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Aula 4 – Meios de cultura I Curso de Iniciação Científica do DMP/UFRN O que são os meios de cultura? São a associação de substâncias nutritivas que promovem o crescimento adequado de micro-organismos (mo). Há uma gama imensa de meios de cultura, visando atender às diferentes necessidades nutricionais dos mais diversos mo. Os mo necessitam de condições ambientais específicas para se desenvolverem. 2 Classificação dos meios de cultura: Os meios de cultura podem ser classificados por: 1 - Estado físico: Sólido – Contém 2% de ágar na composição, consistência firme – Formação de colônias. Semi-sólido - consistência intermediária, aproximadamente 0,075 a 0,5% de ágar. Permite o crescimento dos mo em diferentes tensões de oxigênio, verificação da motilidade pela turvação do meio. Líquido ou caldo – Não possuem ágar na composição –Servem para repiques, ativar a cultura e provas bioquímicas. 3 Classificação dos meios de cultura 2. Procedência dos constituintes: Naturais ou complexos: sem composição química definida, geralmente extratos vegetais, animais ou de outros microrganismos. Usados para microrganismos menos exigentes na nutrição. Ex - Meio de Löwenstein Jensen (LJ) contém sais, ovos e glicerol. Artificiais ou quimicamente definidos: composição química definida. Usados para microrganismos mais específicos e exigentes. Ex - CaldoTetrationato contém apenas iodo, KI e água 4 3. De acordo com a composição química Simples – permitem o crescimento bacteriano sem exigências especiais – caldos e ágar simples Especiais – quando cumprem exigências vitais de determinados organismos – ágar sangue, ágar chocolate Classificação dos meios de cultura 5 Classificação dos meios de cultura 6 4. De acordo com a finalidade bacteriólogica Meios de pré-enriquecimento – permitem a dessensibilização de microrganismos que sofreram algum tipo de tratamento (térmico ou químico) – água peptonada, caldo lactosado. Meios de enriquecimento – proporcionam nutrientes adequados ao crescimento dos mo em baixo número ou crescimento lento – caldo selenito cistina. Diferenciais – contêm substâncias que permitem estabelecer diferenças entre mo – ágar MacConkey Classificação dos meios de cultura 7 4. De acordo com a finalidade bacteriólogica Seletivos – contêm substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de mo, permitindo o crescimento de outros – ágar Salmonella-Shigella (SS). Meios de triagem – avaliam determinadas atividades metabólicas permitindo caracterização e identificação presuntiva de muitos mo– meio Instituto Adolfo Lutz (IAL). Principais meios da nossa rotina 8 Ágar MacConkey Destinado para o crescimento de bactérias Gram negativas e indica a fermentação de lactose. Colônias de bactérias que fermentam lactose tornam o meio rosa e as bactérias que não são fermentadoras de lactose tornam o meio amarelo claro. Cor original – rosa avermelhado Fermentadores de lactose + - colônias rosa Fermentadores de lactose - colônias incolores Principais meios da nossa rotina 9 Ágar Sangue De coloração vermelha escura e opaca, oferece excelentes condições de crescimento para a maioria dos micro-organismos. Eritrócitos íntegros favorecem a formação de halos de hemólise Principais meios da nossa rotina 10 Ágar chocolate Utilizado para microrganismos exigentes. Ao meio é adicionado sangue de cavalo, carneiro ou coelho em altas temperaturas Cor original – marrom escuro Neisseria ssp. – pigmento amarelo Haemophilus ssp. – pigmento creme Principais meios da nossa rotina 11 Ágar Salmonella – Shigella O ágar SS possui componentes (sais de bile, verde brilhante e citrato de sódio) que inibem microrganismos Gram positivos. É utilizado para selecionar e isolar espécies de Salmonella e Shigella, em amostras de fezes, alimentos e água. Colônias com centro escuro: Salmonela Colônias incolores: Shigella Principais meios da nossa rotina 12 Ágar nutriente Simples, de fácil preparo e barato, é utilizado na análise de água, alimentos e leite como meio para cultivo de amostras submetidas a exames bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas puras. Cor original – branco opalescente Positivo – crescimento na superfície Vamos colocar a mão na massa! 13 Obrigada! 14 image1.jpg image2.png image3.jpg image4.jpg image7.jpeg image8.jpeg image9.jpeg image10.jpeg image11.jpeg image12.jpeg image13.png image5.jpg image6.png image14.jpg