não é possível garantir leite cru com ausência total de bactérias, justificando-se o uso da pasteurização para destruir os patógenos e impedir a proliferação de bactérias, embora alguns micro-organismos, como os termofílicos, sejam resistentes a este processo. Hoje, existem outras técnicas utilizadas com o mesmo objetivo da pasteurização. Podem ser citadas a bactofugação, realizada em uma centrífuga especial, hermética, capaz de separar o leite das bactérias e esporos, e a microfiltração onde o leite é filtrado através de membranas com porosidade capaz de reter as bactérias indesejáveis. 7 Com o progresso da ciência tem sido possível melhorar a tecnologia da indústria de laticínios no Brasil. As modificações no processo de pasteurização do leite, as novas técnicas para eliminação de micro-organismos, o desenvolvimento de coalhos de origem vegetal e microbiana, a revolução industrial de maquinários em geral, com a diversidade de equipamentos, a melhoria da qualidade do rebanho, e, a adoção de boas práticas de higiene, desde a ordenha até as diferentes etapas do processamento industrial, para obtenção dos produtos desejados, formam um conjunto que assegura leite e derivados de qualidade. EFICIÊNCIA NO PROCESSO DE PASTEURIZAÇÃO Após as descobertas de Pasteur sobre fermentação e pasteurização em 1863, outras combinações tempo-temperatura de aquecimento, durante o processo de pasteurização do leite, foram investigadas e propostas. Segundo Pelczar et al. as relações originais de tempo e temperatura de pasteurização foram obtidas com o Mycobaterium tuberculosis, considerado como o agente patogênico mais termo resistente capaz de ocorrer no leite. Esta bactéria é destruída quando exposta a uma temperatura de 140 °F (60 °C) durante 10 min. Mais tarde foi descoberto que a Coxiella burnetii, agente etiológico da febre Q, transmissível pelo leite, pode sobreviver em alimento aquecido a 143 °F (61,7 °C) durante 30 min. Como resultado destas descobertas, foram estabelecidas as atuais temperaturas de pasteurização em níveis mais elevados e condições de tempo e temperatura apenas o suficiente para destruir o maior número possível de micro-organismos nocivos à saúde, sem modificar significativamente as propriedades e a composição do leite. Atualmente, a pasteurização continua como importante recurso industrial, sendo realizada nas formas lenta, tipo batelada, "Low Temperature Large Time" (LTLT) e na rápida – "High Temperature Short Time" (HTST). A do tipo LTLT consiste em aquecer o leite a 62- 63 °C e mantê-lo nesta temperatura por 30-35 min, seguido por resfriamento brusco a 5 °C ou menos. 8 A rapidez no resfriamento é importante, pois a lentidão nesta fase pode favorecer um aumento considerável de bactérias. Durante o tempo de aquecimento, o leite deve ser agitado para evitar aderências às paredes do recipiente, promover aquecimento uniforme de todas as suas partículas e, ao mesmo tempo, evitar a formação de espuma. Este processo é usado em pequenas indústrias onde o volume de produção não justifica a aquisição de um pasteurizador de placas. Apresenta, contudo, a desvantagem de ser um processo demorado, descontínuo, com operação manual e com possibilidade de desenvolver microbiota termófila na espuma. A pasteurização do tipo HTST consiste em aquecer o leite a 72 °C e mantê-lo por 15 s em um equipamento com trocadores de calor de placas, seguido de choque térmico semelhante ao usado na pasteurização tipo batelada. A pasteurização HTST é o processo mais usado em indústrias de médio e grande porte. Apresenta como desvantagens o alto custo de aquisição e manutenção do equipamento, mas tem as vantagens de ser um processo contínuo, de controle mais eficaz, de maior rapidez, menor área para instalação, menos perdas por evaporação, maior eliminação de termófilos e economia de mão-de-obra. Em ambos os tipos de pasteurização, a combinação tempo-temperatura é determinada em função da destruição da totalidade das bactérias patogênicas que, frequentemente presentes no leite cru, possam causar no ser humano a tuberculose e, ainda, a brucelose, doença que contribui para a infertilidade e processos abortivos, entre outras. EFEITOS DA PASTEURIZAÇÃO NO PROCESSAMENTO DE QUEIJOS EM GERAL Com o processo de pasteurização ocorre a destruição de inúmeras bactérias patogênicas e láticas, além da perda de aproximadamente 1/3 do cálcio solúvel na forma de paracaseínato de cálcio. Como as bactérias láticas têm a função de promover a acidificação adequada no processo de fabricação de queijos em geral, há necessidade de se recompor estas bactérias, através da adição de fermento lático ao leite 9 pasteurizado. Segundo Oliveira12 essa acidificação é pequena, geralmente, de 1 a 4 °D (grau Dornic), ou cerca de 0,1 a 0,3 unidades de pH, mas mesmo assim tem um efeito marcante na ação do coalho, o qual tem seu poder coagulante aumentado. Além de ajudar na ação da renina, principal enzima presente no coalho e responsável pela coagulação da caseína presente no leite, a acidificação aumenta a consistência do coágulo, auxilia na dessora da massa, que se transformará em queijo, e impede o crescimento de bactérias indesejáveis. Além da acidez, os fermentos láticos, quando associados a certas culturas de micro-organismos com propriedades lipolítica e proteolítica, como por ex. Penicilliniumroqueforti e Pennicillinium camembert, conferem sabor e aromas típicos na etapa de maturação dos queijos roquefort e camembert. Há necessidade, também, de se fazer reposição do cálcio solúvel, na forma de cloreto de cálcio a 50%, pois este participa do processo de coagulação da massa, que se tornará queijo, evitando que sua consistência fique muito mole. Então, a adição de fermento lático e cálcio solúvel ao leite pasteurizado são recursos utilizados para contornar problemas decorrentes da pasteurização, durante os processos de fabricação de queijos frescos em geral. LATICÍNIOS – FORMAÇÃO DE MÃO DE OBRA ESPECIALIZADA NO BRASIL Em relação à formação de mão-de-obra especializada em laticínios, decisivamente há, no Brasil, dois institutos que se destacam, a Queijaria Suíça de Nova Friburgo (QSNF) e o Instituto de Laticínios Cândido Tostes (ILCT). A QSNF começou a ser idealizada em 1985, por iniciativa do Instituto Fribourg, uma sociedade civil, sem fins lucrativos, de caráter cultural, educacional, beneficente e filantrópico. Foi inaugurada em 1987, com recursos suíços (3/4) e nacionais (1/4). O interesse da Suíça pela região de Nova Friburgo começou após divulgação de pesquisas, em 1973, do historiador suíço Martin Nicoulin sobre a saga de seus imigrantes que vieram para o Brasil cumprindo tratado de colonização assinado por D. João VI, rei de Portugal e do Brasil. 