Slide 15--Eng-Bioq-Microbiologia de Águas

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Microbiologia de Águas
Prof. Edmar das Mercês Penha
1 - Introdução
� A água estéril não é encontrada na Natureza. Ela
recebe sua flora microbiana das mais diversas
fontes: solo, ar, águas sujas, plantas e animais
mortos, etc.mortos, etc.
� Isto significa que a água pode conter microrganismos
de várias espécies. O número de espécies presentes
depende da fonte contaminante.
2 - As fontes de água na 
natureza
3 - Qualidade da água
� Como a água pode conter excretas poluidores de
seres doentes (despejos de esgotos domésticos,
fossas ou excrementos de animais), ela pode ser
fortemente perigosa à saúde quando usada parafortemente perigosa à saúde quando usada para
abastecimento de água potável ou para recreação
em balneários.
� A análise bacteriológica de águas consiste na
pesquisa do chamado grupo coliforme que, quando
presente, evidencia a contaminação fecal.
4 - O grupo coliforme
� O principal grupo de microrganismos típicos de
esgoto e do trato intestinal de animais de sangue
quente são as bactérias do grupo coliforme, os
estreptococos fecais (ex.: Streptococcus faecalis) e oestreptococos fecais (ex.: Streptococcus faecalis) e o
Clostridium perfringens.
� Os coliformes são, inclusive, considerados o padrão
de potabilidade microbiológica de águas e de alguns
alimentos.
5 - Quem são os coliformes?
� Os coliformes pertencem a família
Enterobacteriaceae e englobam diversos gêneros.
� As clássicas espécies deste grupo são a Escherichia
coli e o Enterobacter aerogenes.coli e o Enterobacter aerogenes.
� Outros gêneros do grupo são: Proteus, Salmonella,
Shigella, Klebsiella, Citrobacter, Yersinia,
Pseudomonas, e Alcaligenes.
� Deste grupo, procura-se detectar os mais
representativos que são: Escherichia coli,
Salmonella, Shigella e Proteus.
6 - Características dos 
coliformes
� Características do grupo coliforme: são bastonetes
aeróbios e facultativos, Gram negativos, não
esporulados que fermentam lactose com produção
de ácido e de gás e não são inibidos pelo corantede ácido e de gás e não são inibidos pelo corante
verde brilhante.
7 - Colimetria
� A determinação da presença de coliformes se faz
através de um teste denominado Processo dos
Tubos Múltiplos que pode informar também umaTubos Múltiplos que pode informar também uma
estimativa da concentração destes microrganismos
na amostra, pela estimativa do número mais provável
de coliformes (NMP).
7.1 - Amostragem
� a) Coleta de amostra – uma quantidade significativa
(cerca de 100 mL) deve ser coletada em recipientes
limpos e estéreis. No caso de água clorada, o frasco
deverá conter um pouco de Tiossulfato de sódiodeverá conter um pouco de Tiossulfato de sódio
(0,75%).
� b) Estocagem – em geladeira (4 a 10 graus Celsius)
se a análise não for imediata, por até 24 horas.
7.2 - A técnica (a)
� a) Teste Presuntivo – visa evidenciar a possibilidade da
presença de coliformes. Usa-se o Caldo lactosado simples e
duplo em pH 6,8 a 7,0, esterilizados e distribuídos em tubos de
ensaios (10 mL/tubo) com tubos de Duhran.
Faz-se a inoculação da amostra em 3 séries de tubos (3 ou 5� Faz-se a inoculação da amostra em 3 séries de tubos (3 ou 5
tubos/série). São inoculados, em cada série, 10 mL (série com
caldo duplo), 1 mL e 0,1 mL por tubo.
� Incuba-se por 48 horas a 37 graus Celsius.
� A presença de gás evidencia a presença de contaminantes,
embora eles possam ser não coliformes.
7.2 - A técnica (b)
� b) Teste Confirmativo – visa confirmar a presença de
coliformes. Usa-se o Caldo lactose-verde brilhante –bile de boi
(que possui substâncias inibidoras do crescimento de bactérias
fermentadoras de lactose não-coliformes).
� A partir dos tubos positivos do Teste Presuntivo transfere-se por
alçada inóculo para 3 séries de 3 ou 5 tubos/série, contendo 10alçada inóculo para 3 séries de 3 ou 5 tubos/série, contendo 10
mL de Caldo verde brilhante, com tubos de Duhran. Incubar a
37 graus Celsius por 48 horas.
� A presença de gás nos tubos confirma a presença de
coliformes.
� A leitura da concentração de microrganismos na amostra será
feita numa Tabela, através da contagem do número de tubos
que deram resultado positivo por série. A concentração de
coliformes totais será expressada em NMP/100 mL de
amostra.
7.2 - A técnica (c)
� c) Teste Completo - Para a confirmação da presença de
Escherichia coli na amostra será obtida pela realização do
Teste Completo, pela semeadura de inóculo proveniente de um
dos tubos positivos do teste anterior par o chamado E.C.
medium um meio específico par o crescimento de Escherichiamedium um meio específico par o crescimento de Escherichia
coli. O material será incubado, em banho-maria, a 44,5 graus
Celsius por 48 horas. A formação de gás nos tubos confirma a
presença de Escherichia coli eo reultado poderá ser expressado
como concentração de coliforme fecal.
8 - Classificação sanitária de 
águas
� 8.1 – ÁGUA POTÁVEL - não deve conter microrganismos
patogênicos e produtos químicos nocivos mantendo as
características normais de limpidez, sabor e dureza.
� A água potável deve apresentar contagem ≤ 1 coliforme por 100
mL.mL.
� 8.2 – ÁGUA CONTAMINADA - é aquela que apesar de manter
uma boa aparência contém microrganismos patogênicos e
produtos químicos nocivos.
� 8.3 – ÁGUA POLUÍDA – é aquela maculada por esgotos ou
suspensões de agentes contaminantes e tendo sua aparência
totalmente alterada.
9 - Padrão de água para fim 
recreacional
� As bactérias intestinais são excretadas nas fezes de homens e
animais na base de 50 milhões/grama. O esgoto sanitário
doméstico bruto possui cerca de 3 milhões de bactérias
coliformes por 100 mL
A água para uso recreacional deverá conter:� A água para uso recreacional deverá conter:
� EUA (máx.): 200 coli fecais por 100 mL ou 2000 coli
totais/100mL;
� BRASIL (SEMA/1976):
• Satisfatório: 1000 coli fecais/100 mL
• Muito Bom: 500 coli fecais/100 mL
• Excelente: 250 coli fecais/100 mL
10 - Poluição de corpos d’água
11 - Eutroficação
� Eutrofização ou Eutroficação é o fenômeno 
causado pelo excesso de nutrientes num 
corpo d´água, o que leva à proliferação 
excessiva de algas, que ao entrarem em excessiva de algas, que ao entrarem em 
decomposição levam ao aumento do número 
de microorganismos e à conseqüente 
deterioração da qualidade da água do dito 
corpo (rios, lagos, baías, estuários, etc).
13 - O processo de eutroficação: 
o princípio (oligotrófico)
14 - O processo de eutroficação: 
o meio (mesotrófico)
Lagoa Rodrigo de Freitas
15 - O processo de eutroficação: 
o fim (eutrófico)
Peixes agonizam na Lagoa RF Morte em massa de peixes na Lagoa RF
16 - O processo de eutroficação: 
o pior (completamente eutrófico)
A alteração da paisagem: 
morte do corpo d’água
A alteração da biota nativa