3. Prática Citomorfologia

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15/7/2013
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Aula prática 3:
Citomorfologia e Microscopia
Microbiologia I
Universidade Federal da Bahia
Instituto de Ciências da Saúde
Departamento de Biointeração
UFBA
Microscopia
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Microscopia óptica
• Microscópio que utiliza luz para observar
espécimes
– Microscopia de campo claro
– Microscopia de campo escuro
– Microscopia de contraste de fase
– Microscopia de fluorescência
Microscopia de campo claro
– Observação do espécime:
• Espécimes corados ou descorados. As bactérias, geralmente
coradas, aparecem com a cor do corante.
– Aplicações:
• Características morfológicas grosseiras de bactérias, leveduras,
bolores, algas e protozoários.
• Ampliação – 1.000 – 2.000.
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Microscopia de campo escuro
– Observação do espécime:
• Geralmente descoradas, aparecem brilhantes ou iluminados sobre
um campo escuro.
• Utiliza condensador de campo escuro com disco opaco – somente
a luz que é refletida pela amostra penetra na lente objetiva
– Aplicações:
• Microorganismos que exibem algumas características morfológicas
especiais quando vivos e em suspensão fluida.
– Ampliação – 1.000 – 2.000.
Microscopia de contraste de fase
– Observação do espécime:
• Graus variáveis de iluminação.
• Um conjunto de raios luminosos sai diretamente da fonte de
luz. O outro conjunto é de luz refletida ou difratada. Quando
os dois conjuntos são reunidos formam uma imagem com
áreas claras e intensidades de cinza até a cor negra.
─ Aplicações:
Exame de estruturas celulares (internas) em
microorganismos vivos.
─ Ampliação – 1.000 – 2.000.
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Microscopia de fluorescência
– Observação do espécime:
• Luminoso e corado, a cor do corante (fluorocromos) é
fluorescente.
– Aplicações:
• Técnicas de diagnóstico - imunofluorescência.
• Técnicas de hibridização - FISH
• Coloração de amostras ambientais
• Ampliação – 1.000 – 2.000.
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Microscopia eletrônica
• Utilizado feixe de elétrons
• Uso de lentes eletromagnéticas para focalizar
um feixe de elétrons na amostra
– Microscopia eletrônica de transmissão
– Microscopia eletrônica de varredura
Microscopia eletrônica de transmissão 
(MET)
– São utilizados elétrons, ao invés de raios luminosos.
– Permite a visualização de proteínas e ácidos nucléicos.
– Corantes utilizados: permanganato, sais de urânio, lantânio
ou chumbo.
• Ampliação – 10.000 – 100.000.
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Microscopia eletrônica de varredura 
(MEV)
– São utilizados elétrons, ao invés de raios luminosos.
– Permite a visualização de características externas, com
células intactas.
– O espécime deve ser recoberto com uma camada fina de
um metal pesado, como o ouro.
• Ampliação – 1.000 – 10.000.
Cocos
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Bacilos
Espirais
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