Eficácia de Conservantes - Profa. Elisana Moura

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26/10/2016
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Eficácia de Conservantes em produtos 
Cosméticos e Medicamentos
UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAÍBA
CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE
DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS FARMACÊUTICAS
DISCIPLINA: CONTROLE DE QUALIDADE BIOLÓGICO
Profa. Dra. Elisana A. Moura Pires
João Pessoa, 2016
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Escolha do Conserv antes
Produto
Conservante
Microrg
anismo
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
PRODUTO: Fontes de Contaminação Microbiana
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Base aquosa
PRODUTO: Fontes de Contaminação Microbiana
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Contaminação por bactérias
Contaminação por fungos Cremes e loções
Ps = água Produto
P0 = água pura
AW < 0,75
PRODUTO: Fontes de Contaminação Microbiana
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
CONSERVANTES
O primeiro aspecto a ser considerado na escolha do
conserv ante é a regulamentação do uso de substâncias de
ação conserv ante permitidas, uma v ez que é de caráter
eliminatório.
Portaria do Ministério da Saúde 348 de 18 de agosto de 1997 
Resolução RDC No 162 de 11 de setembro de 2001
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Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Principal dif iculdade na Escolha do Conserv antes
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Escolha do Conserv antes
o Amplo espectro de ativ idade;
o Distribuição de f orma apropriada em sistemas emulsionados;
o Compatibilidade com os componentes da f ormulação;
o Não reagir com a embalagem primária;
o Não dev e se decompor durante esterilização térmica;
o Atóxico, inf lamáv el e não irritante;
o Ação microbicida a microbioestática.
Toxicidade dos Conserv antes
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes
Benzilparabeno
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes
Atividade: Fungos, pH < 6,0; ± Bactérias (+). 
Absorvido por polietileno
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Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes 
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes
Ativ idade: Bactérias; (-) contra pseudomonas e f ungo, >pH=6
Concentração: até 0,3%
Solubilidade: Água.
Compatibilidade: Hidroxipropilmetilcelulose 0,5%, Polisorbato
80, lecitina. 
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes
Ativ idade: Bactérias (+) e (-), f ungo (-), pH=5,5 e 6,5
Concentração: até 0,1%
Solubilidade: Propilenoglicol
Compatibilidade: Carbopol (géis aniônicos). Polisorbato 80. 
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes
Fungos ; < Bactérias; não ef iciente Pseudomonas
Solubilidade em água: Benzoato de sódio
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes
Ativ idade: Gram + ; < Gram – e f ungos; pH 5 e 6.
Produtos oftálmicos, injetáveis e orais
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Conserv antes
Blends de conservante. Atv. (gram -). pH 3 a 10
Solvente (solúvel em água, 
propilenoglicol e glicerina
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Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Mecanismos de do Conserv antes
Membrana 
plasmática
Destruição da 
Parede Celular
Lise celular Permeabilidade
Oxidação dos 
componentes 
celulares
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Av aliação da Ef icácia Antimicrobiana de Conserv antes
TESTE DESAFIO 
CHALLENGE TEST
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test)
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test)
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test)
Preparo do inóculo
Bactérias: 30 – 35ºC / 24h 
Fungos: 20 – 25 ºC / 5 a 7 dias 
Carga do inóculo
10E8 UFC/g ou mL
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test)
Quantidade da Amostra
> 20 mL ou 20 g
Volume do inóculo
Não mais que 1% do v olume da amostra –
10E6 UFCg ou mL do produto
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Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test)
Métodos
Plaqueamento/ Métodos de 
contagem
Meios de Cultura
Ágar Caseína Soja 
Ágar Sabouroaud Dextrose 
MONITORAMENTO 
T0, T7 ; T14; T28 dias
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test) – Tombramicina 0,3%
20 mL p/cada 0,2 mL do inóculo cepa ou 
mistura
Inóculo padronizado
Incubação em estufa 22,5 ± 2,5 ºC, nos tempos 0,7,14 e 28 dias.
