BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES 2

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BACILOS GRAM NEGATIVOS NÃO FERMENTADORES
NÃO FERMENTADOR = bactérias gram negativas não esporuladas com morfologia de bacilos, cocobacilos ou diplococos. Aeróbios obrigatórios, podendo crescer em anaerobiose na presença de nitrato e arginina. 
Crescem de forma abundante nos meios diferenciais (TSI, EPM ou Rugai), mas não os acidificam.
Geralmente não fastidiosos (crescem bem dentro de 24 horas de incubação).
 OCORRÊNCIA E SIGNIFICADO CLÍNICO
Encontrados normalmente na natureza, solo, água, plantas e ambiente hospitalar;
Patógenos oportunistas;
Compreendem 12 a 16 % do total de BGN isolados de material clínico;
Pseudomonas aeruginosa é a espécie mais isolada, seguida de Acinetobacter baumannii e Stenotrophomonas maltophilia.
 
PRINCIPAIS INDÍCIOS PARA RECONHECER UM NÃO FERMENTADOR
Colônias pigmentadas em agar sangue (amarelas, douradas, rosadas);
Odor doce ou de frutas;
Não fermentador da glicose nos meios diferenciais (ex: EPM);
Atividade da enzima citocromo-oxidase;
 OBS: Nem todos os NF são oxidase + 
Ausência de crescimento ou crescimento de colônias diminutas em MC.
FATORES QUE DFICULTAM A IDENTIFICAÇÃO DOS NF
A maioria dos microbiologistas não estão familiarizados com alguns NF;
Muitos dos meios de cultura não são sensíveis para identificar os NF;
Muitas espécies crescem lentamente a apresentam reações bioquímicas fracas que dificultam sua interpretação;
Meios vencidos no momento da identificação;
Kits comerciais com baixa precisão na identificação dos NF.
METABOLISMO
Degradam carboidratos pela via oxidativa (Via de Entner – Doudoroff) que necessita oxigênio para oxidar a glicose a ácido pirúvico sem formação de gás
PROVAS BIOQUÍMICAS PARA IDENTIFICAR OS NF
Utilização da glicose;
Crescimento em MacConkey;
Teste da oxidase;
Motilidade;
Produção de pigmento;
Crescimento em agar cetrimide;
Teste da gelatinase;
Redução de nitratos a nitritos;
Teste da descarboxilase e dehidrolase;
Teste da desoxirribonuclease;
Hidrólise da esculina;
Hidrólise da uréia;
Desaminação da fenilalanina;
Acetamida;
ONPG;
Utilização do malonato;
Produção de Indol;
Hidrólise do amido;
Produção de H2S.
Maior agente de infecção hospitalar (20% dos casos);
A infecção pode ocorrer por fontes endógenas e exógenas (desinfetantes, cremes de mão, sabões, fluídos de infusão, soluções oftalmológicas);
A trasmissão pode ocorrer pessoa-pessoa e objetos-pessoas;
5 a 10% das pessoas normais são portadoras de P. aeruginosa no TGI;
É resistente a maioria dos antimicrobianos;
Causa infecções mais freqüentemente em pacientes imunocomprometidos;
 Especialmente prevalente em pacientes com queimaduras, fibrose cística, leucemia aguda, transplantados de oragãos e drogaditos;
Geralmente causam septicemia, otite média e externa (nadadores), osteomielite, úlcera de córnea pós-trauma, meningite, infecção urinária e endocardite.
FATORES DE VIRULÊNCIA: expressão de adesinas, produção de biofilmes, secreção de enzimas hidrolíticas e produção de toxinas.
 DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Cresce bem em ágar sangue e MacConkey;
Morfologia colonial com odor característico (adocicado) e produção de pigmento verde (piocianina ou pioverdina) visível em Müller Hinton;
Acima de 95% das cepas isoladas de materiais clínicos apresentam as seguintes características:
Colônias grandes com odor de uva;
Produção de piocianina;
Reação da oxidase positiva em até 10 segundos;
Crescimento em ágar cetrimide a 37 ºC e 42 ºC 
Diferenciação com outras espécies de Pseudomonas
	BACTÉRIA
	BHI 4 ºC
	BHI 42 ºC
	GELATINA
	LECITINASE
	P. aeruginosa
	-
	+
	+
	-
	P. fluorescens
	+
	-
	+
	+
	P. putida
	+
	-
	-
	-
Amplamente distribuído na natureza e ambiente hospitalar;
Microbiota endógena em 25% da população e microbiota cutânea e respiratória de pacientes hospitalizados por longos períodos;
O trato digestivo de pacientes em UTI é um importante reservatório de A. baumanii multi resistente;
Causa freqüente de pneumonias em hospitais, relacionadas a cânulas endotraqueais e traqueostomias, além de meningites, infecções urinárias, infecções de pele e ferida, que podem progredir a sepsis; 
A. baumanii é a espécie mais isolada dentro do gênero com maior freqüência em imunodeprimidos e diabéticos;
Infecções geralmente associadas a procedimentos invasivos como uso de cateteres. 
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
A. baumanii ao Gram: pequenos diplococos gram negativos;
Ausência de hemólise e pigmentação das colônias em ágar sangue;
Bom crescimento em MacConkey, na forma de colônias rosadas com centro mais escuro, devido à acidificação da lactose;
Prova da oxidase negativa;
OF glicose oxidativo rápido;
Motilidade negativa;
Resistência a penicilina 
Crescente sua importância em ambiente hospitalar;
Pode colonizar imunodeprimidos e pacientes com fibrose cística;
FATORES DE RISCO PARA A COLONIZAÇÃO: ventilação mecânica, profilaxia com antibiótico de amplo espectro, quimioterapia, uso de cateteres e neutropenia;
Pode causar: bacteremia, ITU associada a instrumentação, conjuntivite, endocardite associada ao uso de drogas intravenosas ou próteses cardíacas, peritonite associada a diálise peritoneal, raramente pneumonia e meningite;
Normalmente isolada de TR, apesar de não ser clinicamente significativa na maioria dos casos.
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Colônias opacas em ágar sangue, que após 48 h podem se tornar verde lavanda devido a coloração dos eritrócitos pela hemólise do sangue;
Colônias com odor de amônia característico;
Crescem bem em MacConkey;
Teste da oxidase negativo;
Lisina e DNAse positivas;
 
