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* Fundamentos Básicos de Laboratório II Prof. Dr. Reginaldo dos Santos Pedroso ESTES/UFU: 2014 Coleta de Espécimes Diagnósticos * * Considerações Iniciais Em relação ao paciente/ cliente/ usuário: Qual exame o paciente /cliente vai realizar? O que ele precisa saber sobre o exame? Onde buscar informações? Em relação ao exame: Para qual finalidade o exame? Qual(is) setor(es) deverá(ão) ser encaminhado(s)? Em relação ao profissional: Sei o que colher/ como orientar a coleta? Sei como colher? Sei o que fazer com a amostra? Sei como orientar o paciente/cliente/usuário? Recomendações pós-colheita. Questões que o flebotomista deve ter em mente para a coleta. * * * * COLETA DE SANGUE * * Composição Sanguínea O sangue humano é constituído por um líquido amarelado, o plasma, e por células e pedaços de células, genericamente denominados elementos figurados. * * Líquido opaco e viscoso – tecido conjuntivo fluido. Vermelho escarlate (arterial) e vermelho escuro (venoso). Apresenta 2 fases: Fase sólida – constituída por células (hemácias, glóbulos brancos e plaquetas); elementos figurados. Fase líquida – representada pelo plasma; suspensão fluida. Composição Sanguínea * * Sangue = células sanguíneas + plasma Plasma = soro + fibrinogênio Soro = plasma - fibrinogênio Composição Sanguínea * * Composição Sanguínea * * Funções do Sangue Transporte de O2, CO2 e hormônios; Manutenção do equilíbrio ácido-básico; Remoção de metabólitos; Manutenção da homeostasia (equilíbrio do organismo) e hemostasia; Controle da temperatura corporal; Defesa contra infecções (leucócitos e imunoglobulinas). * * Coagulação Sanguínea Este processo se inicia a partir do momento em que há lesão e extravasamento de sangue para os tecidos e o contato do sangue com a parede do vaso sanguíneo. Lesão do vaso sanguíneo: Vasoconstrição reflexa; Adesão e agregação plaquetária; Deposição de fibrina (formação do coágulo); Lise da fibrina (retração do coágulo); Recanalização do vaso. * * Coagulação Sanguínea * * Coagulação Sanguínea * * Anticoagulantes * * Ação dos Anticoagulantes O papel dos anticoagulantes é interromper a ativação de um dos fatores de coagulação, impossibilitando a coagulação. A ação destes anticoagulantes acontece de 2 maneiras: Quelando o cálcio, impedindo a transformação de protrombina em trombina; Atuando diretamente nos fatores de coagulação. * * * * Anticoagulantes Evitam a coagulação sanguínea e atrasa a deterioração da amostra: EDTA (ácido etilenodiaminotetracético) Oxalato de potássio Citrato de sódio Fluoreto de sódio Heparina * * Anticoagulantes EDTA (ácido etilenodiaminotetracético): Atua sequestrando o íon cálcio; Conserva células sanguíneas e impede a aglutinação de plaquetas; Utilizado na confecção de esfregaços sanguíneos e tipagem sanguínea; Boa estabilidade (3 a 4h); Baixa toxicidade. * * Citrato de sódio: Age removendo o cálcio do meio; Utilizado em provas de coagulação, VHS e em transfusões de sangue (ACDF – ácido cítrico, citrato, dextrose e fosfato); Não recomendado em dosagens bioquímicas (leva a perda de água pelas hemácias, aumentando o volume relativo de plasma, diluindo os demais componentes); Tempo de coagulação, Tempo de protrombina Não é tóxico. Anticoagulantes * * Fluoreto: Age na captação de íons cálcio; É inibidor enzimático e conservador da glicose; Utilizado em dosagens bioquímicas, principalmente na dosagem de glicose; Não é recomendado a dosagem de urease (enzima). Anticoagulantes * * Heparina (Liquemine®): Anticoagulante natural; Atua na trombina, impedindo a transformação de fibrinogênio em fibrina e impede a agregação plaquetária; Reduz a hemólise; estabilização por até 48 h. Utilizada em gasometria, hematologia, dosagens bioquímicas, radioimunoensaio, prova de fragilidade osmótica em hemácias. Anticoagulantes * * Considerações gerais: A maioria dos anticoagulantes utilizados na prática do laboratório tem como mecanismo de ação a retirada do cálcio do meio; Fluoreto é recomendado quando se vai fazer dosagem de glicose; Heparina atua na trombina, e é utilizada em