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Capítulo - O controle do crescimento microbiano II 1- Métodos físicos de controle microbiano. O calor é o método mais utilizado para a esterilização e desinfecção de materiais. Calor úmido; a) Fervura; b) Autoclave; Pasteurização; Calor seco; a) Chama direta; b) Incineração; c) Esterilização com ar quente. Radiação. 9- Perguntas & Respostas. 1) Qual é o processo de esterilização físico mais utilizado? 2) Como funciona uma auto-clave? Métodos físicos de controle de crescimento microbiano. Os métodos físicos para a desinfecção ou a esterilização de materiais, produtos e objetos em geral, mais usados, utilizam de fonte de calor para desestabilizar a população microbiana, ao selecionar, escolher um método físico de controle de crescimento, devem-se observar quais são os materiais a serem esterilizados, para que não ocorra nenhuma alteração em sua composição. Por exemplo, ao esterilizar um alimento, como os enlatados, tem- se um grande cuidado com a não destruição dos componentes nutritivos. Se o material é fabricado com borrachas, os vários ciclos de esterilização com calor pode afetar a integridade deste material. Entre outros componentes do material a ser observado, além do tipo de micro-organismo. Calor úmido, tratamento que mata os micro-organismos por coagulação ou desnaturação das proteínas. Os procedimentos mais utilizados por calor úmido são a fervura e a autoclave. Sobre a fervura, ela atua destruindo as formas vegetativas dos patógenos bacterianos, ou seja, as bactérias que causam doenças, quase todos os vírus, os fungos e seus esporos são eliminados em 10 minutos de fervura. Este processo não é esterilizante, alguns vírus podem manter-se na água fervente por 30 minutos, por exemplo, o vírus da hepatite, e alguns endósporos por mais de 20 horas. Contudo a fervura é um procedimento de assepsia que elimina a maioria dos micro-organismos, especialmente os patógenos. A autoclave é um equipamento utilizado para esterilizar materiais que suportam algumas condições como a alta temperatura, umidade e pressão, entre eles estão meios de cultura, instrumentos, vestimentas, seringas, soluções. Este equipamento é muito utilizado por sua rápida esterilização, que consegue uma temperatura maior do que a da água fervente. Pasteurização, criado para prevenir a deterioração precoce de cervejas e vinhos, utilizando aquecimento leve, suficiente para matar a maioria das bactérias decompositoras do produto, e não tão alta que cozinhasse o alimento ou bebida. Atualmente este processo é amplamente utilizado na produção de alimentos pela indústria, como por exemplo, o leite pasteurizado. Ao pasteurizar algum alimento esperasse eliminar os micro-organismos patógenos, e também reduzir o numero de indivíduos que causam a deterioração dos nutrientes, assim aumentando a vida do produto, quando refrigerado. Algumas bactérias podem sobreviver à pasteurização, porém dificilmente causaram alguma doença. » Ao utilizar o calor como tratamento para o controle de crescimento de micro-organismos, observa-se um fenômeno denominado de tratamento equivalente. Que relaciona a temperatura com o tempo de exposição, por exemplo, a destruição completa de endósporos resistentes leva 1hora e 10 minutos a 115°C, mas se aumentarmos a temperatura para 125°C estes não durariam 7 minutos. Observamos que a eliminação ocorreu nos dois casos, então o objetivo foi alcançado, portanto são tratamentos equivalentes. « Calor seco, onde as células são oxidadas, neste tipo de tratamento o calor é utilizado como chama direta, incineração e/ou ar quente, no primeiro caso temos o exemplo da esterilização de alças de inoculação, muito utilizadas em procedimentos microbiológicas, onde são colocadas diretamente no fogo, bico de Bunsen, até ficarem vermelhas. No caso da incineração, o simples queimar do objeto contaminado já é o suficiente para seu descarte. E por fim, a utilização do ar quente, com a utilização de uma estufa, é um procedimento mais demorado, e dependendo do que for esterilizar pode chegar a 2 horas em forno a 170°C. Filtração é a passagem de um líquido ou gás por meio de uma pequena tela ou filtro, onde ficam retidos impurezas e micro-organismos. Este