10 Após estas divulgações fundaram-se duas associações, uma em Nova Friburgo/Brasil e outra em Fribourg/Suíça. Iniciou-se, desde então, um movimento de intercâmbio entre estas duas cidades que tem como objetivos preservar a memória dos imigrantes suíços fundadores do município e desenvolver a bacia leiteira da região de Nova Friburgo, além da tecnologia de alimentos de origem suíça com alto padrão de qualidade. A QSNF possui registro junto ao Ministério da Agricultura e Inspeção Federal, e recebe em média, da região de Nova Friburgo, 2500 L de leite/dia sendo 2/3 de vaca e 1/3 de cabra. O ILCT está localizado em Juiz de Fora - MG. Foi inaugurado em 1940, com o nome de Fábrica-Escola de Laticínios Cândido Tostes (FELCT) e tem contribuído na formação de competentes profissionais do ensino médio com especialidade em laticínios. Tanto a QSNF quanto o ILCT promovem anualmente cursos de curta duração que têm como público-alvo pessoas interessadas em adquirir conhecimento teórico-prático sobre laticínios em geral. Em 1974, o Governo do Estado de Minas Gerais autorizou a constituição da Empresa de Pesquisa Agropecuária de Minas Gerais-EPAMIG que incorporou o ILCT com todas as suas atividades e patrimônio. Como o objetivo da EPAMIG era de responder pelas atividades de pesquisa no estado, o ILCT também passou a desempenhar esta atividade, contribuindo para o aprimoramento técnico da área de laticínios. MEMBRANAS - ACOMPANHANDO A EVOLUÇÃO As membranas naturais são conhecidas desde a antiguidade, mas o desenvolvimento e as principais aplicações de processos de separação com membranas sintéticas, em escala de laboratório, teve início em 1920. APLICAÇÃO DE MEMBRANAS NA INDÚSTRIA DE LATICÍNIOS Os processos de filtração por permeação com membranas são usados para efetuar uma variedade de separações e podem ser definidos como barreiras seletivas ao transporte de massa de certos componentes de uma amostra. 11 A distinção entre as técnicas de filtração clássica e as de filtração com membranas de MF e UF é que estas apresentam poros menores e, por isto, oferecem maior resistência à separação dos solutos componentes da solução. Para forçar a passagem de um ou mais solutos da solução e, consequentemente, promover a separação é necessário aumentar a pressão de operação à medida que se caminha da MF para a UF a fim de se obter fluxos economicamente viáveis. A fase que atravessa a membrana é conhecida como permeado e a que fica retida pela membrana, que é a fase enriquecida em um ou mais componentes, é chamada de retentado ou concentrado. Nos processos com membranas há dois tipos de filtração, a convencional e a tangencial. Na filtração convencional o fluido escoa perpendicularmente através da membrana filtrante e na tangencial, o escoamento é paralelo à área da membrana. Este último tipo de sistema de filtração, largamente utilizado em processamento do leite e soro de queijo é mais eficiente, pois facilita o arraste dos solutos, evitando que estes se acumulem sobre a superfície da membrana16. Os processos de separação com membranas estão sendo utilizados desde a década de 70 na indústria de laticínios e usam, principalmente, dois tipos de membranas, as de microfiltração (MF) e ultrafiltração (UF). O princípio de separação destas membranas tem como base a diferença de tamanho dos componentes da solução em relação ao tamanho de poros das respectivas membranas. O tamanho do poro das membranas de microfiltração (MF) é indicado pelo diâmetro médio de poro e é especificado em micrômetro (µm). Estas membranas retêm partículas em suspensão, que também são especificadas em mm, na faixa de 0,10 a 5 µm. Já para as membranas de ultrafiltração (UF), o tamanho do poro é usualmente referido, através da "massa molecular de corte" (MWCO), cuja unidade mais utilizada é o Dalton. Como o tamanho das proteínas é usualmente expresso em termos de sua massa molecular, tornou-se usual caracterizar membranas de UF em termos de sua capacidade de reter proteínas de determinada massa molecular. 12 O termo "massa molecular de corte" para membranas de UF designa o tamanho da proteína que será retida por uma membrana de determinada eficiência, dependendo da finalidade. A UF retém macromoléculas tais como proteínas ou partículas maiores que 0,001 a 0,02 µm. No caso da aplicação de processos com membranas de MF ou UF em produtos alimentícios, um dos fatores a ser considerado é a seleção da membrana e outros materiais de contato de modo a atender às orientações higiênicas e de saúde, sendo as de poli(éter-sulfona) as mais utilizadas na indústria de laticínios. Estas membranas apresentam como vantagens suportar temperaturas de até 55 ºC de modo a manter os fluidos com baixa viscosidade, resistir a valores extremos de pH, facilitar a limpeza e sanitização das membranas e, ainda, possibilitar melhor controle do crescimento de micro-organismos . Apesar da tecnologia de membranas de filtração por osmose reversa (OR), do soro de queijo, ter sido a primeira aplicação de sucesso comercial em 1971, a ultrafiltração (UF) é mais utilizada na indústria de laticínios. Pode ser usada para, a partir do soro de queijo, obter concentrado de proteínas, que posteriormente será adicionado a iogurtes, queijos, carnes processadas, alimentos infantis e bebidas. Já a microfiltração (MF) serve para controlar o conteúdo de gordura do soro de queijo antes da UF, e remover micro-organismos do leite e do soro de queijo sem necessidade da alta temperatura de pasteurização. Atualmente a UF é largamente empregada na produção de alguns tipos de queijos a partir do leite pasteurizado, principalmente os macios, conforme mostrado no fluxograma da Figura 1. O processo, utilizando membrana de UF, é baseado no trabalho de Maubois et al.16, e difere do tradicional, como mostra o fluxograma da Figura 2, logo no seu início, onde ocorre uma pré-concentração das proteínas do leite pasteurizado, obtendo-se o "pré-queijo" ou retentado que é, então, convertido em queijo pelo processamento tradicional. https://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-40422006000400043#figura1 https://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-40422006000400043#figura2 13 A pré-concentração inicial leva a um aumento no rendimento da produção de queijo, devido à inclusão das proteínas do soro, com consequente decréscimo na geração deresíduos conforme mostra a Tabela 2. https://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-40422006000400043#tabela2 14 O fluxograma da Figura 1 corresponde ao procedimento da produção de queijos pelo processo que utiliza membrana de ultrafiltração e o da Figura 2, ao que utiliza o processo tradicional. No primeiro, a estimativa de produção de queijo é de 12 a 19% e no segundo, de 10 a 15%. https://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-40422006000400043#figura1 https://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-40422006000400043#figura2 15 O aumento do rendimento no processo, que utiliza membrana de UF, justifica-se pelo aproveitamento total das proteínas, que no processo tradicional permanecem no soro. Há registros de que no mundo estão instaladas cerca de 300.000 m2 de área de membranas aplicadas à indústria de laticínios. O Brasil, apesar de ser um país relativamente novo, e que teve sua primeira fábrica de laticínios instalada em 1888, já possui plantas de membranas de ultrafiltração. O queijo Minas Frescal, produzido com auxílio da técnica de ultrafiltração, vem sendo comercializado no Brasil desde 1988, podendo ser encontrado na forma tradicional e também com baixo teor de gordura. Neste tipo de processamento todas as proteínas do leite são aproveitadas, o que permite fazer todo o processo em sistema fechado. Outras pesquisas, como por ex., o uso de membranas na obtenção de iogurte com baixo teor de lactose, para atender consumidores que apresentam má absorção ou intolerância à lactose, têm sido desenvolvidas. As origens históricas da produção de queijo nos remetem a alguns países da Europa, como França e Suíça, que contribuíram de forma significativa desde as descobertas sobre fermentação e pasteurização até suas técnicas especiais para fabricação de queijos. Conhecer e divulgar estas aquisições, que contribuíram para o desenvolvimento da indústria laticinista tradicional e outras mais recentes, como é o caso da tecnologia de membranas é tarefa da maior relevância. A utilização desta tecnologia inovadora na indústria de laticínios tem a vantagem de apresentar melhor aproveitamento das proteínas no processo de produção de queijos, obtendo-se maior rendimento e produzir concentrados de proteínas a partir do soro de queijo resultante do processo tradicional, e eliminar micro-organismos sem necessidade de aquecimento. Mas, apesar do sucesso da tecnologia de membrana na área de laticínios, não se deve perder de vista que alguns queijos continuarão a ser processados pela forma tradicional, por conta do domínio da metodologia desenvolvida ao longo de séculos e que, para alguns tipos de queijo, certamente, será sempre insubstituível. 