Associada a surtos hospitalares de pneumonias, septicemias, infecções urinárias e de feridas, vinculados por desinfetantes contaminados, anestésicos e soluções parenterais contaminadas;
Tem sido associada a fibrose cística, sendo difícil sua erradicação do pulmão, podendo causar bacteremia e morte devido a falência pulmonar;
Pacientes com fibrose cística colonizados por B. capacia apresentam taxa de mortalidade acentuada.
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
As colônias podem ser amarelas, amarelo-esverdeadas ou não pigmentadas e não são fluorescentes;
OF glicose oxidativo, oxidase positiva e motilidade positiva;
Microbiota normal de pele e mucosas com maior freqüência em TR em menor freqüência em TG;
Pode ocasionalmente levar a infecções sistêmicas;
Tem sido isolada de sangue, LCR, secreção conjuntival, urina, endocardite, artrite e osteomielite;
Moraxella catarrhalis: microbiota normal de TRS e as infecções causadas por ela geralmente envolvem cepa endógena do paciente;
Mais freqüentemente associada a: otite média, sinusite, conjuntivite e pneumonia.
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Na coloração de Gram apresenta morfologia celular de diplococos gram negativos;
Oxidase e DNAse positivas (o que a diferencia de Neisseria spp.);
Imóveis;
Em ágar sangue e ágar chocolate produz colônias opacas pequenas, redondas, inteiras, cinza-esbranquiçadas de 3 a 5 mm de diâmetro.
Raramente isolada de amostras clínicas;
Altamente patogênica em crianças prematuras (taxa de mortalidade de 55%), podendo levar a meningite neonatal;
Pode causar pneumonia em adultos imunossuprimidos.
DIAGNÓSTICO LABORATORIAL
Ao Gram: bacilos gram negativos finos;
Indol positivo
Produz colônias com pigmento amarelo pálido;
Cresce fracamente em MacConkey ou não crescem;
Glicose oxidativa;
Oxidase positiva;
Motilidade negativa.
ANTIBIOTICOTERAPIA
Possuem resistência acentuada a maioria dos antimicrobianos
Os padrões de sensibilidadepodem auxiliar na identificação;
Os antimicrobianos recomendados pelo NCCLS (National Comittee for Clinical Laboratory Standards) para testar frente a isolamentos de P. aeruginosa e Acinetobacter spp. são:
Amicacina
Gentamicina
Ceftazidima
Piperacilina
Aztreonam
Cefoperazona
Cefepime
 * Para cepas isoladas de urina
 POLIMIXINA !!!!!!!!!!!!
Pseudomonas aeruginosa
Acinetobacter spp.
Stenotrophomonas maltophilia
Burkholderia cepacia
Moraxella spp.
Chryseobacterium (Flavobacterium) meningosepticum
- Ciprofloxacina
- Imipenem
- Tobramicina
*Carbenicilina
*Tetraciclina
*Norfloxacina/Ofloxacina
* Sulfametoxazol/trimetopim
Prof. Andréa Emilia Marques Stinghen
Microbiologia Clínica