gasometria; Citrato é recomendado para testes de coagulação. Anticoagulantes * Tubos com vácuo: VERMELHO Sem anticoagulante. Obtenção de soro para bioquímica e sorologia. Exemplo de testes: Creatinina Glicose Ureia Colesterol Pesquisa e identificação de anticorpos e ou antígenos no soro. Tubos para Coleta de Sangue De vidro: sem aditivo. De plástico: contém ativador de coágulo. * Tubos com vácuo: PRETO Os tubos para VHS Contêm solução tamponada de citrato trissódico Utilizados para coleta e transporte de sangue venoso para o teste de sedimentação. Tubos para Coleta de Sangue * Tubos com vácuo: ROSA Tubos para provas de compatibilidade cruzada Duas versões: Com ativador de coágulo » Provas cruzadas com soro. Com EDTA » Testes com sangue total. Tubos para Coleta de Sangue * Tubos com vácuo: ROYAL Três versões: Sem aditivo Com heparina sódica Com ativador de coágulo Utilizados para testar traços de elementos metálicos, como: Cu, Zn, Pb, etc. Tubos para Coleta de Sangue * * * Sequência dos Tubos * * Bibliografia HENRY, J.B. Diagnósticos clínicos e tratamento por métodos laboratoriais. 19ª. ed. Rio de Janeiro: Manole, 1999. LIMA, A.O. Métodos de laboratório aplicados à clínica. 6ª. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1980. MOURA, R. A.; WADA, C. S.; PURCHIO, A; ALMEIDA, T. V. Técnicas de Laboratório. 3ª. ed. São Paulo: Atheneu, 1998. Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/ Medicina Laboratorial para coleta de sangue venoso. 2ª. ed. Barueri: Minha Editora, 2010. * Procedimento para a obtenção do sangue é conhecido como punção venosa, venipunção (venopunção) ou flebotomia. É imprescindível conhecer o tipo de amostra para cada teste: bioquímica (soro ou plasma), hemograma ou tipagem sanguínea (EDTA), glicemia (plasma com fluoreto), coagulação (citrato). * Os tubos plásticos para soro (tampa vermelha ou amarela com gel separador) contêm ativador de coágulo no seu interior, o que pode alterar os resultados dos testes de coagulação. Devido a estes componentes estes tubos devem ser colhidos depois do tubo para coagulação (tampa azul). Abordar o que estudaremos: anticoagulantes, flebotomia, complicações da flebotomia, cuidados pré-analíticos, conservação e armazenamento da amostra. * * * Discutir conceitos: hormônios (mensageiros químicos do corpo), equilíbrio ácido-base, hemostasia, homeostasia. * Processo complexo para evitar a perda de sangue. O mecanismo envolve 13 ou mais fatores, sendo alguns destes, enzimas, quem ativam precursores. Extrínseca. Intrínseca. O cálcio é importante para que se forme o coágulo. * Lesão no vaso. * Os anticoagulantes são agentes complexantes e inibidores enzimáticos. A complexação é uma atração eletrostática entre um íon e um agente quelante de modo que não há transferência de elétrons entre estes. Quanto as cargas, a estrutura final terá como carga a somatória das cargas individuais de cada participante do complexo. Agente quelante: Qualquer estrutura, da qual façam parte dois ou mais átomos possuidores de pares de elétrons não utilizados em ligações químicas primárias, mas sim, usados como "imãs" eletrostáticos para se prenderem a íons metálicos. Dentre os complexantes mais comuns podemos citar a água, responsável (ligada ao íons cobre) pela cor azul das soluções de sais de cobre, a amônia (quando substitui a água ao redor do cobre, produz cor azul mais intensa) e o EDTA (ácido etilenodiaminotetracético (que com o cobre, rivaliza a amônia). O EDTA pode ser considerado o reagente complexométrico (agente quelante) padrão. * * TC, TP, TTPa. * Contêm um anticoagulante e um estabilizador, em diferentes versões: EDTA e fluoreto de sódio, oxalato de potássio e fluoreto de sódio, heparina sódica e fluoreto de sódio, heparina lítica e iodoacetato. * Os tubos plásticos para soro (tampa vermelha ou amarela com gel separador) contêm ativador de coágulo no seu interior, o que pode alterar os resultados dos testes de coagulação. Devido a estes componentes estes tubos devem ser colhidos depois do tubo para coagulação (tampa azul).
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