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UNIVERSIDADE FEDERAL DE CAMPINA GRANDE CENTRO DE SAÚDE E TECNOLOGIA RURAL UNIDADE ACADÊMICA DE ENGENHARIA FLORESTAL CAMPUS DE PATOS ISOLAMENTO DE FUNGOS DE FOLHAS JULIANA SOARES DA SILVA PATOS – PARAÍBA – BRASIL ABRIL, 2012 JULIANA SOARES DA SILVA ISOLAMENTO DE FUNGOS DE FOLHAS Relatório apresentado à disciplina Patologia Florestal como requisito para avaliação. PATOS – PARAÍBA – BRASIL ABRIL, 2012. INTRODUÇÃO ISOLAMENTO DE FUNGOS O isolamento de fungos pode ser feito diretamente a partir de algum substrato ou de um compartimento ambiental (ar, água, solo), utilizando vidraria (tubos de ensaio, placas de petri) e instrumentos (estiletes, pinças, agulhas) esterilizados, com a manipulação em uma zona de segurança próximo a uma chama e/ou em uma câmara de fluxo laminar. Para que ocorra o isolamento dos fungos, é necessário oferecer condições propícias para o desenvolvimento dos mesmos. O isolamento pode ser realizado a partir de câmaras úmidas (recipiente semi-fechado com fonte de umidade (ex. placas de petri forradas com papel filtro embebido com água destilada estéril) ou a partir de um meio de cultura sólido ou líquido, semi-sintético ou sintético (ex. tubos de ensaio ou placas de petri contendo meio de cultura). MEIO DE CULTURA Os meios de cultura (preparações sólidas, líquidas ou semi-sólidas que contêm todos os nutrientes necessários para o crescimento de microrganismos) são utilizados com a finalidade de cultivar e manter microrganismos viáveis no laboratório, sob a forma de culturas puras. Os meios de cultura devem ter na sua composição, os nutrientes indispensáveis ao crescimento do organismo em questão, sob forma assimilável e em concentração não inibitória do crescimento. Além disso, após a sua preparação, cada meio de cultura deve ser submetido à esterilização, por forma a eliminar qualquer organismo vivo contaminante. Os meios de cultura se classificam em: Meios naturais- São aqueles pbtidos de produtos vegetais ou animais, cuja composição e quantidade dos componentes são conhecidas. Meio semi-sintetico- São aqueles que têm parte da composição e quantidades conhecidas dos componentes. Exemplos: CENOURA-DEXTROSE-ÁGAR (BDA) CENOURA....................... 200g DEXTROSE................. 20g ÁGAR............................ 20g O meio de cultura cenoura dextrose ágar, também conhecido como CDA, é recomendado para o isolamento de leveduras e fungos filamentosos. Pode ser utilizado para a contagem padrão em placa de fungos a partir de alimentos, água e outros materiais. É também bastante utilizado para a realização de micro cultivo em lâmina. Esse foi o meio de cultura utilizado por seis dos estudantes na aula pratica. Meio sintéticos- São aqueles que têm composição e quantidade dos componentes conhecidas. OBJETIVOS Mostrar aos alunos quais as maneiras certas de Isolar os fungos, ou seja, ter uma cultura evitando o mínimo de contaminação dos trabalhos realizados. MATERIAIS E METODOS 3.1 MATERIAIS Folha com tecido necrose sadio Papel toalha Lamparina Pinça Alça platina Lápis retroprojetor Placa de Petri Vidro de relógio Lâmina de barbear Lâmina de vidro Durex Água estéril Água sanitária 10% Etanol METODOLOGIA Os procedimentos deram inicio quando todos os alunos já haviam coletado na universidade suas folas com tecidos vivos e tecidos necrosados, com isso lavaram as folas em água corrente e cortaram pedaços onde apresentava tecidos vivos e tecidos necrosados, após isso na capela foi colocado os pedaços da folha em álcool a 50% por 1 minuto para desinfectar a superfície dos tecidos, Em seguida com auxilio da pinça transfere-se os pedaços de tecidos na solução de hipoclorito de sódio(1:3 ou 5% 10%) durante 1 minuto para desinfectar a superfície dos tecidos.Depois passar os fragmentos ou pedaços de tecidos em água estéril para retirar os excessos de álcool e hipoclorito. Depois de 7 dias caso haja crescimento micelial e esporulação, deve-se fazer a repicagem ou transferência do fungo para outra placa de Petri contendo o meio de cultura como CDA, para obtenção de cultura pura. CONCLUSÃO Com isso foi concluído que essas aulas são de grande importância para os alunos, assim ajudando a fazer o isolamento de fungos sem haver contaminação e que a utilização do meio de cultura é importante por que satisfazem as necessidades nutricionais dos micro-organismos. REFERENCIAS Disponível em <http://www.e-escola.pt/topico.asp?id=312> Acessado em 14 de Abril de 2012. Disponível em < http://www.e-escola.pt/topico.asp?id=312 Acessado em 15 de Abril de 2012.
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