16 Com relação à produção e consumo de queijos no Brasil pode-se dizer que nos últimos anos tem ocorrido aumento substancial devido à modernização da tecnologia, grande preocupação dos indivíduos com a saúde, e, também, pela praticidade de consumo deste alimento fora do domicílio. Atualmente, queijos nacionais, ditos populares – minas, prato e mussarela – possuem processamento tecnológico de extrema qualidade. Alguns queijos considerados finos, como o moleson, reblochon e raclete, produzidos no país, estão cada vez mais semelhantes aos de origem suíça. Entre os franceses, queijos tipo roquefort, camembert e brie são encontrados com marcas nacionais de excelente qualidade. Mas o aumento do consumo destes queijos depende certamente da melhoria do poder aquisitivo da nossa população. As legislações pertinentes ao leite e seus derivados compreendem Instruções Normativas, Resoluções, Portarias e Decretos. Essas normas jurídicas regulamentam a identidade e a qualidade do leite em todas as suas etapas, desde a produção, passando pela industrialização, até o seu comércio. Tanto a Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), vinculada ao Ministério da Saúde (MS), quanto o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), possuem normas sobre leite e derivados, porém com campos de atuação diferenciados. A ANVISA é responsável por fiscalizar alimentos expostos ao consumo, enquanto o MAPA fiscaliza produtos alimentícios nas indústrias fabricantes. As diferenças entre “Instrução Normativa”, “Resolução” e “Portaria” são claras para quem pertence à área jurídica, mas são desconhecidas para a maioria dos profissionais e estudantes da área de alimentos. De uma forma abrangente, apresentamos nesta obra as principais diferenças entre as nomenclaturas jurídicas usadas na legislação de leite e derivados: Portarias são instruções expedidas por chefes de alto escalão do Poder Executivo, como Presidentes, Ministros, Defensoria Pública, entre outros. Possuem o objetivo de orientar procedimentos sobre organização, funcionamento de serviços e aplicação de textos legais. A portaria, por ser ato administrativo, só tem força de lei se editada para regulamentar lei ou decreto. Como exemplo, as portarias podem aprovar regulamentos técnicos. 17 Portarias são os atos baixados pelos Ministros de Estado com a finalidade de implementar normas jurídicas não detalhadas em decretos regulamentares ou de disciplinar atividades ou funcionamento de órgãos, nos limites da lei e do respectivo regulamento, quando for o caso (FARIA, 2004, p.189). As Instruções Normativas explicam como será cumprido o que está estabelecido em uma portaria, não podendo transpor, inovar ou modificar 8 o texto da norma que complementam. São atos normativos expedidos por autoridades administrativas, normas complementares das leis, dos tratados e das convenções internacionais e dos decretos. Normalmente são aprovadas por Secretários de órgãos federais, estaduais ou municipais. Instruções e portaria são todos atos que servem para que a Administração organize suas atividades e seus órgãos. Apesar de auxiliarem a Administração a definir melhor sua organização interna, a verdade é que na prática, encontramos muitos deles ostentando caráter normativo, fato que provoca a imposição de regras gerais e abstratas (CARVALHO FILHO, 2007). As Resoluções são regulamentos legais autorizados pela Câmara dos Deputados ou pelo Senado Federal, e não dependem do Poder Executivo para serem sancionadas, ou seja, não dependem do presidente, governador ou prefeito. As regras sobre seu procedimento estão previstas no regimento interno. Resoluções são atos vinculados a própria atividade do Congresso Nacional, também independentes da sanção do Chefe do Executivo, tendo por base finalidades específicas do seu peculiar interesse como: delegar competência ao Presidente da República (CF, art. 68, § 2º), suspensão pelo Senado da execução de lei federal declarada inconstitucional pelo STF (CF, art. 52, X); fixação pelo senado da alíquota de certos impostos (CF, art. 155, § § 1º, IV e 2º, IV, V). (BETIOLI, 2013). Resoluções são os atos regulamentares, de categoria inferior ao decreto regulamentar, utilizadas pelos secretários de Estado. Nas Secretarias de Estado as resoluções têm a mesma função e poder das portarias nos Ministérios de Estado (FARIA, 2004, p.189). 18 O material aqui descrito, em um primeiro momento, permite o entendimento e interpretação dos planos de amostragem usados pela legislação para avaliar padrões de qualidade dos alimentos. Posteriormente pode-se consultar o regulamento que descreve os padrões microbiológicos para alimentos expostos ao consumo, aprovado pela ANVISA. Neste material de consulta encontra-se o leite e seus derivados, com as tolerâncias para os micro-organismos indicadores de qualidade e patogênicos de relevância pra cada alimento. Em seguida encontra-se o regulamento que define a produção e os padrões de identidade e qualidade do leite fluido (cru e pasteurizado)de vaca e de cabra, bem como a refrigeração do leite nas propriedades, o transporte a granel e o uso de tanques de refrigeração comunitários. Os derivados lácteos também são regulamentados, definindo e caracterizando o processo de produção de cada um deles, determinado o controle de produção, beneficiamento, classificação, denominação de venda, composição e aditivos/coadjuvantes permitidos na tecnologia e elaboração. Pode-se também consultar limites físico químicos e microbiológicos para estes alimentos. É possível verificar os regulamentos sobre queijos, manteiga, creme de leite e creme de uso industrial, gordura láctea, caseinatos, gordura anidra de leite, leite fluido a granel de uso industrial, caseína alimentar, leite em pó, leite UHT, nata, requeijão, doce de leite, leite fermentado e bebida láctea. Por últimos nesta síntese da legislação sobre leite e derivados, pode-se localizar os requisitos de boas práticas de fabricação e elaboração descritos e regulamentados pelos órgãos fiscalizadores (MAPA e ANVISA) com objetivo de garantir a segurança dos alimentos. Também verifica-se os procedimentos genéricos descritos pelo MAPA para implantação de Sistema de Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle na indústria alimentícia. Desta forma, esse compêndio reúne de forma prática as principais legislações brasileiras relacionadas ao leite e seus derivados. O objetivo é facilitar as buscas relacionadas às regulamentações, o controle de qualidade e segurança do leite fluido e dos seus