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test)
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test) – Tombramicina 0,3%
Plaqueamento
1. Inativação do Conservante
2. Diluição
3. Contagem
Conservante: Cloreto de benzalcônio (sal de amônia quaternário)
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Neutralização do Sistema Conserv ante
Viabilidade: Inóculo + Caldo caseína soja
Peptona: Inóculo + Caldo caseína + Tampão 
Peptona cloreto de sódio pH 7.2 + Neutralizante 
Amostra: Inóculo + Produto + caldo caseína soja + 
Neutralizante (>70%)
Parâmetros de USP (2007)
Toxicidade
Eficácia
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Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Validação Neutralização 
Precisão: 10 -30 UFC (25%) e 30-300 UFC/placa (15%)
Exatidão: Recuperação > 70%
Linearidade (0,2; 0,4; 0,6; 0.8; 1,0; 1,2)
Parâmetros de USP (2007)
Robustez: Meio, [] neutralizante, temperatura de 
incubação.
Controle positivo: Polissorbato 80 0,3% + solução salina + inóculo.
Controle negativo: Polissorbato 80 0,3% + solução salina.
Av aliação da Capacidade Inibitória
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste de Ef icácia
Precisão: 10 -30 UFC (25%) e 30-300 UFC/placa (15%)
Eficácia de Conservantes em produtos Cosméticos e Medicamentos
Teste desaf io (Challenge Test)
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Teste desaf io (Challenge Test) PRODUTO MO TEMPO
0 7 14 28
TOBRAMICINA
0,3%
A. niger 9,1x10E4 4x10E1 5x10E1 <10
C. albicans 7,2x10E9 <10 <10 <10
E. coli 9,0x10E7 <10 <10 <10
P. aeruginosa 6,0x10E9 9,0x10E1 9,0x10E1 <10
S. aureus 1,6x10E10 <10 <10 <10
CONTROLE 
(tampão + 
neutralizante)
A. niger 4,95 6,00 6,00 6,00
C. albicans 5,90 6,00 6,00 6,00
E. coli 6,30 6,00 6,00 6,00
P. aeruginosa 6,00 6,08 6,10 6,10
S. aureus 6,30 6,30 6,30 6,30
TABELA: Número de MO sobreviventes UFC/mL no teste de eficácia.
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PRODUTO MO TEMPO
0 7 14 28
TOBRAMICIN
A 0,3% 
A. niger 4,95 0 0 0
C. albicans 6,09 0 0 0
E. coli 5,90 3,3 0 0
P. aeruginosa 6,10 1,95 1,95 0
S. aureus 6,10 0 0 0
CONTROLE 
(tampão + 
neutralizante)
A. niger 4,95 6,00 6,00 6,00
C. albicans 5,90 6,00 6,00 6,00
E. coli 6,30 6,00 6,00 6,00
P. aeruginosa 6,00 6,08 6,10 6,10
S. aureus 6,30 6,30 6,30 6,30
TABELA: Logaritmo na base 10 do número de sobreviventes (log UFC/mL) 
dos MO no teste de eficácia.
PRODUTO MO TEMPO
0 7 14 28
TOBRAMICINA
0,3% + 
conservante 
teste
A. niger 2,69 3,0 3,0 3,9
C. albicans 5,90 6,0 6,0 6,0
E. coli 3,60 4,0 0 4,11
P. aeruginosa 1,90 0 0 0
S. aureus 6,60 0 0 4,3
CONTROLE 
(tampão + 
neutralizante)
A. niger 4,95 6,00 6,00 6,00
C. albicans 5,90 6,00 6,00 6,00
E. coli 6,30 6,00 6,00 6,00
P. aeruginosa 6,00 6,086,10 6,10
S. aureus 6,30 6,30 6,30 6,30
TABELA: Logaritmo na base 10 do número de sobreviventes (log UFC/mL) 
dos MO no teste de eficácia.
Ref erência
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