11 colheita semen

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO CEARÁ 
FACULDADE DE VETERINÁRIA 
BIOTECNOLOGIA DA REPRODUÇÃO ANIMAL 
Colheita e 
Avaliação Seminal 
Vicente José de F. Freitas 
Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução 
www.uece.br/lfcr 
Plano de Aula 
•  Apresentar os conceitos e importância da realização da 
técnica. 
•  Apresentar as diferentes técnicas para colheita do sêmen 
nas diferentes espécies domésticas. 
•  Discutir os diferentes parâmetros seminais para 
avaliação. 
•  Apresentar considerações finais sobre o tema 
Conceitos 
Sêmen Suspenção celular contendo 
espermatozoides e 
fluído secretado pelas glândulas 
sexuais acessórias 
Porção celular Espermatozoides (produzidos nos 
túbulos seminíferos) 
Porção fluida plasma seminal 
(transporte e proteção dos 
espermatozoides) 
Métodos 
• Vagina artificial 
• Eletroejaculação 
• Excitação mecânica 
• Variação conforme a espécie 
Vagina artificial 
•  Corresponde à melhor técnica de colheita, pois simula a cópula natural. 
•  Método utilizado para a maioria das espécies (bovinos, equinos, 
caprinos, ovinos, caninos, entre outros). 
•  A vagina artificial é composta por um tubo rígido com válvula, mucosa de 
borracha, cone flexível e tubo de colheita, recoberto por capa de térmica. 
•  Através da válvula do tubo coloca-se a água a temperatura de 39-45°C e 
regula-se a pressão. 
 
•  A temperatura interna deve estar entre 39 e 42°C. 
•  Vantagens: obtêm sêmen de melhor qualidade e com menor risco de 
contaminação no ambiente. 
 
•  Desvantagem: necessidade de treino para os machos doadores 
Vagina artificial - bovino 
Vagina artificial 
Manequim 
fêmea viva 
Manequim 
inanimada 
Vagina artificial - equino 
Vagina artificial 
Manequim 
fêmea viva 
Manequim 
inanimada 
Colheita de sêmen no touro 
Eletroejaculação 
•  Método consiste em induzir a passagem de uma corrente alternada 
pela medula ao nível da 4ª. vértebra lombar, este estímulo produz a 
ejaculação. 
•  O eletroejaculador é inserido no reto, com eletrodos em forma de 
anéis ou longitudinais que irão promover a estimulação elétrica. 
•  A eletroejaculação é particularmente indicada para colheita de 
machos de diferentes espécies nos quais a colheita por vagina 
artificial não é possível. 
•  Desvantagens: estresse no animal e maior diluição seminal quando 
comparado à colheita com vagina artificial (eletroejaculador aumenta 
a secreção das glândulas sexuais acessórias). 
Eletroejaculação 
Colheita de sêmen no touro por eletroejaculação: a) limpeza do reto, b) 
introdução do eletrodo, c) colheita do sêmen com funil acessório. 
a b c 
Excitação mecânica 
•  Método utilizado por L. Spalanzani (1780) para a obtenção de sêmen 
de cão. 
•  A técnica consiste na excitação manual do corpo do pênis. 
•  Mais utilizado em caninos e suínos. 
•  Suínos → Método da mão enluvada 
•  Desvantagens: método restrito a animais mansos e treinados e 
oferece um risco potencial de contaminação do sêmen por sujidades 
do ambiente. 
Excitação mecânica - canino 
Colheita de sêmen no cão: a) início da excitação, b) manipulação 
contínua, c) desprezo da primeira fração, d) colheita da fração 
espermática 
a b 
c d 
Excitação mecânica - canino 
O sêmen canino é composto de três frações distintas: 
• 1ª fração: é constituída por um líquido claro, aquoso, que representa o 
produto de secreção das glândulas uretrais e seu volume pode variar de 
0,25 a 5 ml; 
• 2ª fração: de cor branca e consistência viscosa, contém os 
espermatozoides e o volume pode variar de 0,5 a 3 ml; 
• 3ª fração: clara, aquosa, pouco consistente, cujo volume varia de 3 a 30 
ml e representa a secreção prostática. 
Excitação mecânica - suíno 
O sêmen suíno é composto de três frações distintas: 
•  Fração pré-espermática: translúcida, 
•  Fração rica em espermatozoides: esbranquiçada e opaca 
•  Fração pós-espermática: translúcida 
Outros métodos de colheita 
Colheita de sêmen em: 
•  Aves – massagem abdominal 
•  Camundongos – retirada do epidídimo e ducto deferente 
•  Peixes – massagem abdominal 
Avaliação de sêmen 
1) Aspecto e volume: 
 