derivados descritos 19 pelo MAPA e pela ANVISA, otimizando o tempo de estudantes e profissionais da área. HISTÓRICO DA INSPEÇÃO SANITÁRIA DE ALIMENTOS A palavra “inspeção” vem do latim inspectione e está relacionada ao ato de examinar, verificar ou qualquer ação que tenha a observação como fundamento. Atualmente, o termo “Inspeção Sanitária de Alimentos” significa examinar um alimento e julgá-lo apto ou inapto ao consumo humano. Nesse caso, o critério fundamental que os distingue é a inocuidade, ou seja, a capacidade de não causar qualquer dano à saúde. Averiguar o alimento, julgando-o em apto ou inapto para o consumo é um processo imemorial, arraigado nas origens da evolução. Antes do surgimento da espécie Homo sapiens, o gênero Homo já era capaz de discernir os alimentos em “bons” ou “ruins” para a sua saúde. Essa distinção podia ser baseada em previsão ou no mecanismo de causa e efeito. A presciência, ou seja, pressentir se um alimento era bom ou ruim antes do consumo, tinha como fundamento o olfato e a visão. Alimentos com odor pútrido e aspecto repulsivo imediatamente eram recusados. Porém, alguns alimentos podiam ser consumidos pelos homens primitivos e os seus efeitos ruins, como náuseas, diarreias e indisposições, só seriam notados horas ou mesmo dias após o consumo. Nesse caso, o homem aprendia pelo mecanismo causa-efeito que um determinado alimento não deveria ser consumido. A diferenciação intuitiva dos alimentos muito provavelmente era feita pelas fêmeas primitivas, no ato da coleta de frutos e sementes selvagens para alimentação própria e de seus descendentes, enquanto os machos se ocupavam com a caça de animais. Ao passar dos anos houve uma gradual mudança do hábito alimentar na evolução humana. Com a habilidade de manipular pedras e madeiras para o feitio de ferramentas, o homem intensificou a caça, aumentando o consumo de carnes e vísceras. 20 Há cerca de 3 milhões a 200.000 anos, Homo 12 erectus e Homo habilis evoluíram até a caça organizada de grandes animais e abandonaram gradativamente a vida nômade. Em uma época mais moderna, há aproximadamente 200.000 ou 100.000 anos, o Homo sapiens neandertalensis e o Homo sapiens sapiens já eram capazes de dominar completamente o fogo, aprendendo que os alimentos cozidos não estragavam com tanta rapidez. No período neolítico, há cerca de 10.000 anos, o homem domesticava animais e cultivava vegetais, marcos fundamentais para a alimentação em larga escala. Porém, surgia uma necessidade: como conservar tantos alimentos? Isso obrigou o homem a evoluir no campo da conservação e do processamento de alimentos. Assim nascia a conservação em salmoura, vinagres óleos, banhas e os alimentos foram se tornando cada vez mais elaborados, com a produção de azeites, queijos, vinhos e pães. Concomitantemente aos desafios de manter os alimentos em bom estado, surgiam também problemas relacionados à conservação inadequada. Nesse panorama, as preocupações entre o consumo de alimentos e o surgimento de doenças ficaram intensificadas. As primeiras “normas” sanitárias com o objetivo de evitar doenças alimentares eram de cunho místico. Várias religiões antigas já estabeleciam regras para sacrifícios de animais. De fato, essa era uma função sacerdotal no antigo Egito, onde os médicos eram responsáveis por inspecionar a carne dos animais sacrificados em rituais, bem como a saúde de quem fazia o sacrifício. As religiões permitiam ou negavam o consumo de certos alimentos, e com o surgimento da escrita podemos verificar algumas práticas relacionadas à higiene dos alimentos em escrituras sagradas. A primeira parte do livro sagrado dos judeus, o Mishná, escrito no ano 200 d.C, contém normas de sacrifício, alimentos proibidos e técnicas de preparo dos animais que seriam sacrificados. 21 Na bíblia, temos no antigo testamento o livro Levítico, que contém várias leis sanitárias e de alimentos: Homem algum da linhagem de Aarão, o sacerdote, que for deformado, oferecerá os sacrifícios consumidos pelo fogo. Sendo vítima de uma deformidade, não poderá apresentar-se para oferecer o pão de seu Deus. Desse modo, serão excluídos todos aqueles que tiverem uma deformidade: cegos, coxos, mutilados, pessoas de membros desproporcionados, ou tendo uma fratura no pé ou na mão, corcundas ou anões, os que tiverem uma mancha no olho, ou a sarna, ou os testículos quebrados. Nessa época, quando o caráter científico ainda não estava relacionado à higiene alimentar, a inspeção de alimentos também podia estar relacionada ao pagamento de taxas ao estado. Na Roma antiga encontramos o primeiro registro de multa por venda de carne sem inspeção do estado, datada de 150 a.C. Também nessa época surgem os primeiros abatedouros de animais. Na idade média o contexto alimentar-sanitário contínua de forma empírica. A principal preocupação dessa época era impedir fraudes em pesos e medidas. As associações de profissionais tentavam impedir adulterações, praticadas com o objetivo de aumentar o lucro dos comerciantes, burlando o estado e a população. Até o início do renascimento, a área de alimentos permaneceu sem avanços. As normas sanitárias eram baseadas em ceticismo e em relações causa-efeito. Nos séculos XVII e XVIII houve um avanço científico nas áreas da química e microbiologia, o que contribuiu muito para o desenvolvimento da inspeção sanitária. Frente a surtos de verminoses (teníases) e doenças respiratórias (tuberculose), a principal preocupação dos estados também mudava, priorizando a saúde populacional. No século XIX, Luis Pasteur comprovou que bactérias causavam doenças e a população estava mais ciente dos riscos do consumo de alimentos adulterados. Os próprios órgãos governamentais passaram a entender que deveriam aumentar as medidas de proteção da população, criando leis que regulamentavam a ciência e higiene dos alimentos. 22 No continente europeu, as legislações sobre alimentos tiveram início em meados do século XIX. Em 14 de dezembro de 1842, foi aprovado na Espanha o “Reglamento del ayuntamiento de Madrid sobre la inspección de los alimentos de origen animal”, a primeira normativa sobre inspeção veterinária. No Brasil, a primeira citação oficial da inspeção sanitária de produtos de origemanimal foi no ano de 1909, com o Decreto Federal n. 7.622 que criou a Diretoria de Indústria Animal. No ano seguinte, o Decreto n. 3.881/10 cria o Serviço de Veterinária, que foi regulamentado pelo Decreto 9.191/10, dispondo sobre a inspeção sanitária de matadouros, entrepostos frigoríficos e estabelecimentos de laticínios. Em 1915 foi criado, através do Decreto n. 11.462, o regulamento do primeiro Serviço de Inspeção Oficial do Brasil, chamado Serviço de Inspeção de Fábricas de Produtos Animais. No início do século XX, com a escassez mundial de alimentos gerada pela I Guerra Mundial, o Brasil começou a exportar gêneros alimentícios havendo a necessidade da criação de um estatuto que garantisse a integridade dos alimentos. Em 1934, foram criados os regulamentos específicos para leite e derivados (Decreto n. 24.549) e para carnes e derivados (Decreto n. 24.550), estabelecendo os procedimentos da inspeção federal desses produtos. A partir da década de 50, sucessivas leis e decretos foram criados com o objetivo de regulamentar e legalizar a inspeção de produtos de origem animal. Em 1950, foi aprovado, pelo então Presidente da República Eurico Gaspar Dutra, a Lei Federal n. 1.283 que estabelece a obrigatoriedade da