Prévia do material em texto
@oi.cursovet Parasitológicos de Fezes Habilidades em Veterinária II Coleta exames parasitológicos de fezes: como evidenciar alguns patógenos que possam comprometer a homeostase fisiológica do paciente, no Sistema Digestório • Exame Macroscópico do Animal e das Fezes: - análise feita na própria clínica, fazer identificação, anamnese e resenha do animal para checar alteração fisiológica - tentar observar a frequência de defecação e ou perguntar ao tutor - consistência, odor, cor, presença de sangue (hemorragia, TGI), muco (ulceração), proglotes, grávidicas (cestodas - helmintos), parasitos adultos (cestodos, nematódeos, helmintos) ou outras condições anormais - expulsão de parasitos nas fezes - tentar relacionar alterações nas fezes com possíveis patologias (tenesmo: vontade mas sem execução) - proceder a coleta de fezes diretamente do reto do animal ou quando impossível, do solo respeitando o diagnóstico - refrigerar amostra caso análise seja realizada em outro local (transporte da amostra) - copos coletores com tampa rosqueada (coletor universal estéril) ou saco bem vedado para impedir contaminante ambiental, bolsa coletora em pequenos animais e contato direto em grandes - existem manuais técnicos mostrando que esses procedimentos devem ser padronizados # não necessita pegar todas as fezes, em grandes o tamanho ideal para análise seria uma mão cheia - quando já é sabido que existe no animal sintomas e patógenos uma coleta de material sintomático - a quantidade de 20 kg de fezes por animal no caso de rebanhos colher 10 a 15 amostras de cada faixa etária utilizando um frasco por animal - em um rebanho separar grupos pequenos de 10 a 15 para fazer o procedimento de coleta - temperatura da amostra para transporte refrigerada de 2 a 8 graus • Exame Microscópico de Fezes: - permite a visualização de oocistos, cistos e trofozoítos de protozoários, ovos e larvas - como rotina: # exame direto para observar as • Técnicas Coprológicas • estruturas morfológicas e motilidade das formas imaturas dos parasitas # técnicas de concentração de parasitas, avaliar a carga e quantidade do parasita - flutuação: aplicadas para visualização de estruturas como ovos de helmintos e oocistos de protozoários, considerados "leves" necessária a adição de solução saturada (açúcar ou sal) # Willis- Mollay, Faust, MC Master (OPG) - sedimentação: aplicadas para visualização de estruturas como ovos de helmintos e oocistos e cistos de protozoários considerados "pesados", onde a solução ultilizada é apenas água # Hoffman e Lutz - motilidade: empregadas para análise de movimentação e aspectos morfológicos de larvas de helmintos # Roberts e O'Sullivan (Coprocultura) e Baermann- Moraes - Exame Quantitativo: contagem de ovos para se avaliar a carga parasitária. Mais utilizado na Veterinária é a técnica opg (ovos por gamas de fezes) e Coprocultura (grandes animais) - Exame Qualitativo: demonstração das formas parasitárias. Mais utilizado é a técnica de Willis-Mollay (pequenos animais), opg e Coprocultura - Opg e Coprocultura: quali e quantitativo # OPG: - chamada também de técnica de Gordon e whitlock ou McMaster modificada - método se baseia no princípio de flutuação dos ovos de helmintos, oocistos e cistos de protozoários - é uma técnica qualitativa (ovos de cestódeos e trematódeos e formas de protozoários) e qualitativa (no caso dos ovos de nematoides) - protocolo laboral a ser usado: peso de duas gramas de fezes para um volume de 28 ml de solução saturada ou 4 gramas de fezes para um volume de 56 ml de solução saturada - Matérias e equipamentos: # fezes recém colhidas ou refrigeradas (tempo máximo refrigeração uma semana) # seringa adaptada balança analítica # béquer e bastão de vidro ou almofariz e pistilo # proveta com capacidade de 50 ou 100ml # solução saturada com sal ou açúcar # gazes e peneira (filtração) # pipeta Pasteur descartável (3ml) # béquer ou copo coletor (plástico ou vidro) para deposição de mistura pós filtração # câmara de McMaster # microscópio (objetivas 4x, 10x, 40x) # EPI's - metodologia: # macerar bem as fezes dentro do saco # colher fezes com a