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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS COLÉGIO TÉCNICO SETOR DE PATOLOGIA CLÍNICA MICROBIOLOGIA CLÍNICA Nome: Esther Iolanda Silva Frois Turma: P3A Data: 25 abr. 2014 UROCULTURA QUANTITATIVA INTRODUÇÃO As infecções do trato urinário (ITU) estão entre as doenças infecciosas mais vistas no laboratório, particularmente em crianças, adultos jovens e mulheres sexualmente ativas, sendo apenas menos freqüente que as do trato respiratório e são as mais freqüentes entre as infecções nosocomiais em todo o mundo. Define-se como ITU tanto as infecções do trato urinário baixo (cistites) e como as do trato urinário alto (pielonefrites). A maioria das ITUs é diagnosticada através de dados clínicos e laboratoriais como piúria e/ou bacteriúria e também pela urocultura, com contagem de colônias. A urocultura é, por definição, o cultivo da urina, que permite verificar a presença de microorganismos localizados na urina, uretra e nos rins; podendo ser qualitativa ou quantitativa. Nesse ultimo caso, o resultado é considerado positivo quando são isolados 100.000 colônias (termo de identificacação das bactérias) de microorganismos por 1ml de urina e dessa forma constatar a infecção do Trato Urinário. Para realizar a urocultura, os meios mais utizados para cultivo primário são Ágar CLED e Ágar Mac Coukey. Para o cultivo a fim de realzar a urocultura qualitativa, é realizado o plantio primário com a alça de platina de rotina e se analisa o crescimento ou não da bactéria. Para a urocultura quantitativa, é realizado o cultivo primário com uma alça plástica esterilizada calibrada com volume definido, que pode ser de 0,01mL ou 0,001mL. Após o período de incubação, se houver o crescimento bacteriano, deve se contar a quantidade de colônias, que dará a quantidade de Unidades Formadoras de Colônia (UFC) que cresceram, de acordo com o volume de urina plantado, que é dado pela alça plástica utilizada. Caso tenha sido utilizada a alça de 0,01 mL ou 10 μL (1:100), a presença de 1 colônia indica que há 100 UFC/mL na urina. E, se for utilizado a alça de 0,001 mL ou 1μL e houver a presença de 1 colônia, ela equivalerá a 1.000 UFC/mL da urina. Se trata de um valor que leva em conta todas as bactérias presentes na urina e quando se encontra a quantidade de Unidades Formadoras de Colônia (UFC): • Acima de 100.000 UFC/mL = indício de infecção • De 10.000 a 90.000 UFC/mL = suspeita de infecção • De 0 a 9.000 UFC/mL = sem significado clínico Onde, qualquer isolamento de bacilos Gram-negativos a partir de punção suprapúbica é significativo, por se tratar de uma urina estéril. Para a urocultura, utiliza-se o jato médio da primeira urina da manhã ou retida por um intervalo de no mínimo 2 hs, ou colhida por punção supra-púbica; de forma com que esteja livre de contaminação pelo canal . Quando há o crescimento de mais de 3 tipos de bactérias, há a suspeita de contaminação e ocorre o pedido de recoleta. OBJETIVOS Aprender a realizar a urocultura e verificar a presença de bactérias na amostra de urina usada, caso estivesse postiva para infecção. METODOLOGIA Todo o procedimento foi realizado em área limpa com Alcool 70° e em torno do bico de Bunsen. • Plantio primário da urina em Agar CLED 1. Semear a amostra usando uma alça calibrada plástica esterilizada (0,01 ml) em 3 áreas da placa de Petri, em zigue-zague; 2. Incubar a 37°C, por 24 hs. 3. Observar o crescimento bacteriano e quntificar as colonias. • Coloração de Gram de gota de urina não centrifugada 1. Realizar o esfregaço de 1 gota da amostra em uma lâmina limpa e fixar com calor; 2. Usando o método de Gram, corar a lâmina; 3. Secar e visualizar no microscópio ótico, na objetiva de 1000x. APRESENTAÇÃO E ANÁLISE DOS RESULTADOS • Plantio primário: não houve o crescimento de microorganismos no Ágar usado. • O Gram de gota: não foram visualizados microorgansimos na lâmina vista. Por não ter ocorrido o crescimento bacteriano e formação de colônias na placa, não haviam microorganismos infectando a urina. CONCLUSÃO Cultura (-): não foram encontrados microorganismos na amostra analisada.
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