tratamento utiliza tanto os gases (filtração de ar em salas de queimados em hospitais, para redução no numero de micro-organismos no ar), ou em líquidos. Quando líquido, cria-se um vácuo no recipiente coletor, assim facilitando a filtração pela diferença de pressão. A filtração pode ser utilizada em materiais que são sensíveis ao calor como alguns meios de culturas, vacinas, enzimas e soluções antibióticas. Filtros de membranas (ésteres de celulose ou polímeros de plástico) muito utilizados em laboratórios e indústrias podem chegar a ter poros com 0,22 a 0,45µm para retirar bactérias, e 0,01µm para vírus. Baixas temperaturas, Ao observarmos o freezer da geladeira, que chega a temperaturas de 0°C a 7°C, observa-se um método bacteriostático, ou seja, inibe que a maioria das bactérias produzam toxinas e degradem o alimento, exceto as psicrófilas, mesmo em atividades lentas, modificam o alimento depois de algum tempo. Pelo menos não há crescimento de bactérias patogênicas, com uma exceção. O tempo para ocorrer o congelamento também influencia, quando o congelamento ocorre rapidamente as bactérias ficam dormentes, mas não morrem, o congelamento lento é mais nocivo, pela formação de cristais de gelo que crescem e rompem as estruturas e membranas celulares bacterianas. Alta pressão, as pressões são transferidas uniformemente para os líquidos, onde as moléculas de proteínas e carboidratos são alteradas, característica que inativa as células vegetativas, porém os endósporos são altamente resistentes. Algumas técnicas que alteram a pressão são utilizadas para iniciar a germinação dos endósporos resistentes, para que em seguida possa eliminar as células vegetativas. Dessecação, ou a simples ausência de água pode matar diversos micro- organismos, ou torna-los inativos em estado de dormência, a bactéria da gonorreia dura em torno de uma hora sem água, por outro lado a bactéria da tuberculose pode durar meses em dessecação. Os vírus são resistentes, mas não igual aos endósporos bacterianos que podem durar séculos. Pressão osmótica, tornar o meio hipertônico, com sal ou açúcar, retirando a água das células bacterianas, tratamento semelhante à dessecação. Procedimento utilizado na área de preservação de alimentos. Os fungos são mais capazes de crescer em um ambiente ácido e com pouca umidade, do que as bactérias, isto explica porque frutas são decompostas por fungos, ao invés de bactérias. Radiação, o uso da radiação como agente germicida é utilizado em diversas áreas, apresentam efeitos variados nas células, dependendo do seu comprimento de onda, intensidade e duração. A teoria-alvo explica como ocorre a destruição de partes da célula, onde partículas ou pacotes de energia passam através de porções vitais da célula, atingindo-os com golpes. Um ou mais golpes podem causar apenas mutações não letais, úteis ou não. Mas, quanto mais golpes, mais mutações ocorrerão, aumentando a probabilidade de destruição da célula. As radiações utilizadas para estes fins são classificadas em duas categorias, as ionizantes e não ionizantes. As radiações ionizantes, representadas pelos raios gama, X e feixes de elétrons de alta energia, possuem um comprimento de onda mais curto menor que 1 nm , por isso são mais penetrantes, causando adestruição do DNA. Especialmente os feixes são utilizados na esterilização de produtos farmacêuticos, materiais descartáveis dentários e médicos, como seringas suturas, luvas. Esta radiação também é muito utilizada pelos serviços de correios para esterilizar correspondências, ação de prevenção contra o terrorismo. A radiação não ionizante, sendo pouco penetrante, causam apenas danos ao DNA, por exemplo, raios ultravioletas UV. Com um comprimento de onda maior, acima de 1nm, esta radiação é muito utilizada para controlar os micro- organismos do ar. Uma lâmpada UV pode ter ação germicida em salas de cirurgia e refeitórios, também utilizados em desinfecção de vacinas e produtos médicos. Por serem pouco penetrantes os micro-organismos a serem atingidos devem estar em contrato direto, não tendo a proteção de sólidos como papel, vidro, e tecidos. A longa exposição pode levar a lesões nos olhos, e câncer de pele.
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