seringa dos 2,5 ml # colocar 28ml de sol saturada no béquer com as fezes ousaram almofariz e pistilo # misturar bem homogêneo usando para obter uma solução # filtrar ou coar esta solução na peneira forrada com gaze no copo coletor ou Becker e aguardar de 2 a 3 minutos # pipetar 3 ml da área mais próxima da superfície sem provocar e preencher os dois Campos da Câmara de McMaster e evitar a formação de bolhas de ar na área a ser analisada # limpar e levar ao microscópio na objetiva de 4X / retirar as luvas!! # contar os ovos em cada sub Câmara somando todos e o valor obtido multiplica por 50 - Fórmula: # contagem do campo mais contagem do campo 2, / 2 (x 100 ou seja duas gramas de fezes) - Índice de Contagem de Ovos: # até 500 ovos baixo # de 501 a 1500 ovos moderado # acima de 1500 ovos é alto # lembrando que a categoria do animal, filhote gestante ou etc, e a gravidade dos sinais clínicos é relevante • Técnica de Willis-Mollay: - Material: # fezes recém colhidas ou refrigeradas # o resto é igual # tubo de ensaio de capacidade de 5ml para deposição após filtração # lâmina e lamínula - Metodologia: # tudo igual # encher um tubo de ensaio e com uma pipeta Pasteur até formar um menisco # colocar a lamínula sobre o menisco e aguardar no mínimo 10 minutos para evitar um espaço com ar entre amostra e a lamínula # após esse tempo colocar a lamínula sobre uma lâmina # leva ao microscópio na objetiva de 4x podendo acrescentar lugol • Coprocultura - também chamada de Robert e O'Sullivan - mimetizam o ciclo do parasita no ambiente - técnica qualitativa e quantitativa usada sempre complementar ao OPG - medição da cauda da região posterior e aspectos morfológicos da parte anterior das larvas de terceiro estádio de forma infectante sendo capaz de determinar quais gêneros de nematoides e o mitos e estimar a frequência e percentagem - fezes recém colhidas ou refrigeradas - béquer bastão de vidro almofariz e pistilo - acrescentar pequenas quantidades de água - copo de vidro para de posição da mistura identificada com os dados da amostra - para cobrir o copo com as fezes usar: # placa de Petri com diâmetro suficiente para comportar o diâmetro do copo e ter uma sobra de espaço, e barbante # plástico filme com pequenos furos - colocar a água que será Para onde as larvas irão migrar - pipeta Pasteur descartável de 3 ml - lâmina com área delimitada - microscópio e EPI's - metodologia: # colocar as fezes no copo 20 a 30 misturadas e não compactar # tampar o copo deixar espaço entre a placa e o copo com barbante ou fazer pequenos furos se usar o plástico e esperar por 7 dias # adicionar a água no copo até cobrir a amostra em seguida virar o copo com a placa de Petri cuidado!!!! # colocar água no espaço entre o copo e a placa de Petri # esperar 15 minutos para as larvas migrarem # retirar a pipeta Pasteur e colocar no tubo de ensaio # esperar 30 minutos ou centrifugar # coletar no fundo do tubo com pipeta Pasteur # colocar em lâmina lamínula e lugol e analisar com microscópio • Em Carnívoros: - Principais Cistos, Trofozóitos e Oocistos (Willis-Mollay) de protozoários: # Giardia (cisto e trofozoítos) # Isospora (oocistos) - Ovos (Willis-Mollay) e larvas (Coprocultura) de nematodas (helmintos): # Ancylostoma sp. (Ovo e larva) # Toxocara sp. (Ovo e larva) # Trichuris sp. (Ovo e larva) - Principais Cestodas (helmintos) ovos por Willis-Mollay e necropsia/fezes (adultos): # Dipylidium caninum (ovo e parasito adulto, se aloja no Intestino delgado) # Echinococus sp. (ovo e parasito adulto, se aloja no Intestino delgado) # Taenia sp. (ovo e parasito adulto, se aloja no Intestinodelgado) • Em Equinos, Ruminantes, Mamíferos e Suínos: - Principais nematódeos (helmintos) por OPG: # estruturas de ovo e larvas (específicos) - Principais nematodas (helmintos) por OPG encontrados em Equinos: # Parascaris sp. (Ovo e larva) # Oxyuris equi (ovo e larva) - Principal ovo de trematoda (helmintos) por Hoffmann- Moraes encontradas em mamíferos: # Fasciola sp. (Ovo e adulto, encontrado em ductos hepáticos) - Principais nematodas (helmintos) por OPG encontrados em suínos: # Ascaris suum (ovo) # Trichuris suis (ovo)