aula 10 RIBOSSOMOS

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ORGANELAS CITOPLASMÁTICAS
RIBOSSOMOS
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 DEFINIÇÃO
 Sítios de síntese protéica,constituídos por ribonucleoproteinas
 Reúne aa em uma ordem predeterminada pelo DNA
 São máquinas programáveis
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 Tamanho: 20 – 30 nm (M.E)
Classificados de acordo com sua taxa de sedimentação: 
 70S (procariontes)
 80S (eucariontes)
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 QUAL O PAPEL DOS RIBOSSOMOS?
A SUBUNIDADE MAIOR:
 Catalisa a formação das cadeias peptídicas que ligam os aa para formar uma cadeia polipeptídica
A SUBUNIDADE MENOR:
 Estabelece a correspondência entre os RNAts e os codons do RNAm
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ORIGEM DOS RNAs 
RIBOSSOMAIS
O RNAr É SINTETIZADO
 NO NUCLÉOLO.
TRANSCRITO PRIMÁRIO
 DO RNAr 45S
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 RIBOSSOMOS DE
 PROCARIOTOS
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 COMPOSIÇÃO PROCARIOTOS
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COMPOSIÇÃO DE 
EUCARIOTOS
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RIBOSSOMOS:
Comporta 4 sítios:
Um sitio para o RNAm 
Um sitio de ligação aminoacil-RNAt (sitio A)
 fixa a mol. de RNAt que entra trazendo um aa
Um sitio de ligação peptidil-RNAt (sitio P)
 fixa a mol. de RNAt ligada a extremidade de crescimento da cadeia polipeptídica
Um sitio E 
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 RIBOSSOMOS:
FÁBRICA DE PROTEÍNAS
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Polímeros lineares de aa
SÍNTESE PROTEICA
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SÍNTESE PROTEICA:TRADUÇÃO
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SÍNTESE PROTEÍCA:TRADUÇÃO
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 SÍNTESE PROTEICA
 PROTEOGÊNESE.
A TRADUÇÃO PODE SER CONSIDERADA UMA DAS ATIVIDADES MAIS COMPLEXA EM UMA CÉLULA.
 REQUER :
 OS VÁRIOS RNAt COM SEUS aa LIGADOS
 RIBOSSOMOS
 RNAm
 VÁRIAS PROTEINAS
GTP
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ELEMENTOS NECESSARIOS PARA SINTESE PROTEICA
RIBOSSOMOS
RNAs
PROTEÍNAS
GTPs
AMINOÁCIDOS
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Cada aminoácido em um polipeptídeo é codificado por uma trinca de nucleotídeos.
(4)³= 64 CÓDONS
 
 61 = 20 ≠ aa
TRINCA DE NUCLEOTÍDIOS
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Cada aminoácido em um polipeptídio é codificado por uma trinca de nucleotídeos.
Fenilalanina
Leucina
Isoleucina
Metionina
Valina
Prolina
Serina
Treonina
Alanina
Tirosina
Histidina
Asparagina
Lisina
Aspartato
Glutamato
Cisteina
Triptofano
Arginina
Glicina
Glutamina
TRINCA DE NUCLEOTIDEOS
(4)³= 64 CÓDONS
61 = 20 ≠ aa
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 O código genético
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EXCEÇÃO: MITOCÔNDRIAS
UGA = codifica o Triptofano 
 AUA = determina a Metionina
 AGA, AGG = códon de Parada
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Propriedades do Código Genético: 
Não ambíguo: 1 códon, 1 aa
Degenerado: ≠ códons, aa=
Universal
EXCEÇÃO: MITOCÔNDRIAS
UGA = codifica o Triptofano 
AUA = determina a Metionina
AGA, AGG = códon de Parada
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Componentes:
Subunidade Maior: catalisa a formação das cadeias polipeptídicas.
Subunidade Menor: estabelece a correspondência entre os anticódons do tRNAs e os códons do mRNA.
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 RIBOSSOMOS
* RNAs rRNA
 tRNA
 mRNA
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 tRNA
O tRNA funciona como adaptador entre o molde de mRNA e os aminoácidos.
O tRNA que transporta os aa reconhecem os códons por seu anticódon. 
	
	Anticódon do tRNA entra em contato com a subunidade menor decodificando a informação contida no mRNA.
	A extremidade do tRNA contendo o aa, entra em contato com a subunidade maior.
	
