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Prof. Dr. Wagno AS NUTRIÇÃO, METABOLISMO, CULTIVO E CRESCIMENTO BACTERIANO Fatores Químicos Necessários para o Crescimento Bacteriano Carbono Bactérias Autotróficas: Realizam fotossíntese (CO2). Ex.: Cyanobacterias, algas e plantas Bactérias Heterotróficas: Retiram o carbono de compostos orgânicos matéria orgânica - decomposição de organismos mortos compostos orgânicos - glicose, lipídeos e proteínas Bactérias parasitas Fatores Químicos Necessários para o Crescimento Bacteriano Nitrogênio * Parte essencial dos aminoácidos * Necessário para síntese de ácidos nucléicos * Fontes orgânicas: aminoácidos ou sais orgânicos de amônio * Fontes inorgânica: nitratos, amônia, nitrogênio atmosférico Hidrogênio, Enxofre e Fósforo * Hidrogênio faz parte de muitos compostos orgânicos * Enxofre é necessário para a biossíntese dos aminoácidos cisteína, cistina e metionina * Fósforo é essencial para síntese de ácidos nucléicos e adenosina (ATP). Fatores Químicos Necessários para o Crescimento Bacteriano Oxigênio Aeróbios Estritos: Só crescem na presença de O2. Exemplo: bactérias do gênero Pseudomonas Anaeróbios Estritos: O O2 inibe o seu crescimento. Exemplo: Gênero Clostridium Anaeróbicos Facultativos – podem crescer com ou sem O2. Exemplos: Escherichia coli e algumas leveduras Anaeróbicas Aerotolerantes – “toleram” a presença de oxigênio. Exemplo: bactéria Lactobacillus acidophillus Microaerofila - Só crescem em ↓ conc. de O2 Exemplo: a maioria das espécies de Campylobacter (agente causador de gastroenterite). Outros elementos nutricionais * vitaminas e elementos metálicos como sódio, potássio, cálcio, magnésio, manganês, ferro, zinco, cobalto, cobre e níquel, selênio, tungstênio, vanádio ou boro Fatores Químicos Necessários para o Crescimento Bacteriano Reações Catabólicas – Produção de ATP Reações Anabólicas – Consumo de ATP Metabolismo bacteriano - Reações químicas que ocorrem na célula 1 – Glicólise Baixa produção de energia a partir da oxidação da glicose até ácido pirúvico (piruvato) 2a - Fermentação Baixa produção de energia a partir de um açúcar sem usar oxigênio Processos fermentativos de importância econômica: produção de iogurtes (Streptococcus thermophilus e Lactobacillus bulgaricus), queijos (bactérias láticas em geral) e vinagre (Acetobacter) 2b - Respiração aeróbica Alta produção de energia (ATP) a partir do oxigênio, do ácido pirúvico e da água. Fotossíntese, glicólise, fermentação, respiração aeróbica são uma cadeia de reações bioquímicas (via metabólica) nas quais o produto de uma reação serve de substrato (material para reação) para a próxima. Metabolismo energético Respiração anaeróbica Os microrganismos são capazes de utilizar muitos outros aceptores finais de elétrons além do oxigênio. Exemplos: Redução do nitrato a nitrito. Ex.: Escherichia coli Denitrificação: existem espécies de bactérias, como Pseudomonas aeruginosa que são capazes de reduzir nitrato a nitrogênio gasoso Redução do sulfato: processo estritamente anaeróbico e é conduzida por um grupo de bactérias denominadas de redutoras de sulfato ou sulfobactérias Metabolismo energético Temperatura Específica Mínima , Ótima e Máxima Fatores Físicos Necessários para o Crescimento Bacteriano (1) pH Neutrófilas: pH 5,4 a 8,5 (7,0) - A maioria das bactérias patogênicas está incluída nessa categoria Acidófilas: pH 0,1 e 5,4 - A bactéria Helicobacter pylori que pode colonizar a parede estomacal Alcalinófilas: pH 8,5 e 11,5. Ex.: Vibrio cholerae (9,0), Alcaligenes faecalis (9,0). Fatores Físicos Necessários para o Crescimento Bacteriano (2) Pressão Osmótica O fluxo de água se dá através da membrana semipermeável A maioria dos nutrientes estão dissolvidos em água A célula bacteriana pode está sujeita a três soluções osmóticas Fatores Físicos Necessários para o Crescimento Bacteriano (3) Atmosfera de Gases Fatores Necessários para o Crescimento Bacteriano Crescimento bacteriano Crescimento: aumento do n° de indivíduos presentes na população Divisão Binária: processo de divisão celular conservativa (mitose) a partir de uma célula inicial, originando duas células idênticas. Toda bactéria tem seu ambiente ideal onde encontra condições ótimas de crescimento Obtenção de curvas de crescimento Crescimento bacteriano Fase lag Fase de adaptação metabólica ao novo ambiente; (↓Divisão) Fase exponencial ou logarítmica Fase na qual o número de células da população dobra a cada geração (Divisao > Morte) Fase estacionária Fase em que a taxa de crescimento diminui significativamente devido às condições limitantes do meio. (Divisão = Morte) Fase de declínio As células perdem a capacidade de se dividir (Morte > Divisão) Fases do crescimento bacteriano Cultivo bacteriano Critérios para o cultivo: 1. Nutrientes corretos 2. Quantidade de água necessária 3. pH ajustado 4. Quantidade ou ausência de oxigênio adequada Preparo de meios de cultura que contenham uma fonte de carbono apropriada ao organismo que se quer crescer O meio de cultura deve oferecer condições o mais próximas possível das condições in vivo Crescimento Bacteriano Isolamento Bacteriano Identificação Bacteriana Aplicações 1. Estado físico Líquidos (isentos de ágar-ágar) ou caldos Sólidos (1,5% de ágar-ágar) Semi-sólidos (0,3-0,5% de ágar-ágar) 2.Composição Naturais: caldo de carne Sintéticos (substâncias químicas perfeitamente conhecida, normalmente é um pó ao qual se adiciona água) Semi-sintéticos aos quais se adiciona uma substância natural (ex. sangue) Meios de cultura - classificação Cultivo bacteriano Enriquecidos Meios aos quais foram adicionados produtos biológicos (ex. sangue) Meios seletivos Meio de cultura cujos fatores físico-químicos favorecem o crescimento de uma bactéria especifica impedindo o crescimento de outras Diferenciais É utilizado para fácil identificação da colônia da bactéria de interesse em culturas mistas. Conservantes Preserva a amostra clínica e serve como meio de transporte. Ex.: Meio de Cary-Blair (fezes); Stuart ( aeróbias e anaeróbias facultativas)
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