prévia fiscalização, sob o ponto de vista industrial e sanitário, de todos dos produtos de origem animal, comestíveis e não comestíveis sejam ou não adicionados de produtos vegetais, preparados, transformados, manipulados, recebidos, acondicionados, depositados e em trânsito. Essa lei foi reformulada 15 em 1952 pelo Decreto n. 30.691 que aprovou o novo Regulamento da Inspeção Industrial e Sanitária de Produtos de Origem Animal (RIISPOA). Esse regulamento, ainda em vigor, já sofreu diversas modificações no decorrer dos anos. 23 Atualmente, o RIISPOA passa por revisão para se adequar às novas exigências do mercado. Em 1962, foi criado o Departamento de Defesa e Inspeção Agropecuária (DDIA), competindo-lhe planejar, promover e controlar as atividades de defesa, inspeção, padronização e classificação dos produtos de origem vegetal e animal e dos bens essenciais à sua produção e fazer cumprir a legislação federal. Mais tarde, essas competências seriam descentralizadas e passariam a ser responsabilidade da União, dos Estados, do Distrito Federal e dos Municípios, permanecendo assim até os dias de hoje. Em 1968, fica estabelecido pela Lei n. 5.517 que é competência privativa do médico veterinário a inspeção e a fiscalização sob o ponto de vista sanitário, higiênico e tecnológico de estabelecimentos que produzam, manipulam e comercializam produtos de origem animal. Entre 1971 e 1988, o serviço de inspeção sanitária e industrial foi concentrado no MAPA. Os Decretos n. 68.593/71 e 68.594/71 reorganizaram a estrutura básica do MAPA e criaram a Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal. Em 1971, a Lei n. 5.760 decreta que é competência da União a prévia fiscalização sob o ponto de vista industrial e sanitário, inclusive quanto ao comércio municipal ou intermunicipal. Essa lei ficou conhecida como a “Federalização da Inspeção no Brasil”. Em 1974, o Decreto n. 73.474 transforma a Divisão de Inspeção de Produtos de Origem Animal em Departamento Nacional de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DIPOA), como é conhecido até hoje, ficando o DIPOA responsável pelo planejamento, coordenação, supervisão, fiscalização e controle da inspeção, e classificação de produtos de origem animal in natura ou industrializados. Em 1975, através da Lei n. 6.275, foi iniciado o processo de descentralização da inspeção sanitária e industrial dos produtos de origem animal. Em 1989, a Lei Federal n. 5.760, de 3 de dezembro de 1971, foi então revogada pela Lei n. 7.889/89, redistribuindo as responsabilidades da inspeção sanitária e industrial dos produtos de origem animal. Então, a partir de 1989, os Estados, o Distrito Federal e os municípios ficaram responsáveis pela fiscalização, normatização e registro das indústrias de produtos de origem animal. 24 Após o processo de centralização no início da criação do serviço de inspeção e sua posterior descentralização, a fiscalização e inspeção sanitária e industrial de empresas que processam, manipulam ou armazenam produtos de origem animal fica sendo obrigatoriamente realizada por diferentes esferas do poder público executivo de acordo com os destinos dos produtos a serem comercializados e distribuídos. Serviços de Inspeção Federal, Estadual e Municipal A Lei 7.889/89 estabelece três níveis de inspeção, dependendo da abrangência da área de comercialização: o Serviço de Inspeção Federal – SIF; o Serviço de Inspeção Estadual – SIE; e o Serviço de Inspeção Municipal – SIM. São competentes para realizar a prévia inspeção sanitária e industrial dos produtos de origem animal: • O Ministério da Agricultura: inspeção de estabelecimentos que fazem comércio interestadual e internacional; • As Secretarias de Agricultura dos Estados, do Distrito Federal e dos Territórios: inspeção de estabelecimentos que fazem comércio intermunicipal; • As Secretarias ou Departamentos de Agricultura dos Municípios: inspeção de estabelecimentos que fazem comércio municipal; • Os órgãos de saúde pública dos Estados, do Distrito Federal e 17 dos Territórios: inspeção de casas atacadistas e estabelecimentos varejistas. Desde a sua criação, em 1915, como Serviço de Inspeção de Fábricas de Produtos Animais, o SIF atesta a qualidade sanitária dos produtos de origem animal comercializados no Brasil e em todo o mundo. O SIF é de responsabilidade do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento. Para o Registro de Estabelecimentos, junto ao MAPA, se faz necessário cumprir uma série de normas, que vão desde a aprovação do terreno, até a conclusão da obra e instalações para finalmente a obtenção do SIF. Os Serviços de Inspeção Estaduais (SIE) permitem que os produtos de origem animal produzidos nos estados sejam comercializados em nível intermunicipal, sendo o registro obtido nas Secretarias de Agricultura dos Estados. No estado do Paraná, o SIE foi criado em 24 de maio de 1994, pela Lei 10.799, sendo denominado Serviço de Inspeção do Paraná/Produtos de Origem Anima – SIP/POA. O SIP/POA está diretamente vinculado à Secretaria da Agricultura e do Abastecimento do Paraná no Departamento de Fiscalização. 25 A instalação dos Serviços de Inspeção Municipais (SIM) é de responsabilidade das Secretarias ou Departamentos de Agricultura dos Municípios e tem a função da prévia inspeção e fiscalização dos produtos de origem animal produzidos no município e destinados ao consumo humano dentro dos limites de sua área geográfica. Mais recentemente, no dia 30 de março de 2006, o Presidente da República, Luiz Inácio Lula da Silva, assinou o Decreto nº 5.741 regulamentando o Sistema Unificado de Atenção à Sanidade Agropecuária - SUASA, criado pela Lei nº 8.171/1991 e alterado pela Lei nº 9.712/1998 e pelo Decreto nº 7.216/10, derrubando o limite comercial de fronteira imposto da Lei Federal 7.889, de 1989. O SUASA tem como proposta principal a transferência da execução de atividades de responsabilidade do MAPA para outras instâncias inferiores (estaduais e municipais). O SUASA instituiu quatro sistemas de gestão: nas áreas animal, vegetal, de insumos agrícolas e de insumos pecuários, sendo formado por 4 subsistemas de inspeção e fiscalização: • Sistema Brasileiro de Inspeção de Produtos de Origem Animal – SISBI/POA • Sistema Brasileiro de Inspeção de Produtos de Origem Vegetal – SISBI/POV • Sistema Brasileiro de Inspeção de Insumos Agrícolas • Sistema Brasileiro de Inspeção de Insumos Pecuários O Sistema Brasileiro de Inspeção de Produtos de Origem Animal (SISBI/SUASA), coordenado pelo Departamento de Inspeção de Produtos de Origem Animal(DIPOA) do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento tem como objetivo uniformizar a fiscalização de produtos de origem animal em todo o País, julgando equivalentes os sistemas de inspeção municipais e estaduais que tiverem seus procedimentos de inspeção correspondentes aos do SIF. Paraná, Minas Gerais e Bahia foram os primeiros estados admitidos no SISBI/POA. Através das Portarias nº 99, 100 e 101, de 2010, o MAPA reconheceu a equivalência dos serviços de inspeção de produtos de origem animal executados pelas Secretarias de Agricultura destes estados. Vigilância Sanitária Na época do Império, a vigilância sanitária se restringia ao controle sanitário dos portos e fiscalização dos médicos, boticários, curandeiros, barbeiros e parteiras. 