Microarrays (teoria)

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Uniasselvi Fameblu II
Acadêmica: Beatriz Henkels
Discipina: Engenharia Genética
Biomedicina – Noturno – 5° semestre
Microarrays (Microarranjos)
Definição:
É uma coleção de pontos microscópicos, usualmente preenchidos com DNA, que contém sondas para determinar moléculas-alvo produzindo resultados quantitativos.
Uma molécula-alvo em determinada condição pode se ligar por hibridação em “arranjo” predefinido de moléculas denominadas probes (sondas) quimicamente ligadas à superfície sólida (Laminas, membranas de náilon, superfícies de quartzo, perolas revestidas)
Histórico:
Evolução dos blot
Existe desde 1980 e 1990
1ª descrição: 1995 com microarrays miniaturizados
1ª empresa de microarrays no mundo: Affymetrix
Principio (metodologia):
Consiste na hibridização de uma sonda complementar (probe) e uma molécula-alvo marcada com um fluoróforo, fixadas em uma superfície sólida através de agulhas robotizadas, fotolitografia ou por impressão a jato.
Etapas: Hibridização, aquisição de imagens e análise de dados. 
Cuidados para realização do microarray:
Os casos e os controles devem ser pareados e processados conjuntamente
Não se deve mudar o operador da etapa de síntese ou durante as extrações de RNA
Método de extração único
As máquinas não devem ser diferentes
Número de amostra bem delineado (obtenção da estatística desejada)
Amostras em pool (conjunto de amostras testadas simultaneamente) devem ser muito bem selecionadas
Analisar se é necessário fazer replicatas técnicas ou biológicas (técnicas: experimentos independentes com reagente e estrutura distintos; biológicas: visam a reprodutibilidade do DNA)
DNAgenomico pode atrapalhar na hibridação especifica com as probes e ainda ser “coibridantes” em protocolos que usam cDNA
Utilização:
Análise de expressão gênica
Análise de mutações pontuais
Diagnóstico de doenças infecciosas e genéticas
Área forense
Farmacogenômica
Referências:
http://dle.com.br/biologia-molecular-genetica-humana/analise-cromossomica-por-microarray
http://www.embl.it/training/scienceforschools/teacher_training/teachingbase/microarray_port/introduction_microarrays_port.pdf
https://pt.wikipedia.org/wiki/Microarranjo
Strachan,T; Read, A. Genética Molecular Humana. 4ª edição. Artmed: Porto Alegre, 2013.