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Questionário de Genética Se uma molécula bifilamentar de DNA tem 15% de timina, quais as porcentagens de todas as outras bases? 15% timina; 15%adenina; 35% guanina; 35% citosina. Um vírus contém 10% de adenina, 24% de timina, 30% de guanina e 36% de citosina. O material genético desse vírus está em um DNA unifilamentar, DNA bifilamentar, RNA bifilamentar ou RNA unifilamentar? Justifique sua resposta. DNA unifilamentar. Justificativa: A base timina está presente, logo é um DNA; e as bases complementares não estão em porcentagens iguais, então não é uma fita dupla. O que é replicação semiconservativa? É a replicação na qual os filamentos originais de nucleotídeos são conservados, porém combinados com filamentos recém-sintetizados, conservando 50% da molécula original em cada molécula nova. Desenhe uma molécula de DNA sofrendo replicação eucariótica linear. Em seu desenho, identifique:1) origem; 2) polaridade (pontas 5’ e 3’) de todos os moldes e filamentos recém-sintetizados, 3) filamentos leading e lagging, 4) fragmentos de Okazaki e 5) localização de primers. Quais são os três requisitos principais da replicação? Um molde de DNA unifilamentar, Matérias-primas para serem montadas em um novo filamento de nucleotídeos, Enzimas e outras proteínas que “leiam” o molde e montem os substratos em uma molécula de DNA. Que substratosão usados na reação de síntese de DNA? Trifosfatos de desoxirribonucleosídeos (dNTPs), cada um consistindo em um açúcar desoxirribose e uma base (nucleosídeo) ligado a três fosfatos. Cite as principais proteínas que tomam parte na replicação de DNA. Cite a função de cada uma no processo de replicação. Helicase: abrir as duas hélices do DNA para expor as bases. DNA polimerase: adiciona novas bases à ponta 03 OH, polimerizando a nova fita de DNA crescente. Primase: sintetiza um primer de RNA para fornecer a extremidade 3OH necessária para a DNA polimerase adicionar novas bases. Ligase: une os fragmentos de Okazak;i e o filamento de DNA ao primer que foi substituído por DNA. Porque é necessária a primase para a replicação? Porque a DNA polimerase é incapaz de iniciar a duplicação, uma vez que sua ação é adicionar novas bases à ponta 3OH do filamento de DNA crescente. Em que sentido se dá a replicação do DNA? Qual filamento de DNA é replicado de maneira contínua e qual é replicado de maneira descontínua e porque? 5’ para 3’. Quais as principais classes de RNA celular? Onde você esperaria encontrar cada classe de RNA dentro da célula. RNA mensageiro: preferencialmente no citoplasma. RNA ribossômico: preferencialmente no citoplasma. RNA transportador: preferencialmente no citoplasma. RNA pequeno nuclear: núcleo RNA pequeno nucleolar: núcleo Que partes do DNA constituem uma unidade de transcrição? Desenhe e nomeie uma típica unidade de transcrição em uma bactéria Um promotor, uma sequência condificante de RNA e um finalizador. Quais os quatro estágios básicos da transcrição? Descreva o que ocorre em cada estágio. Reconhecimento do promotor Iniciação, no qual o aparelho de transcrição é montado no promotor e começa a síntese de RNA; Alongamento, no qual a RNA polimerase se move ao longo do DNA, deselicoidizando-o e adicionando novos nucleotideoa, um de cada vez, à ponta 3’ do filamento crescente de RNA Término, o reconhecimento da pontada unidade de transcrição e a separação da molécula de RNA do molde de DNA. Como o processo de transcrição em células eucarióticas é diferente do de bactéria A condensação do DNA interfere na transcrição, devido à ligação do DNA eucariótico à proteínas histonas. Outra diferença importante é que em células eucarióticas há duas sequencias que afetam a transcrição – os promotores, que estão adjacentes aos genes; e os acentuadores, que podem estar distantes dos genes que eles afetam. O promotor do DNA eucariótico também é mais complexo, consistindo em um cerne do promotor, que é necessário para níveis mínimos de transcrição, e um regulador do promotor que afeta a taxa de transcrição. Há também maior quantidade de tipos de enzimas RNA polimerase, os fatores gerais da transcrição – que auxiliam na ligação da RNA polimerase ao cerne do promotor, e as proteínas ativadoras da transcrição, que se ligam aos promotores e acentuadores e interagem com o aparelho basal de transcrição no cerne do promotor. Compare e contraste a transcrição e a replicação. Como esses processos são similares e como são diferentes? Ambos usam um molde de DNA como molde, ocorrem no sentido 5 para 3, sintetizam uma molécula que é complementar ao molde e com polaridade inversa, e usa trifosfatos de nucleosideos como substratos. No entanto, na replicação o DNA todo é copiado, enquanto que a transcrição é um processo seletivo – apenas algumas partes do DNA são transcritas e, normalmente, apenas um filamento é utilizado como molde; e a transcrição está sujeita a vários mecanismos regulatórios. O tipo de nucleosideo utilizado também diferencia estes processos: na replicação são utilizados os desoxirribonucleosideos, e na transcrição são os ribonucleosideos. O RNA é transcrito na forma em que é traduzido ao nível dos ribossomos? Explique. Não. O RNA eucariótico sofre processamento antes de ser traduzido. Os íntrons são removidos e os éxons são unidos, é adicionada uma cauda poliA na extremidade 3’ e a CAP – guanina modificada – na extremidade 5’. Explique: Promotor É uma sequencia de DNA que é adjacente ao gene e necessária para o início da transcrição – é reconhecido pelas proteínas acessórias e é o ponto de inicio da transcrição. Íntron Éxon Cauda poli(A) Região 5’ não traduzida Sítio de ínicio da transcrição Cap 5’ 17.Quais são alguns tipos de modificações pós-traducional das proteínas? 18.Explique como alguns antibióticos funcionam afetando o processo de síntese de proteínas. 19.Cite seis níveis diferentes nos quais a expressão gênica pode ser controlada. 20.Desenhe um quadro ilustrando a estrutura geral de um óperon e identifique suas partes. � 21.Qual a diferença entre mutações somáticas e mutações na linhagem germinativa? 22.Qual a diferença entre uma transição e uma transversão? Que tipo de substituição de base é geralmente mais comum? . 23.Qual a diferença entre uma mutação de mudança de sentido e uma mutação sem sentido? Uma mutação silenciosa e uma muta 24.Qual a finalidade do teste de Ames? Como as bactérias his_ são usadas nesse teste? 25Explique um dos mecanismos de reparo de DNA. 26Cite alguns dos efeitos e aplicações da tecnologia do DNA recombinante. 27.Que papel as enzimas de restrição têm em bactérias? Como as bactérias protegem o seu próprio DNA da ação de enzimas de restrição? 28.Explique como a eletroforese em gel de agarose é usada para separar fragmentos de DNA de tamanhos diferentes. 29.Qual a finalidade da transferência de Southern? Como ela é feita? 30.Quais as diferenças entre as transferências de Southern, Northern e Western? 31.Como os genes em uma biblioteca genômica diferem de uma biblioteca de cDNA? Como ela é criada? 32.Como são usadas as sondas para triar bibliotecas de DNA 33.O que são animais transgênicos e como eles são usados? 34.Cite quatro aplicações da tecnologia do DNA recombinante. 35.Como as sequêcias de DNA podem ser usadas em investigações criminais e determinação de paternidade?
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