26 As primeiras alterações começaram nos séculos XVIII e XIX, com a ampliação do seu campo de atuação, cujo objetivo principal era evitar a disseminação de moléstias epidêmicas. A partir do século XX a vigilância sanitária começa a formar o conceito de política sanitária como é conhecida hoje. Até 1930 era o Ministério da Justiça e Negócios Interiores que tratava 19 dos assuntos relacionados à saúde pública. Em 1930 foi instituído, pelo chefe do Governo Provisório Getúlio Vargas, o Ministério da Educação e Saúde Pública que, em 1953, serviria de estrutura para a criação do Ministério da Saúde. Mas foi somente em 1967 que o Ministério da Saúde passou a ser responsável pela formulação e coordenação da saúde, ficando a vigilância sanitária responsável pela saúde coletiva. Na década de 70 as atribuições da vigilância sanitária foram estendidas para o controle sanitário de produtos e serviços. Entre 1976 e 1977 houve uma nova mudança na organização institucional do Ministério da Saúde, sendo criada a Secretaria Nacional de Vigilância Sanitária (SNVS), que passou a ser denominada Secretaria de Vigilância Sanitária (SVS) em 1992, mantendo a mesma estrutura. Neste período também foram sancionadas importantes leis que se referem à vigilância sanitária, ainda em vigor no país. A partir da década de 80, o crescimento da participação popular na política e da produção industrial de alimentos mudou a concepção de vigilância sanitária, baseando-se no conceito de política médica que teve origem no Europa dos séculos XVII e XVIII. Na década de 90, a vigilância sanitária sofreu dois grandes processos de reestruturação objetivando sua descentralização: o primeiro, em 1990, com a criação do Sistema Único de Saúde (SUS), e o segundo, em 1994, com a criação do Sistema Nacional de Vigilância Sanitária. O principal acontecimento dessa década foi a aprovação da Lei Orgânica da Saúde (Lei n. 8.080/90 e Lei 8.142/90) como primeiro passo para a descentralização da vigilância sanitária, estabelecendo o SUS e definindo as novas diretrizes da vigilância sanitária. 27 Em 1994 é instituída a Portaria MS/GM 1565 que define o Sistema Nacional de Vigilância Sanitária e sua abrangência. Essa portaria esclarece os campos de exercício da Vigilância Sanitária nas três esferas de governo (federal, municipal e estadual) do Sistema Único de Saúde e suas respectivas competências. A criação da Agência Nacional de Vigilância Sanitária – ANVISA, em 1999, pela Lei n. 9.782, reorganizou as atividades da vigilância sanitária no Brasil, e ampliou seu campo de atuação para outras áreas relativas à saúde. O nascimento de uma agência que promovesse e assegurasse a qualidade sanitária dos alimentos expostos ao consumo foi muito importante para a garantia da segurança alimentar. Enquanto a Inspeção Sanitária nas indústrias fabricantes de produtos de origem animal é de atribuição e competência dos órgãos do Ministério da Agricultura (SIF/SIE/SIM), a inspeção no comércio é de atribuição e competência da vigilância sanitária para todos os produtos (alimentos, cosméticos, medicamentos, saneantes domissanitários e produtos correlatos). 28 É função da vigilância sanitária garantir que estes produtos estejam em condições higiênico-sanitárias dentro dos padrões estabelecidos pelas legislações pertinentes, quando disponibilizados para o consumo. A descentralização da vigilância sanitária vem sendo discutida desde a década de 90 com a estruturação do SUS. Falhas no processo normativo e a inadequada distribuição das competências entre as esferas do governo dificultaram esse processo. Em 2006, o Ministério da Saúde divulgou, através da Portaria 399/GM, o Pacto pela Saúde 2006 com a finalidade de consolidar o SUS através da qualificação e implementação da descentralização, organização e gestão, definido as responsabilidades sanitárias e de gestão de cada uma das esferas do governo. As atividades desenvolvidas pela Vigilância Sanitária são um conjunto de ações capazes de prevenir, diminuir ou eliminar riscos à saúde. De acordo com a Portaria Ministerial nº 1.565/94 e Lei Federal nº 9.782/99, e tendo-se como base legal a Lei Orgânica da Saúde (Lei 8.080/90), compete: À Vigilância Sanitária da União: Coordenar o Sistema Nacional de Vigilância Sanitária, prestar cooperação técnica e financeira aos Estados e Municípios e executar ações de sua exclusiva competência. À Vigilância Sanitária do Estado: Coordenar, executar ações e implementar serviços de Vigilância Sanitária em caráter complementar às atividades municipais e prestar apoio técnico e financeiro aos Municípios. À Vigilância Sanitária dos Municípios: Executar ações e implementar serviços de Vigilância Sanitária, com a cooperação técnica e financeira da União e Estado. São competências da ANVISA, entre outras: • Estabelecer normas, propor, acompanhar e executar as políticas, as diretrizes e as ações de vigilância sanitária; • Estabelecer normas e padrões sobre limites de contaminantes, resíduos tóxicos, desinfetantes, metais pesados e outros que envolvam risco à saúde; • Conceder registros de produtos, segundo as normas de sua área de atuação; • Conceder e cancelar o certificado de cumprimento de boas práticas de fabricação; 29 • Interditar, como medida de vigilância sanitária, os locais de fabricação, controle, importação, armazenamento, distribuição e venda de produtos e de prestação de serviços relativos à saúde, em caso de violação da legislação pertinente ou de risco iminente à saúde; • Proibir a fabricação, a importação, o armazenamento, a distribuição e a comercialização de produtos e insumos, em caso de violação da legislação pertinente ou de risco iminente à saúde; • Cancelar a autorização, inclusive a especial, de funcionamento de empresas, em caso de violação da legislação pertinente ou de risco iminente à saúde. MICROBIOLOGIA DO LEITE O leite cru em contato com o meio exterior pode ser considerado um ecossistema aberto, podendo ser contaminado por qualquer microrganismo. Nesse caso, as características do leite, a temperatura e o tempo serão as condições que determinarão quais microrganismos presentes vão se desenvolver e se sobrepor aos demais. É sabido que o leite recém-ordenhado oferece uma resistência natural ao desenvolvimento de microrganismos. Essa ação é coadjuvada por uma série de inibidores naturais; entre eles, as imunoglobulinas específicas, que, geralmente, são encontradas em baixas concentrações no leite, porém podem atuar sobre uma ampla variedade de bactérias. A imunoglobulina M (IgM) possui ação aglutinante, atuando principalmente sobre os estreptococos e levando-os à formação de grandes flocos ou aglomerados. Esses aglomerados de estreptococos, quando o leite é submetido a resfriamento, pela separação rápida da gordura, podem ser arrastados para a camada mais superficial. Entretanto, no leite mantido à temperatura ambiente, esses aglomerados tendem a sedimentar. De qualquer modo, em grande parte são separados do leite eparcialmente privados dos substratos necessários ao seu desenvolvimento. Assim, não são destruídos, mas têm seu desenvolvimento bloqueado pelo esgotamento de nutrientes e pelo acúmulo de metabólitos inibidores. A lisozima e a lactoferrina também se apresentam em concentrações muito baixas no leite. 