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 mRNA
Contém uma seqüência de nucleotídeos (trinca): códon, que determina a ordem com o qual o aminoácido será adicionado durante a síntese protéica.
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* Proteínas : S, L, Fatores protéicos
* GTP
* Aminoácidos
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PROTEÍNAS RIBOSSOMAIS
As proteinas ribossomais:
S : da subunidade menor reconhecem 
 o RNAm
L : L1 a L33, repartem-se na subunidade 
 maior
As proteínas S e L , asseguram inúmeras funções possibilitando os ribossomos traduzir as informações transportadas pelo RNAm
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 Síntese protéica: 
etapa final da expressão gênica
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 REPLICAÇÃO DE RNA
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SÍNTESE PROTÉICA
PROCARIONTES
SÍNTESE PROTÉICA
PROCARIONTES
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INICIAÇÃO
(IF1 IF2-GTP IF3) 30S → mRNA
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 1. Iniciação 
30S (IF1 IF2-GTP IF3) → mRNA
30S ↔ AUG IF2: tRNA IF1e IF3 liberado
IF3 -50S↔30S IF2 liberado
IF1 Facilita Lig.da 30 S ao RNAm e pode impedir o aa-RNAt de entrar erroneamente no ribossomo
IF2 é uma proteína de ligação ao GTP (necessária para ligar o 1º aminoacil-RNAt)
IF3 pode impedir ligação prematura das subunidades e facilita a entrada do aa-RNAt inicial
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 INICIAÇÃO
IF3 - 50S↔30S 
30S -(AUG) → IF2-GTP: tRNA 
IF1-IF3 liberado
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* tRNAaminoacil-sintetase
f
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ELONGAÇÃO
Sítio A livre: EF-Tu-GTP+ tRNA EF-Tu-GDP liberado
 EF-Ts : GDP → GTP 
1ª ligação peptídica (grupo amino-aa-tRNA:sítio A ↔ grupo carboxila-aa-tRNA: sítio P). Esta reação é catalisada pela peptidil transferase.
Translocação: o ribossomo se move 3 nucleotídeos (códon) no sentido 5’-3’ promovido por EF-G + GTP.
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Ligação Peptídica: peptidil-transferase
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 2. ALONGAMENTO
Sítio A livre: EF-Tu- tRNA 
1ª ligação peptídica. Esta reação é catalisada pela
 peptidil transferase.
Translocação: 
o ribossomo se move 3 nucleotídeos (códon) 
no sentido 5’-3’ promovido por EF-G.
 
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 Ligação Peptídica:
 peptidil-transferase
Translocação: EF-G+GTP
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Translocação: EF-G
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 3. TERMINAÇÃO
UAG, UAA, UGA (sítio A): RF1, RF2, RF3
altera a atividade da enzima (catalisa H²O)
 
 
iadas
 Cadeia liberada
mRNA liberado
Subunidades ribossomais dissociadas
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3.TERMINAÇÃO
UAG, UAA, UGA (sítio A): RF1, RF2, RF3 altera a atividade da enzima peptidil-transferase (catalisa H²O)
Cadeia liberada
mRNA liberado
Subunidades ribossomais dissociadas
RF="release factor’’
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REVISÃO
VALE A PENA VER DE NOVO
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FASE DE INICIAÇÃO
IF1 Facilita Lig.da 30 S ao RNAm e pode impedir o aa-RNAt de entrar erroneamente no ribossomo
IF2 é uma proteína de ligação ao GTP (necessária para ligar o 1º aminoacil-RNAt)
IF3 pode impedir ligação prematura das subunidades e facilita a entrada do aa-RNAt inicial
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A ETAPA DE INICIAÇÃO É O ÚLTIMO PONTO NO QUAL UMA CÉLULA PODE DECIDIR SE mRNA SERÁ TRADUZIDO E A PROTEÍNA SERÁ SINTETIZADA
1.Um aminoacil- RNAt liga-se ao
 sitio A
2.Uma nova ligação é formada a subunidade < move-se por 3 nucleotidios ao longo RNAm
3.Ejetando a molecula de RNAm e colocando em ordem o ribossomo para o próximo aminoacil-RNAt possa se ligar
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FASE FINAL
A LIGAÇÃO DO FATOR DE LIBERAÇÃO AO CODON DE TERMINAÇÃO FINALIZA A TRADUÇÃO
FATORES DE LIBERAÇÃO:
RF-1→UAA,UAG
RF-2→ UGA,UAA
RF-3→Não é codon mas  a atividade dos outros fatores
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FATORES DE TRADUÇÃO
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 FORMAÇÃO DA CADEIA PEPTIDICA ETAPA 1
	LIGAR O 1º aa
RNAt NO RIBOSSOMO.
A LIGAÇÃO PEPTÍDICA
É ACOMPANHADA DA
TRANSFERENCIA DA 
CADEIA POLIPEPTIDICA
NASCENTE DO RNAt DO
LOCAL P PARA O
AMINOACIL-RNAt DO 
LOCAL A.
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SÍNTESE PROTEÍCA:ETAPA 1
 CRESCIMENTO
 SELEÇÃO DO AMINOACIL-RNAt
PARA GARANTIR
 QUE AS TRINCAS SEJAM LIDAS,O RIBOSSOMO SE LIGA RNAm EM LOCAL PRECISO → CODON DE
 INICIAÇÃO→ AUG(SUBUNIDADE MENOR). LOCAL P DAÍ O RIBOSSOMO ESTÁ DISPONÍVEL PARA A ENTRADA DO 2º AMINOACIL-RNAt NO LOCAL A VAZIO QUE É O 1º NO ALONGAMENTO
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ETAPA 2
2.Uma nova ligação é formada a subunidade menor move-se por 3 nucleotidios ao longo RNAm
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ETAPA
2
LIGAR O 1º aa RNAt NO RIBOSSOMO.
 A LIGAÇÃOPEPTÍDICA
É ACOMPANHADA DA
TRANSFERENCIA DA 
CADEIA POLIPEPTIDICA
NASCENTE DO RNAt DO
 
