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2a. Avaliação a Distância – 2013/1 Disciplina: Bioquímica 1 As respostas deverão ser entregues pelo aluno no pólo até o dia 04/05 Nome: ______________________________________________________________ Pólo: _______________________________________________________________ 1ª questão (total 4,0 pontos): 1) Esta questão corresponde ao relatório da aula prática de “Cinética Enzimática”. Você deverá usar os resultados obtidos por seu grupo para respondê-la. a) Calcule a quantidade de p-NP em cada tudo em nmoles/tubo, e construa, em papel milimetrado, a curva padrão (gráfico com os valores da absorbância na ordenada e a quantidade de p-NP, em nmoles, na abscissa). Por fim, calcule o fator da reta obtida (pode ser obtido dividindo-se o valor de absorbância de determinado ponto da reta pelo valor de p-NP referente a esse mesmo ponto). (0,6 ponto) b) Calcule a quantidade de p-NP produzido em cada tubo da curva de temperatura, utilizando o fator da reta da curva padrão. Em seguida, calcule a atividade da enzima em cada temperatura. Preencha a primeira tabela do roteiro de aula prática com os valores obtidos. Por fim, construa um gráfico relacionando a atividade da enzima (em nmoles de p-NP/ min.µg enzima) em função da temperatura.. (0,6 ponto) c) Agora responda as questões a seguir: Qual é a temperatura ótima para esta enzima? Qual o significado fisiológico deste fenômeno? (0,4 ponto) O que aconteceu na reação dos tubos 1 e 4? Qual a diferença no estado da enzima nos tubos 1 e 4? (0,4 ponto) 2) Nesta questão serão fornecidos gráficos obtidos anteriormente com a mesma enzima usada na aula prática e sobre eles você deve responder as questões a seguir. a) O gráfico a seguir mostra o curso temporal da reação, ou seja, como varia a formação de produto ao longo do tempo de reação. Explique o perfil do gráfico. Qual a diferença entre as regiões 1 e 2 do gráfico? (0,5 ponto) b) O gráfico a seguir mostra a dependência da concentração de substrato para a atividade da enzima. Busque uma justificativa que explique o perfil desse gráfico, ressaltando as diferenças de atividade em concentrações de substrato abaixo de 50µM (região 1) e acima de 100µM (região 2). (0,5 ponto) c) Qual a diferença entre as regiões 2 dos gráficos mostrados nos ítens a e b? Diferencie o estado da enzima nas duas condições. (1,0 ponto) 2ª parte (total 2,0 pontos): Os dados experimentais que seguem abaixo foram coletados durante um estudo da atividade catalítica de uma peptidase intestinal com o substrato glicilglicina, na ausência e presença de um inibidor da enzima: Glicilglicina + H 2 O → 2 glicina [S] (mM) Atividade na ausência do inibidor (µmol/mim) Atividade na presença do inibidor (µmol/mim) 1,5 0,21 0,13 2,0 0,24 0,15 3,0 0,28 0,22 4,0 0,33 0,25 8,0 0,40 0,33 16,0 0,45 0,36 a) A partir dos dados descritos na tabela acima, construa uma gráfico chamado “duplo recíproco”, que relaciona os inversos da velocidade e da concentração do substrato na presença e na ausência do inibidor. A partir dos valores obtidos no gráfico, calcule os parâmetros cinéticos da enzima (Km e Vmax) na presença e na ausência do inibidor, e determine qual é o tipo de inibição. Justifique. (1,0 ponto) b) Calcule os parâmetros cinéticos (Km e Vmax) da enzima na presença do inibidor e indique qual tipo de inibição está ocorrendo. (0,5 pontos) c) Pesquise em livros de bioquímica e descreva os outros tipos de inibição enzimática que podemos encontrar. Comente na sua resposta quais as alterações nos parâmetros cinéticos que ocorrem nos tipos de inibição mencionados por você? (0,5 pontos) 3ª parte (total 2,0 pontos): Deficiências vitamínicas podem causar uma série de doenças (ver tabela a seguir). Entretanto, como necessitamos de pequenas quantidades de vitaminas, doenças resultantes de suas deficiências são dificilmente diagnosticadas. a) Explique por que as vitaminas são necessárias em pequenas quantidades, ressaltando um papel exercido por elas em nosso organismo. (1,0 ponto) b) Escolha duas vitaminas da tabela, pesquise sobre elas e registre aqui o que você encontrou, não deixando de mencionar sua natureza química e o mecanismo pelo qual elas atuam no organismo. (1,0 ponto). 4ª parte (total 2,0 pontos): Observe as estruturas dos lipídeos abaixo e responda: quais desses lipídeos podem fazer parte das membranas celulares? Justifique sua resposta. (2,0 pontos)
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