30 Porém, o sistema lactoperoxidase, apesar de necessitar ser ativado, é muito atuante, principalmente contra microrganismos Gram-negativos. Além da presença de leucócitos, alguns deles têm capacidade de fagocitar microrganismos presentes. O efeito do ambiente pode ser considerado distinto para a multiplicação, a fermentação e a esporulação. De modo geral, as condições de multiplicação são mais restritivas que as condições de fermentação. Por exemplo, as bactérias lácticas não se multiplicam em temperaturas inferiores a 5 ºC, entretanto, se as demais condições forem favoráveis, são capazes de desdobrar a lactose produzindo ácido láctico. O leite é reconhecidamente um alimento completo, na forma líquida, isto é, com grande quantidade de água (87%). Assim, muitos microrganismos encontram nesse alimento substratos suficientes para o seu desenvolvimento (fermentação e multiplicação). O resultado é bem conhecido: o leite cru altera-se rapidamente à temperatura ambiente. Entretanto, as bactérias que se desenvolvem no leite possuem propriedades muito distintas; a lactose não é uma fonte de energia adequada a muitas dessas espécies, outras necessitam de aminoácidos livres como fonte de nitrogênio para o seu desenvolvimento, e o leite fresco contém apenas quantidade muito limitada desses substratos. Assim, essas espécies, mesmo presentes, só começarão a se multiplicar depois que outras tenham hidrolisado proteínas. Quando sob condições de manuseio e conservação ideais, as bactérias que predominam são as Gram- positivas. O leite cru que se encontra sob temperaturas de refrigeração por vários dias apresenta uma parte ou a totalidade das bactérias dos seguintes gêneros: Enterococcus, Lactococcus, Streptococcus, Leuconostoc, Lactobacillus, Microbacterium, Oerskovia, Propionibacterium, Micrococcus, Proteus, Pseudomonas, Bacillus e Listeria, bem como alguns representantes de, no mínimo, um dos gêneros de coliformes. Os microrganismos que não possuem a habilidade de multiplicar-se em baixas temperaturas habituais de armazenamento geralmente são encontrados em números muito reduzidos. 31 No desenvolvimento de estreptococos lácteos há a produção de CO2, que, acumulando-se no meio, estimula o crescimento de lactobacilos e é capaz de inibir o desenvolvimento de bactérias Gram-negativas, além de uma série de outras situações mais específicas, tornando as variações extremamente complexas. Por outro lado, no leite, a Aw (atividade de água) e a força iônica nunca são limitantes para o desenvolvimento bacteriano. O pH pode ser limitante apenas para uns poucos grupos de microrganismos, e o potencial de oxirredução (PO2 (pressão de oxigênio)) inibe apenas o desenvolvimento de anaeróbios estritos. O desenvolvimento tanto de aeróbios quanto de anaeróbios depende, em grande parte, de sua localização no meio. Assim, superficialmente, junto à camada de gordura, a PO2 é muito maior do que no fundo do recipiente. À temperatura ambiente, uma baixa PO2 e um pH baixo são condições que tornam o meio impróprio para o desenvolvimento de um número limitado de espécies presentes no leite. De acordo com a classificação funcional dos microrganismos mais importantes em leite, isto é, por meio da observação de seus efeitos sobre o leite e derivados, os microrganismos dividem-se em: mesófilos (bactérias lácticas, de origem fecal e esporulados), psicrotróficos e, separadamente, como não é o enfoque deste capítulo, alguns microrganismos patogênicos. As bactérias lácticas podem ser classificadas de acordo com dois pontos de vista, opostos, já que podem se comportar como microrganismos deteriorantes ou benéficos. A ação deteriorante ocorre pela fermentação, promovendo alteração das características organolépticas. Todas as bactérias lácticas degradam a lactose. Outras bactérias, como coliformes e enterococos, não são classificadas como lácticas, mas também metabolizam a lactose quando presentes no leite. Como efeito benéfico, as bactérias lácticas são classificadas em três ações: metabolizam lactose, produzindo ácido láctico; participam das degradações proteicas que acontecem durante a maturação; e produzem diacetilacetaldeído, a partir de citrato. Essas ações são de interesse para a indústria, pois as bactérias lácticas (culturas microbianas) são adicionadas ao leite durante seu processamento para a elaboração de diversos derivados lácteos. 32 Por exemplo, a metabolização da lactose em ácido láctico é importante no processamento de leites fermentados; a desnaturação proteica é importante na fase de maturação de alguns queijos; e a produção de diacetil é importante no processamento da manteiga. São bactérias lácticas: ̶Lactobacilos – L. casei, L. lactis, L. bulgaricus, L. helveticus e L. acidophyllus. São constituintes da chamada microbiota láctica, isto é, são microrganismos que se desenvolvem preferencialmente no leite, tendo-o como substrato principal para seu desenvolvimento. São tão comuns quanto os estreptococos lácteos, entretanto, não são facilmente detectados no leite cru, pois são suplantados em desenvolvimento pelos estreptococos. Têm grande importância nas culturas lácticas. Em condições de acidez e temperatura mais elevadas, podem multiplicar-se juntamente com o desenvolvimento dos estreptococos lácteos ou até mesmo suplantá-los. ̶Estreptococos – St. lactis e St. cremoris (principais), St. thermophyllus e St. diacetylactis. Desenvolvem-se preferencialmente no leite, são 75 acidificantes e predominam sobre qualquer outra espécie de microrganismo presente. São as bactérias mais comuns nas culturas ou nos fermentos lácteos. Multiplicam-se entre 10 ºC a 40 ºC. O St. thermophyllus prefere temperaturas ligeiramente superiores a 40 ºC e é uma espécie muito importante na cultura do iogurte. O St. diacetylactis tem a característica de produzir diacetil, um metabólito aromático importante em muitos derivados lácteos que confere o aroma agradável a queijos, coalhada, manteiga, etc. ̶Micrococos – geralmente são microrganismos saprófitas originários da pele circunvizinha da glândula mamária. Pertencem ao grupo láctico, porém são suplantados pelos demais gêneros que se multiplicam mais facilmente. Também são acidificantes e parte desse grupo é termorresistente, suportando as temperaturas de pasteurização do leite. Nesse caso, são importantes na deterioração do leite pasteurizado, pois sofrem uma seleção favorável. A presença de taxas elevadas de bactérias fecais no leite é um indicador de obtenção e de manipulação em condições higiênicas deficientes. 33 Os coliformes metabolizam a lactose, produzindo, entre outras substâncias, ácido láctico e dióxido de carbono. O ácido lático, juntamente com o que é produzido pelas bactérias lácticas, provoca aumento da acidez do leite. Portanto, os coliformes colaboram com os lactococos na alteração do leite cru por acidificação. Controla-se esse efeito com a refrigeração do leite, inibindose, assim, a multiplicação dos coliformes. O dióxido de carbono tem atuação importante na produção de queijos. Liberado pela intensa e ativa multiplicação dos coliformes nos primeiros dias de maturação do queijo fica retido na massa, dando lugar à formação de grande número de pequenos buracos. Se o número de coliformes for excessivo, o gás gerado pode causar estufamento do queijo: é o que se conhece por estufamento precoce de queijos. Quando a maturação avança, o pH terá caído para valores suficientes para inibir a multiplicação doscoliformes, de tal maneira que, depois de dois a três meses de maturação, não se detectam mais coliformes no queijo. De outro ponto de vista, os coliformes são importantes porque algumas cepas são patogênicas, como a Escherichia coli enteropatogênica, podendo representar perigo para saúde do