 LOCAL P 
 PARA O
AMINOACIL-RNAt DO 
 
 LOCAL A.
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 ETAPA 3: TRANSLOCAÇÃO
 
 A TRANSLOCAÇÃO É ACOMPANHADA PELO MOVIMENTO DO RNAt-DIPEPTIDEO NO LOCAL A PARA LOCAL P DO RIBOSSOMO EJETANDO A MOLÉCULA DE RNAm E COLOCANDO EM ORDEM O RIBOSSOMO PARA QUE O PRÓXIMO AMINOACIL-RNAt POSSA SE LIGAR
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 Síntese em procariotos
1.Associação da subunidade 30 S com o RNAm ►IF1 e IF3
2.O formilmetionil-tRNA + mRNA+ 30S pela ligação ao IF2-GTP
3. A subunidade maior 50 S se junta ao complexo, o GTP é hidrolisado e o IF2-GDP é liberado
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ALONGAMENTO
1.Aminoacil-RNAt cujo anticodon é complementar ao 2° codon do RNAm entra no A vazio.A ligação do RNAt é acompanhada pela liberação de GTP-Tu(eEF1α).
2.Ligaçaõ peptidica acompanhada da transferencia da lig.peptidica nascente do RNAt no local P para o aminoacil-RNAt no local A ►Peptidil RNAt no local A e RNAt desacetilado no P
3.A ligação EF-G e hidrólise GTP ► translocação do ribossomo em relação ao RNAm.
4.RNAt desacetilado sai e novo aminoacil-RNAt entra no local A
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POLIRIBOSSOMO
RNAm que codifica uma única cadeia polipeptídica→ monocistrômico
RNAm que codifica uma única cadeia polipeptídica→
policistrômico
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 AÇÃO DAS CHAPERONAS
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 PROTEOSSOMO:
DEGRADA PROTEÍNAS NÃO NECESSÁRIAS AS CÉLULAS
AS PROTEINAS DEVERÃO SER MARCADAS PELA UBIQUITINA QUE É ATIVADA POR UMA E1 QUE A TRANSFERE PARA OUTRA ENZIMA E2, DAÍ A UBIQUITINA CONJUGADA COM E2 SE LIGA A PROTEINA QUE DEVERÁ SER DEGRADADA POR MEIO DE UMA LIGASE E3
 E1→E2......O COMPLEXO É RECONHECIDO PELA ANTI-CAMARA QUE DESENROLA A PROTEINA E A INTRODUZ NO CONDUTO DAÍ É DEGRADADA.SÃO GERADOS OLIGOPEPTIDEOS DE VIDA CURTA →CITOSOL
HÁ CONSUMO DE ENERGIA
 UBIQUITINAS E PROTEOSSOMO SÃO LIBERADOS E REUTILIZADOS
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AÇÃO DOS ANTIBIOTICOS
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ATIVIDADES RIBOSSOMICAS
QUESTÕES MÉDICAS
ANTIBIÓTICOS: INTERFEREM NA INFECÇÃO
ESTREPTOMICINA → AFETA INICIO DA TRADUÇÃO DISTORCENDO A FIDELIDADE DA SINTESE
CLOROFENICOL → IMPEDE LIGAÇÕES PEPTÍDICAS
ERITROMICINA → BLOQUEIA A TRANSLOCAÇÃO DO RNAm
TETRACICLINA → IMPEDE OS AMINOACIL-RNAt INGRESSEM NO SÍTIO
QUIROMICINA → INIBE OS FATORES DE ALONGAMENTO
PUROMICINA →OCUPA O SITIO A FAZENDO COM QUE A CADEIA SE LIGUE AO ANTIBIOTICO E NÃO AO AMINOACIL-RNAt
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Impedimento da formação da ligação dipeptídica
Ligação reversível com a subunidade 50s. 
Interfere no ancoramento do complexo tRNA-mRNA-Ribossom
Leitura incorreta do mRNA
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