– Coloração uniforme e aparência opaca/cremosa (indica alta 
concentração espermática). 
 
– O volume é utilizado para cálculo da dose espermática (estimativa do 
número total de células). 
 
– Volume médio ejaculado: 
• Bovino: 5 – 8 mL 
• Ovino: 0,8 – 1,2 mL 
• Caprino: 0,8 – 1,2 mL 
• Suíno: 150 – 200 mL 
• Equino: 60 – 100 mL 
• Galo: 0,2 – 0,5 mL 
 
Avaliação de sêmen 
2) Motilidade e Vigor: 
 
– Estimativa subjetiva da viabilidade e qualidade espermática. 
– Análise realizada em microscópio óptico. 
– Avaliação pode ser dificultada em altas concentrações espermáticas; 
– 10 a 20µL de sêmen são colocados entre lâmina e lamínula. 
 
– Motilidade: células móveis são contadas e estimado o percentual. 
– Vigor: velocidade que as células atravessam o campo e formam ondas; 
• Motilidade média do ejaculado é 70 a 90%; 
• Vigor é estimado entre 0 a 5. 
Avaliação de sêmen 
3) Concentração Espermática: 
 
– Pode ser determinada por hemocitômetro e espectrofotômetro. 
– Sêmen deve ser diluído em formol salina ou água par a facilitar a 
contagem (10X - 100X); 
– Rotineiramente é utilizada Câmara de Neubauer para contagem celular. 
 
– Concentração média espermática milhões/mL : 
• Bovino: 800 – 2000 x 106 sptz/mL 
• Ovino: 2000 – 6000 x 106 sptz/mL 
• Caprino: 2500 – 5000 x 106 sptz/mL 
• Suíno: 200 – 300 x 106 sptz/mL 
• Equino: 150 – 300 x 106 sptz/mL 
• Galo: 3000 – 7000 x 106 sptz/mL 
 
Avaliação de sêmen 
4) Morfologia: 
 
– Estimativa do percentual de células normais e das patológicas. 
– Amostra é diluída e conservada em formol salina. 
– Avaliação através de esfregaço e coloração (Hematoxilina-eosina ou 
Giemsa, Rosa de Bengala). 
– 100 a 200 sptz devem ser avaliados. 
 
– Espermatozoides morfologicamente normais: 
• Bovino: 65 – 95% 
• Ovino: 80 – 95% 
• Caprino: 80 – 95% 
• Suíno: 70 – 90% 
• Equino: 60 – 90% 
• Galo: 85 – 90% 
 
Classificação das anormalidades espermáticas: 
• Primárias: associadas a cabeça e acrossomo; 
• Secundárias: gotas citoplasmáticas; 
• Terciárias: defeitos de cauda 
Avaliação de sêmen 
5) Análise Computadorizada de Motilidade: 
 
• Sistema de Análise Espermática Computadorizado – CASA 
– Sistema automatizado (hardware e software) para visualizar e digitalizar 
imagens sucessivas dos espermatozoides. 
– Processa, analisa e fornece informações da cinética individual das 
células e valores estatísticos 
– Têm sido propostos e aplicados na tentativa de minimizar os efeitos da 
avaliação subjetiva do sêmen. 
Considerações 
•  O método de colheita de sêmen varia de acordo com a 
espécie e pode influenciar na qualidade do ejaculado. 
•  A avaliação seminal é essencial para garantia da 
qualidade mínima da amostra e posterior fertilidade. 
•  Técnicas modernas de avaliação (CASA) podem tornar 
mais “qualitativa” o exame dos espermatozoides 
ejaculados.