consumidor. Também é importante a presença no leite de bactérias fecais não fermentadoras de lactose, como as do gênero Salmonella; porém, estas são 76 termolábeis, destruídas pela pasteurização, e seu isolamento em derivados lácteos indica contaminação pós-processamento térmico ou falhas no processamento térmico. Com relação aos enterococos, o aspecto mais importante é seu caráter termodúrico, que possibilita que sobrevivam à pasteurização. Outro aspecto dos enterococos é sua capacidade de sobreviver em ampla faixa de temperatura, entre 10 ºC a 45 ºC, e em baixa atividade de água, por isso é possível isolá-los durante o processo de maturação de queijos (quatro a seis meses). Também são acidificantes, mas totalmente indesejáveis, pois exercem uma ação proteolítica e podem ser de origem fecal. Os representantes principais são: E. faecalis e E. durans. Como podem indicar contaminação fecal, sua presença é tomada como sinal de condições higiênicas inadequadas, o que coloca em risco o produto obtido, pela 34 possibilidade da coexistência de espécies patogênicas. Ainda, exercem uma ação proteolítica com o aparecimento de odor/sabor sujo e amargo. Em queijos do tipo frescal, são responsáveis pela formação de múltiplas e pequenas olhaduras (buracos), além de odor e sabor desagradáveis. São representados principalmente pela E. coli e pela Enterobacter aerogenes; entretanto, a maior preocupação quanto aos coliformes é com as espécies patogênicas (Salmonelas, Shiguelas e E. coli enterotoxigênica); Pode ainda fazer parte da microbiota do leite, bactérias esporuladas, principalmente do gênero Bacillus e Clostridium. A importância desses esporos na indústria é principalmente relacionada à produção de leite tratado por UAT (ultra-alta temperatura) e para queijos duros e semiduros. Embora esses produtos sejam submetidos a tratamentos térmicos capazes de destruir células vegetativas, os esporos continuam viáveis ou têm um período de maturação longo, que pode propiciar condições para sua germinação e atividade microbiana. Para os queijos duros ou semiduros, os microrganismos do gênero Clostridium são os mais importantes, pois resistem ao processo de pasteurização e permanecem no queijo. A restrição de oxigênio no interior do queijo proporciona condições para os esporos germinarem e as células vegetativas iniciam sua multiplicação, produzindo gás como um dos produtos 77 resultantes de seu metabolismo. Essa produção de gás faz com que o queijo estufe. Esse processo é chamado estufamento tardio. Vale ressaltar que nem todos os microrganismos mesófilos são fermentativos, alguns se multiplicam sem deteriorar o leite, como é o caso dos estafilococos. Outro ponto importante é que alguns microrganismos mesófilos têm a capacidade de se multiplicar em temperaturas de refrigeração, além de poder possuir estirpes com comportamento mesófilo e outras com comportamento psicrotrófico. Atualmente, além da prova da redutase, a contagem padrão em placas (Standard Plate Count) promove a enumeração por estimativa dos mesófilos aeróbios e facultativos viáveis, capazes de formar colônias visíveis nas 35 condições padronizadas do método quando as placas são incubadas entre 30 ºC a 32 ºC. Os principais microrganismos mesófilos capazes de formar colônias nas condições da contagem padrão em placas são: ̶Micrococcus – Micrococcus e Staphylococcus; ̶Streptococcus – Enterococcus (de origem fecal), Estreptococcos lácticos (grupo N), S. agalactiae, S. dysgalactiae, S. uberis (sendo os três últimos decorrentes de mastite); ̶Bacilos Gram (+) – Microbacterium, Corynebacterium, Arthrobacter, Kurthia, Bacillus (esporulado); ̶Bacilos Gram (−-) – Pseudomonas, Acinetobacter, Flavobacterium, Enterobacter, Klebsiella, Aerobacter, Escherichia, Serratia, Alcaligenes; ̶Miscelânea: Estreptomicetos, Leveduras e Mofos. PRODUÇÃO DE LEITE E DERIVADOS Os produtos obtidos a partir do processamento do leite como matéria- prima são denominados derivados lácteos. Esses produtos servem como alimentos na dieta dos seres humanos, que possuem o hábito de consumir manteigas, cremes de leite, leites fermentados, queijos, doces e o próprio leite pasteurizado ou tratado por UAT. Estima-se que somente o consumo de queijo por um brasileiro anualmente seja cerca de cinco quilogramas, valor que deverá crescer até oito quilogramas em 2017 (MILKPOINT, 2015). Neste capítulo, abordaremos o processamento do leite e dos principais derivados lácteos, descrevendo as características e as etapas de processamento, além de eventuais falhas que podem ser observadas durante a preparação dos produtos, decorrentes de utilização de matéria-prima de baixa qualidade, ou durante o processamento. Para facilitar a compreensão deste capítulo, os produtos e respectivos processamentos serão abordados individualmente. Entretanto, cabe ressaltar que a qualidade, tanto microbiológica como físico-química, de qualquer derivado lácteo está intimamente relacionada com a qualidade microbiológica e físico-química inicial do leite cru refrigerado que será utilizado como matéria-prima no laticínio (COELHO et al., 2014). 36 Sabe-se que a presença de bactérias deteriorantes, como as do gênero Pseudomonas spp., são comumente relatadas em elevadas quantidades quando a obtenção do leite não é realizada com a higiene necessária e poderão afetar diretamente a qualidade dos derivados, reduzindo a vida de prateleira desses produtos, mesmo após tratamentos térmicos, visto que suas 175 enzimas proteolíticas e lipolíticas podem ser termorresistentes (STOECKEL et al., 2016). Então, destaca-se que, para a obtenção de um derivado lácteo com qualidade, se deve processar sempre o leite cru de boa qualidade, ordenhado sob condições higiênicas e obtido de animais saudáveis, cujo armazenamento e transporte, sob refrigeração, foi realizado conforme a legislação vigente. O estabelecimento industrial é responsável pelo controle de qualidade na recepção e seleção da matéria-prima destinada ao beneficiamento ou à industrialização, conforme especificações definidas no RIISPOA (BRASIL, 2017) e em normas complementares. LEITE PASTEURIZADO O leite beneficiado pode ser dividido em duas categorias: leite pasteurizado tipo A e leite pasteurizado. Por leite pasteurizado tipo A entende-se o leite classificado, quanto ao teor de gordura, em integral, semidesnatado ou desnatado, produzido, beneficiado e envasado em estabelecimento denominado Granja Leiteira. As dependências de beneficiamento, industrialização e envase deverão estar localizadas no mesmo prédio da ordenha ou contíguas a essa e obedecer a normas específicas (BRASIL, 2011). Os procedimentos específicos para controle de qualidade do leite tipo A utilizado como matéria-prima no processamento consistem na contagem padrão em placas (máximo de 1,0 × 104 UFC/mL), contagem de células somáticas (3,6 × 105 céls./mL – até o presente momento da redação deste material), pesquisa de resíduos de antibióticos, determinação do índice crioscópico (−0,512 ºC a −0,531 ºC), teor de sólidos não gordurosos (8,4%), densidade relativa (1,028 g/mL a 1,034 g/mL), acidez titulável (14 g a 18 g de ácido lático/mL), teor de 37 gordura (mínimo de 3%), proteína total (2,9 g/100 g), estabilidade ao alizarol 72%, além da aferição da temperatura (4 ºC a 7 ºC) (BRASIL, 2011). As indústrias devem dispor de equipamentos em aço inoxidável, de bom acabamento, para a realização das operações de beneficiamento e enva-se do leite, em